In the screening of antiviral materials produced by actinomycetes, an isolate named B25 was fond to produce an antibiotic substance ASA, which showed a strong inhibitory activity against tobacco mosaic virus (TMV) infection. ASA was purified from culture broth of B25 by silica gel column chromatography, preparative TLC, and reversed phase HPLC. Also MS, IR, UV spectrum, and melting point of ASA were determined and analysed. ASA was white powder soluble in dimethyl sulfoxide, chloroform, and ethyl acetate, having absorption peaks at 223 and 328 nm in UV-VIS spectrum, and had a molecular weight of 548. ASA showed strong inhibitory effect on TMV infection when it was applied as a mixture of TMV to the upper surface of leaves of a local lesion host (Nicotiana tabacum c. Xanthi-nc). It also showed antimicrobial effect against yeast and some phytopathogenic fungi.
동물계에서 항바이러스와관련된 dsRNA 의존성 인산화 효소(PKR)의 유전자를 식물체에서 발현시킬 경우 PKR에 의한 단백질합성 및 식물바이러스의 증식조절 가능성에 대한 기초자료를 확보하기 위하여 사람에서 분리된 PKR cDNA를 Agrobacterium 방법에 의하여 연초식물체(Nicotiana tabacum cv. Xanthi-nc)로 형질전환시켰다. HindIII/PstI처리에 의해 얻어지는 약 1.8kb의 phPKR cDNA절편을 일련의 유전자 조작 방법을 통하여 식물발현벡터인 pBI121에 도입하여, p12168을 재조합하였다. 이를 A. tumefaciens LBA 4404에 형질전환시켜 연초식물체형질 전환에 이용하였다. 2mg/l BA와 0.5mg/l NAA가 포함되고 100$\mu\textrm{g}$/ml의 kanamycin이 첨가된 MS배지에서 shooting시킨 후 phytohormone이 첨가되지 않은 MS배지상에서 rooting을 시켜 형질전환 연초식물체를 얻었으며, 형질전환식물체는 정상식물체와 유사한 생육양상을 나타내었다. 형질전환식물체의 유전자도입은 hPKR cDNA의 전사부여는 RT-PCR 방법에 의하여 확인되었다.
Using RT-PCR, a cDNA encoding tomato (Lycopersicon esculentum) ACC oxidase has partially been cloned, sequenced and identified. The nucleotide suquence of the clone was in the coding region and shared about 80% of homology iwht the other ACC oxidase genes of tomato, and 70∼84% with those of other plants such as Oryza sativa, Nicotiana tabacum and Helianthus annuus. In the wounded tomato leaves, this nucleotide transcripts were accumulated rapidly and declined slowly thereafter. These results suggested that the predicted clone might be another member of tomato ACC oxidase gene family.
Free and glycosidically bound volatiles from three green tobacco leaves(NC 82, KF 109 and Br-21) were separated by nonionic resin Amberlite XAD-2 adsorption column chromatography and election by selective solvents. Aglycones from the glycosidically bound fractions were released by enzymatic hydrolysis with almond B-glucosidase. A total of 20 components identified from free and glycosidically bound fractions, the major components were benzaldehyde, benzyl alcohol, 2-phenylethyl alcohol, 3-oxo- -ionol, 3-hydroxy-B-ionone, 3-oxo-7, 8-dihydro-n-ionol and scopoletin. Six Cl.B norisoprenoids identified in this study, which have been described to possess a characteristic tobacco aroma-enhancing effect, were not presented in free forms but rather bound glycosidic forms.
This experiment was carried out to investigate the degrees and directions of dominance, and gene distributions by analysing diallel crosses of oriental varieties. The analysis of Wr-Vr indicated non-allelic gene interaction for days to (lowering and number of leaves. Five Plant characteristics showed different degrees of dominance : incomplete dominance for Plant height and leaf shape, over dominance for , wield and sugar, and complete dominance for nicotine. It was shown that additive genetic variance was predominant for plant height, leaf shape, and total sugar. More number of dominant genes were present in Kavala and canthi for Plant height; Basma, Samsun and Izmir for leaf shape ; and Basma and Samsun (or nicotine. Their directions of dominance were tall height, narrow leaves, and low nicotine, respectively.
