Kim, Dong-Uk;Lee, Minho;Han, Sangjo;Nam, Miyoung;Lee, Sol;Lee, Jaewoong;Woo, Jihye;Kim, Dongsup;Hoe, Kwang-Lae
Genomics & Informatics
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제17권3호
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pp.28.1-28.9
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2019
Bar-code (tag) microarrays of yeast gene-deletion collections facilitate the systematic identification of genes required for growth in any condition of interest. Anti-sense strands of amplified bar-codes hybridize with ~10,000 (5,000 each for up-and down-tags) different kinds of sense-strand probes on an array. In this study, we optimized the hybridization processes of an array for fission yeast. Compared to the first version of the array (11 ㎛, 100K) consisting of three sectors with probe pairs (perfect match and mismatch), the second version (11 ㎛, 48K) could represent ~10,000 up-/ down-tags in quadruplicate along with 1,508 negative controls in quadruplicate and a single set of 1,000 unique negative controls at random dispersed positions without mismatch pairs. For PCR, the optimal annealing temperature (maximizing yield and minimizing extra bands) was 58℃ for both tags. Intriguingly, up-tags required 3× higher amounts of blocking oligonucleotides than down-tags. A 1:1 mix ratio between up- and down-tags was satisfactory. A lower temperature (25℃) was optimal for cultivation instead of a normal temperature (30℃) because of extra temperature-sensitive mutants in a subset of the deletion library. Activation of frozen pooled cells for >1 day showed better resolution of intensity than no activation. A tag intensity analysis showed that tag(s) of 4,316 of the 4,526 strains tested were represented at least once; 3,706 strains were represented by both tags, 4,072 strains by up-tags only, and 3,950 strains by down-tags only. The results indicate that this microarray will be a powerful analytical platform for elucidating currently unknown gene functions.
Objective: To prevent low back pain, an objective evaluation tool to evaluate pelvic mobility and exercise to improve the flexibility of the lumbar region is needed. The purpose of this study was to compare the results of pelvic mobility measurements using the Wii Balance Board (WBB) and Sensbalance Therapy Cushion (STC), evaluate the usefulness of the STC as a tool for measuring pelvic mobility. Design: Cross-sectional study. Methods: Fifty healthy subjects participated in this study. The subjects performed pelvic mobility range, proprioception, reaction time and reach of the arm using the STC. The pelvic movement parameter was measured two times to determine the intra-rater reliability. To measure the correlation between lumbar muscle tension and pelvic mobility, Myovision was used to measure tension of L4, L5 level erector spinae muscle. Correlations between measured variables were checked to determine the validity of the pelvic mobility assessment tool. Results: STC showed high test-retest reliability in pelvic tilt measurement and reaching task [intraclass correlation coefficients (3,1)=0.804-0.915]. The relationship between WBB and STC showed a significant positive correlation with the pelvic tilt and reaching task (p<0.05). Posterior tilt and erector spinae activation (Lt. L5) showed a significant negative correlation (p<0.05). Left, right tilt and erector spinae activation (L5) showed a significant negative correlation (p<0.05). Conclusions: This study confirmed the advantages of the STC and found efficiency as an objective measuring device of pelvic mobility.
Sepsis is the leading cause of death in critically ill patients. Today, around 60% of all cases of sepsis are caused by Gram-negative bacteria. The cell wall component lipopolysaccharide (LPS) is the main initiator of the cascade of cellular reactions in Gram-negative infections. The core receptors for LPS are toll-like receptor 4 (TLR4), MD-2 and CD14. Attempts have been made to antagonize the toxic effect of endotoxin using monoclonal antibodies against CD14 and synthetic lipopolysaccharides but there is as yet no effective treatment for septic syndrome. Here, we describe an inhibitory effect of a phosphatidylethanolamine derivative, PE-DTPA (phosphatidylethanolamine diethylenetriaminepentaacetate) on LPS recognition. PE-DTPA bound strongly to CD14 ($K_d$, $9.52{\times}10^{-8}M$). It dose dependently inhibited LPS-mediated activation of human myeloid cells, mouse macrophage cells and human whole blood as measured by the production of tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) and nitric oxide, whereas other phospho-lipids including phosphatidylserine and phosphatidylethanolamine had little effect. PE-DTPA also inhibited transcription dependent on $NF-{\kappa}B$ activation when it was added together with LPS, and it rescued LPS-primed mice from septic death. These results suggest that PE-DTPA is a potent antagonist of LPS, and that it acts by competing for binding to CD14.
