Seo, Yong Bae;Choi, Seong-Seok;Lee, Jong Kyu;Kim, Nan-Hee;Choi, Mi Jin;Kim, Jong-Myoung;Jeong, Tae Hyug;Nam, Soo-Wan;Lim, Han Kyu;Kim, Gun-Do
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권11호
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pp.1801-1809
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2015
A phytoene synthase gene, crtB, was isolated from Kocuria gwangalliensis. The crtB with 1,092 bp full-length has a coding sequence of 948 bp and encodes a 316-amino-acids protein. The deduced amino acid sequence showed a 70.9% identity with a putative phytoene synthase from K. rhizophila. An expression plasmid, pCcrtB, containing the crtB gene was constructed, and E. coli cells containing this plasmid produced the recombinant protein of approximately 34kDa , corresponding to the molecular mass of phytoene synthase. Biosynthesis of lycopene was confirmed when the plasmid pCcrtB was co-transformed into E. coli containing pRScrtEI carrying the crtE and crtI genes encoding lycopene biosynthetic pathway enzymes. The results obtained from this study will provide a base of knowledge about the phytoene synthase of K. gwangalliensis and can be applied to the production of carotenoids in a non-carotenoidproducing host.
E. coli의 \beta-galactosidase$ 유전자를 미꾸라지 수정난에 미세현미 주입하고 이를 분석함으로써 미꾸라지에 외래 유전자 이식을 위한 reporter 유전자로서의 유용성을 검토하였다 X-gal 염객분석, 4-methylumbelliferyl-$\beta$-D-galactoside (MUG) 분석을 수행한 결과 유전자 이식 처리군 및 대조군에서 모두 \beta-galactosidase$의 활성이 관찰되었으며 PCR, dot blot 및 southern blot분석결과 역시 유전자 이식 처리군과 대조군에서 모두 유사한 양상을 나타내었다. 처리군 및 대조군의 PCR product의 염기서열은 E. coli의 \beta-galactosidase$ 유전자와 매우 높은 homology를 갖고 있었으며 pH에 따른 X-gal 염색 분석을 수행한 결과 미꾸라지에 관찰되는 본 효소는 pH 4.5에서 가장 높은 활성을 나타내었다. 따라서 앞으로 미꾸라지를 대상으로 한 외래 유전자 이식시 E. coli의 \beta-galactosidase$ 유전자의 reporter 유전자로서의 사용은 신중한 재검토가 이루어져야만 할 것으로 판단된다.
Mazzoni, Maurizio;Merialdi, Giuseppe;Sarli, Giuseppe;Trevisi, Paolo;Bosi, Paolo
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제23권6호
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pp.777-785
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2010
The effect of two doses of different sources of zinc, inorganic (zinc oxide) or chelated (zinc glutamate chelate), on morphology and turn-over of the small intestine was assessed in early-weaned pigs orally challenged with enterotoxigenic E. coli K88 (ETEC). Sixty pigs weaned at 21 days were assigned to one of the following 5 diets: control (C); C+Zinc oxide (ZnO), either a 200 or a 2,500 mg Zn/kg dose; or C+zinc chelate with glutamic acid (Glu-Zn), either a 200 or a 2,500 mg Zn/kg dose. On d 2, the pigs were orally inoculated with 1.5 ml of a $10^{10}$ CFU/ml E. coli K88ac O148 suspension. Zinc supplements did not improve the performance of the pigs, but on d 5 faecal excretion of ETEC was reduced, and this was mainly due to high zinc doses (p<0.05). The villous height in the duodenum was improved by the zinc supplements (p<0.01) whatever the source and the level, whereas no effect was seen in the other two tracts of small intestine. The diet did not affect apoptosis and mitosis counts, while ETEC-susceptible pigs had more mitotic cells in the villi than non-susceptible pigs, particularly in the jejunum (p<0.01). The duodenum had fewer mitotic cells in the villi (p<0.05) and in the crypts (p<0.01) and more apoptotic cells in the villi. High dietary doses of ZnO or Zn-Glutamate improve villous height of the duodenum, but not of the jejunum and the ileum, and do not affect the epithelial proliferative activity and apoptotic index of intestinal mucosa of early-weaned pigs orally challenged with ETEC.
