• 제목/요약/키워드: Neisseria lactamica 2118

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Neisseria lactamica 2118이 생성하는 $\beta$-Galactosidase의 정제 및 성질 (Purification and Properties of $\beta$-Galactosidase from Neisseria lactamica 2118)

  • 이종수;곽인영;김나미
    • 자연과학논문집
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    • 제4권
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    • pp.59-68
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    • 1991
  • p-Aminopheny1-$\beta$-D-thiogalactopyranoside agarose 친화성 크로마토그라피를 이용하여 Neisseria lactamica 2118이 생성하는 $\beta$-galactosidase를 정제한 후 몇가지 효소학적 성질을 조사 하였다. Neisseria lactamica 2118이 생성하는 $\beta$-galactosidase는 구성효소로서 lactose와 IPTG에 의하여 유도되지 않았다. 정제효소의 작용최적온도는 $35^{\circ}C$, pH는 7.5이었고 $50^{\circ}C$로 15~60분 처리시 약 80%의 활성이 유지되었으며 pH 6.0~9.0에서 안정 하였다. 또한 $Hg^(2+)$$Co^(2+)$에 의하여 그 활성이 저해 되었다.

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Neisseria lactamica 2118의 $\beta$-galactosidase 유전자의 대장균으로의 클로닝 (Molecular Cloning of $\beta$-Galactosidase Gene from Neisseria lactamica 2118 into Escherichia coli MC 1061)

  • 이종수
    • 자연과학논문집
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    • 제5권1호
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    • pp.37-45
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    • 1992
  • Neisseria lactamica 2118 의 $\beta$-galactosidase 유전자를 Southern Hybridization 과 colony hybridization을 통하여 Escherichia coli MC 1061에 클로닝 시켰다. $\beta$-Galactosidase 유전자를 함유하는 6.5 Kb EcoR I 단편과 7.2 Kb BamH I 단편들을 pMC 1871의 lac Z 유전자를 probe로 한 Southern hybridization으로 얻고 이들을 pBR 322에 삽입한후 Escherichia coli MC 1061에 형질전환 시키고 이들 형질전환체들을 동일 probe로 colony hybridization 시켜 최종적으로 3주의 $\beta$-galactosidase positive clone들을 얻었다. 이들의 재조합 plasmid에는 Neisseria lactomica 2118 염색체 DNA의 약 7.2Kb BamH I 단편이 삽입되어 있음을 확인 하였고 probe와 상동성이 가장 강한것으로 추정되는 pNL 24에 대한 제한효소지도를 작성 하였다.

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