Mutagenic potential of HM10411 (recombinant human granulocyte colony stimulating factor) was evaluated by bacterial reverse mutation test, in vitro chromosome aberration test and in vivo micronucleus test. The bacterial reverse mutation test was performed using the histidine auxotroph strains of Salmonella typhimurium TA100, TA1535, TA98, TA1537 and tryptophan auxotroph strain of Escherichia coli WP2 uvrA. The negative results of the bacterial reverse mutation test suggest that HM10411 does not induce mutation, in the genome of Salmonella typhimurium and E. coli under the conditions used. In addition, it has little clastogenicity either in vitro chromosome aberration test or in vivo micronucleus test. For in vitro chromosomal aberration test, Chinese hamster lung(CHL) cells were exposed to HM10411 of 23, 46 or 92 $\mu\textrm{g}$/ml for 6 or 24 hours in the absence and for 6 hours in the presence of metabolic activation system. There was no significant increase in the number of aberrant metaphase in HM 10411-treated groups at any dose levels both in the presence and absence of metabolic activation system. The micronucleus test was carried out using specific pathogen free(SPF) 7-week old male ICR mice, The test item, HM10411 was intraperitoneally administered at 1150, 2300 or 4600 $\mu\textrm{g}$/kg once a day for 2 consecutive days. There was no significant increase in the frequencies of micronucleated polychromatic erythrocytes(PCEs) at any treated groups compared with negative control group. Therefore, these results demonstrate that the test item, HM10411, was not mutagenic under the condition of these studies.
Objectives: This study investigates the mechanism of Hwanggeum-tang (HGT) and Gamchosasim-tang (GST) on inflammatory bowel disease (IBD). Methods: The mice (C57BL/6N) were treated with distilled water and 3% dextran sulfate sodium (DSS) to experimentally induce ulcerative colitis. The mice were divided into 7 groups of (6 mice: normal, negative control, positive control (with sulfasalazine), 4 experimental groups (with HGT and GST, respectively). RAW 264.7 cells were used for cell experiments. The experiment was conducted in two ways: in vitro and in vivo. Results: In the experimental group (HGT, GST) of in vitro experiments, NO production decreased, and significant changes in gene expression and protein activation were observed. The length of the colon recovered in the experimental groups (HGT, GST) of the in vivo experiment was longer than that of the negative control group, and the mucosal barrier was recovered. Sone significant changes in the amount of mRNA expression were partially observed, and significant changes in protein activation also were confirmed. Conclusions: HGT and GST are effective in treating IBD caused by DSS. In the same herbal preparation group, the higher the concentration, the better the experimental effect, and when the same concentration was tested, HGT was more effective than GST. Herbal medicine has a higher antioxidant effect than sulfasalazine, so it is also excellent for cell protection.
Interferon regulatory factors (IRFs) are a family of transcription factors essential to the control of antiviral immune response, cell growth, differentiation and apoptosis. IRF10 of zebrafish (Danio rerio) was negative regulation of the interferonΦ1 and 3 response in vitro. In this study, we analyze the induction of in vivo immune response activation from the IRF10 gene of zebrafish and the protective effect against VHSV. As the results, the group inoculated with IRF10 expression vectors, there was no expression of IFNΦ1, suggestion that IRF10 may function as a negative regulator of IRF3, which binds to the IFNΦ1 promoter. And other types of interferon genes (IFNΦ2-4) are thought to have been activated, inducing to the expression of pro-inflammatory cytokine and Mx genes. As the results of challenge test performed at 14 days after inoculation of the expression vectors, the maximum survival rate [50% (1㎍ DNA) and 42.5% (10㎍ DNA)] for IRF10 group were recorded. Meanwhile, the survival rates of pcDNA3.1 and PBS as the control groups were 10% and 15%, respectively. This study suggests that the possibility that activation of IRF10 molecule could be exploited as a VHS control method.