본 연구에서는 신선 농산물의 미생물학적 안전성을 제고하기 위해 항균 효과가 있는 clove bud essential oil(CBEO)과 mild heat(MH) 처리를 병합 처리하여 Escherichia coli O157:H7이 접종된 red oak leaf의 미생물 수 변화를 측정하였다. 0.2% CBEO와 $50^{\circ}C$ MH 병합 처리구는 단순 물세척 처리구보다 1.45 log CFU/g 더 낮은 미생물 수를 나타내어 모든 병합 조건 중 가장 높은 미생물 제어 효과를 보였다. 또한, 본 병합 처리구는 비 세척 처리구와 비교하여 9일간의 저장 기간 동안 1.67~2.25 log CFU/g 더 낮은 미생물 수를 나타내어 미생물 제어 효과가 지속됨을 확인하였다. 따라서 이러한 결과들로부터 CBEO와 MH의 병합 세척 처리는 저장 중 red oak leaf와 같은 신선 농산물의 미생물학적 안전성을 확보하는 데 효과적으로 사용될 수 있다고 판단된다.
S. aureus, E. coli, C. albicans, A. niger 등 4종의 식중독균에 대해 agar diffusion법을 이용하여 홍삼(Panax ginseng C.A.Meyer)으로 부터 조제한 홍삼농축액, 조사포닌, 비수용성 분획에 대한 항균활성을 조사하였다. 그 결과, 홍삼농축액 및 비수용성분획은 E. coli, C. albicans, A. niger에 대해서는 항균활성을 나타내지 않았고 조사포닌도 고농도인 30%를 제외한 모든 농도에서 항균활성을 나타내지 않았다. S. aureus는 Gram positive 세균으로서 화농성 식중독의 원인균이면서 동시에 아토피성 피부염의 원인균으로 알려져 있는데, 홍삼농축액은 30% 농도에서 이 균에 대해 항균활성을 나타내었고 조사포닌도 7.5%에서 항균활성을 나타내었다. 홍삼으로부터 조제한 비수용성 분획도 10~200 mg/mL 농도로 실험한 결과 모든 분획에서 항균효과를 나타내었다. 조사포닌 및 홍삼농축액의 미생물 생육저해양상을 조사하기 위해 미리 S. aureus를 접종한 0.85% 생리식염수에 농축액 및 조사포닌을 농도별로 첨가하고 35℃, 12시간 배양한 후 생균수를 측정한 결과, 홍삼농축액은 10% 이상의 농도에서, 조사포닌은 2% 이상의 농도에서 각각 균의 생육을 억제하였다. 그러나 이러한 농도에서도 생균수는 완전히 사멸되지 않아서 홍삼농축액 및 조사포닌의 S. aureus에 대한 생육억제작용은 살균작용이 아닌 정균 작용으로 추정되었다. 사포닌의 항균활성 유무를 확인하기 위해 순수 분리된 ginsenoside 6종(PT saponin, PD saponin, ginsenoside-Rb2,-Rc,-Rd,-Rf,-Rg2)의 항균활성을 50~200 ㎍/mL의 농도에서 조사한 결과 모두 항균효과가 관찰되지 않아서 ginsenoside는 S. aureus에 대해서는 항균효과가 없는 것으로 사료된다. 한편 사포닌을 제외한 비사포닌 성분인 비수용성분획에 대해 상기의 4종 병원성미생물을 대상으로 항균활성을 조사한 결과 E. coli, C. albicans, A. niger에 대해서는 항균효과가 관찰되지 않았고 S. aureus에 대해서만 선택적인 항균활성을 나타내었다. 항균활성 발현 비수용성분획 중 15% methanol분획(MF-1)이 가장 높은 항균활성을 나타내어 이에 대한 최소생육저해농도를 조사한 결과 0.625 mg/mL 이었다. MF-1 분획을 질량분석기(HPLC-MS)로 조사한 결과 주요한 활성성분은 분자량 179.55 및 187.55를 가지는 물질로 추정되었다.