Three levels of nitrogen, phosphate and potassium were applied to tobacco for the establishment of the optimum rate of the fertilizers for yield and quality. 1 . The rate increment of nitrogen and potassium increased tobacco growth, but phosphate were non - significant between rate. 2. The contents of total-nitrogen and total-alkaloid in the leaf were increased, with the increase of nitrogen rate while the effect of phosphate and potassium were negligible. 3. The yield and quality of the tobacco were increased with the increasing rate of nitrogen and potassium fertilizer but phosphate should little difference.
This study was conducted to obtain the basic information on the burley tobacco (Nicotiana tabacum L.) curing methods. The effects of the three kinds of curing methods on the dry weight losses during curing, chemical contents and physical properties of cured leaves, and organoleptic and smoking qualities were observed. The dry weight losses during curing was the highest in the stalk curing, and the lowest in the conventional priming. The longer the curing periods was, the more the loss of dry weight. The percent of the excessive dried leaves was high and the price per kilogram was low in the conventional priming. The chemical contents and the physical properties of the cured leaves in the conventional priming were similar to those of yellowing or browning stage of curing. But, the chemical contents and the physical properties of the cured leaves in the stalk curing were comparable to those of the air curing. The smoking quality was the best in the stalk curing.
We have designed and constructed a gene encoding novel high essential amino acid encoding protein(HEAAE). The resultant DNA fragment was tested for in vitro and in vivo expression and then cloned into plant expression vector pBI121, under the control of the cauliflower mosaic virus 35S promoter. Agrobacterium tumefaciens, strain LBA4404, was subsequently transformed with this new construct and Nicotiana tabacum var. Xanthi transgenic plants were obtained. DNA analysis by Southern procedure confirmed the presence of the multi-copy number of genes in the transformed plants. Analysis of RNA and protein synthesized in these transgenic plants demonstrated the stable expression of this gene.
Turnip yellow mosaic virus (TYMV) is a positive strand RNA virus that infects mainly Cruciferae plants. In this study, the TYMV genome was modified by inserting an extra subgenomic RNA promoter and a multiple cloning site. This modified TYMV was introduced into Nicotiana benthamiana using a Agrobacterium-mediated T-DNA transfer system (agroinfiltration). When a gene encoding $\beta$-glucuronidase or green fluorescent protein was expressed using this modified TYMV as a vector, replication of the recombinant viruses, especially the virus containing $\beta$-glucuronidase gene, was severely inhibited. The suppression of replication was reduced by co-expression of viral silencing suppressor genes, such as tombusviral p19, closteroviral p21 or potyviral HC-Pro. As expected, two subgenomic RNAs were produced from the recombinant TYMV, where the larger one contained the foreign gene. An RNase protection assay revealed that the recombinant subgenomic RNA was encapsidated as efficiently as the genuine subgenomic RNA.
This experiment was carried out to select of heterokaryon based on the different buoyant densities of protoplasts. Protoplats were isolated from cultured cells (calli) of Nicotiana tobacum(cv. BY4) and from mesophyll cells of N. glauca. The two types of protoplats were fractionated by centrifugation in an iso-osmotic (770 mOs/kg. H2O) density gradients condition. Major difference in the buoyant density exists between two types of protoplasts isolated from different cells. The mesophyll protoplasts were fractionated in the higher gradient interphases than that of callus protoplasts. The two types of fractionated protoplasts were fused with 40% polyethylene glycol (PEG), and the protoplasts treated with PEG were separated by centrifugation in the same density gradients condition. The heterokaryons were fractionated in the intermediate density gradients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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