This study was conducted to investigate the antimicrobial activity of grapefruit extracts and polylysine mixture against food-borne pathogens. The mixture was showed a potent and quick antibacterial activity for 5 major bacteria causing food poisoning i.e. Escherichia coli, Escherichia coli O-157, Salmonella typhi, Staphylococcus aureus, Vibrio cholerae. The antibacterial effect of the mixture on the ordinary bacteria inhibiting on the surface of lettuce was lasted even 6 hrs after the treatment, however the mixture was non-effective on the color, smell and taste of lettuce. The treatment with 10% mixture solution of the foods such as fish, meat, rice and bread suppressed the growth of the bacteria and kept the foods more freshly than the untreated foods.
This study was performed to screen the antimicrobial activities and proteolytic enzyme stability of the acidified extract of the Blue mussel Mytilus edulis. The acidified extract showed potent antimicrobial activities against Gram-positive bacteria, Bacillus subtilis, and Gram-negative bacteria, Escherichia coli D31, but had no activity against Candida albicans. Treatment of extract with trypsin completely abolished all or significant antibacterial activity against the tested bacteria, but slightly decreased antimicrobial activity against B. subtilis, and treatment of extract with chymotrypsin retained almost antibacterial activity against the tested bacteria except for E. coli D31. To confirm the additional enzyme stability of the extract, antimicrobial activity of the extract was tested after treated with several enzymes. Enzymes treated extract showed potent antimicrobial activity against B. subtilis and its activity was also retained for 5 h after trypsin treatments. Non-proteinaceous materials in the acidified extract also showed strong DNA-binding ability but did not show bacterial membrane permeabilizing ability. All our results indicate that mussel extract might contain the proteinaceous or non-proteinaceous antibacterial materials target not bacterial membrane but intracellular components. These results could be used to develop mussel extract as an additive for the improvement of stability or antimicrobial activity of antibiotics against specific bacteria.
Western blot analysis of lysates of Streptococcus pneumoniae revealed a single polypeptide species that cross-reacted with E. coli RecA antiserum. The apparent molecular weight of this putative RecA protein analog (RecAsp) was 24, 000 smaller than any other known RecA analogue. The RecAsp protein was present at the same level in competent and non-competent cells.
Because of the growing demand for protect and maintain one's health, population search for good water increase very rapid in recent. This study was performed to investigate the at 432 sites natural spring water quality in Seoul. Samples for analysis were collected form January to December in 2001. The quality of water was evaluated by analyzing fourty items of Korea drinking water criteria. The main results of this study were as follows 1. The rate of natural spring water was 26.6% and the Total colony, E.Coli and Yersinia of the total incongruence cause was 67.9% 2. The distribution of phisical-chemical item on the incongruence cause was Residues on evaporation 8.6%, Turbidity 4.3%, Nitrate nitrogen 2.5%, pH 2.5% and F-1,2% 3. The most population area of mean drinking population per one day was that man of Gangnam was 312.92 person. Next to Yangcheon Seocho Seodaemun and Dongjak was 229.6, 195.31, 190.50, 190,00 person. 4. The more person and the number of natural spring water, the more non passed drinking criteria natural spring water except for Gangnam and Gangbuk. 5. The corelationship of drinking population and results of the tests do not exist and the corelationship of results and Total colony, E.Coli, Color, Turbidity, KMNO4 consumption, Residues on evaporation, Fe, Mn, Zn and A1 are existed positive relationship.
M1 RNA, the catalytic subunit of Escherichia coli RNase P, is an essential ribozyme that processes the 5' leader sequence of tRNA precursors (ptRNAs). Using KS2003, an E. coli strain generating only low levels of M1 RNA, which showed growth defects, we examined whether M1 RNA is involved in polycistronic mRNA processing or degradation. Microarray analysis of total RNA from KS2003 revealed six polycistronic operon mRNAs (acpP-fabF, cysDNC, flgAMN, lepAB, phoPQ, and puuCBE) showing large differences in expression between the adjacent genes in the same mRNA transcript compared with the KS2001 wild type strain. Model substrates spanning an adjacent pair of genes for each polycistronic mRNA were tested for RNase P cleavage in vitro. Five model RNAs (cysNC, flgMN, lepAB, phoPQ, and puuBE) were cleaved by RNase P holoenzyme but not by M1 RNA alone. However, the cleavages occurred at non-ptRNA-like cleavage sites, with much less efficiency than the cleavage of ptRNA. Since cleavage products generated by RNase P from a polycistronic mRNA can have different in vivo stabilities, our results suggest that RNase P cleavage may lead to differential expression of each cistron.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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