Background: In the thymus, developing thymocytes continually interact with thymic epithelial cell components. Self MHC restriction of mature T cells are imposed in the thymus through interaction of immature double positive thymocytes and thymic cortical epithelial cells. The site of negative selection, however, is a matter of debate. Through systemic injection of anti-TCR antibody or antigenic peptides, investigators suggested that most of the negative selection occurs in the thymic cortex. But the requirements for negative selection, i.e cellular counterparts and costimulatory molecules are more available in the medulla or cortico-medullary junction rather than in the thymic cortex. Methods: The direct and indirect pathways of thymocyte death after systemic anti-TCR antibody injection were separated through several experimental systems. B6 mice were either adrenalectomized or sham-adrenalectomized to evaluate the role of endogenous glucocorticoids from adrenal gland. Role of TNF were evaluated through using TNF receptor double knockout mice. Results: We found that without indirectly acting mediators such as $TNF-\alpha$ or corticosteroid, double positive thymocyte death were minimal by systemic injection of anti-TCR antibody in TNF receptor double knockout neonatal mice. Also by analyzing neonatal wild-type mice with adoptively transferred mature T cells, only peripheral activation of mature T cells could induce extensive double positive thymocyte death. Conclusion: Thus, systemically injected anti-TCR antibody mediated thymocyte death are mostly induced through indirect pathway.
인터넷 보급의 확산과 전자상거래의 활성화 그리고 유ㆍ무선 인터넷의 보급에 따른 악의적인 사이버 공격의 시도가 점점 증가하고 있다. 이로 인해 점차 더 많은 문제가 야기될 것으로 예상된다. 현재 일반적인 인터넷상의 시스템은 악의적인 공격에 적절하게 대응해오지 못하고 있으며, 다른 범용의 시스템들도 기존의 백신 프로그램에 의존하며 그 공격에 대응해오고 있다. 따라서 새로운 침입에 대하여는 대처하기 힘든 단점을 가지고 있다. 본 논문에서는 생체 자율분산시스템의 일부분인 T세포의 positive selection과 negative selection을 이용한 자기/비자기 인식 알고리즘을 제안한다 제안한 알고리즘은 네트워크 환경에서 침입탐지 시스템에 적용하여 기존에 알려진 침입뿐만 아니라 새로운 침입에 대해서도 대처할 수 있다.
Autonomic and EEG responses were analyzed in 32 college students exposed to visual stimulation with Korean Affective Picture System (KAPS) and 36 students exposed to the International Affective Picture System (IAPS). Cardiac, electrodermal, and electrocortical measures were recorded during 30 sec of viewing affective pictures. The slides intended to elicit basic emotions (fear, anger, surprise, disgust, and sadness) were presented to subjects via Kodak slide-projector. The aim of the study was to differentiate autonomic and EEG responses associated with the same negative valence emotions elicited by KAPS and IAPS stimulation and to identify the influence of cultural relevance on physiological reactivity. The analysis of obtained results revealed significant differences in physiological responsiveness to emotionally negative valence slides from KAPS and IAPS. The typical response profile for all emotions elicited by the KAPS included HR acceleration (except surprise), and increase of electrodermal activity, slow and fast alpha blocking and fast beta power increase in EEG, which was not associated with significant asymmetry (except fast alpha in sadness). Stimulation with the IAPS evoked HR deceleration, specific electrodermal responses with relatively high tonic electrodermal activation, alpha-blocking and fast beta increase, and was accompanied also by theta power increase and marked frontal asymmetry (e.g., fast beta, theta asymmetries in sadness, fast alpha in fear). Physiological responses to fear and anger-eliciting slides from the IAPS were significantly less profound and were accompanied by autonomic and EEG changes more typical for attention rather than negative affect. Higher cardiovascular and electrodermal reactivity to fear emotion observed in the KAPS, e.g., as compared to data with the IAPS as stimuli, can be explained by cultural relevance and higher effectiveness of the KAPS in producing certain emotions such as fear in Koreans.
CHOI, YUN-JUNG;CHUL-JAI KIM;SO-YOUNG PARK;YOUNG-TAE KO;HOO-KIL JEONG;GEUN-EOG JI
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제6권4호
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pp.255-259
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1996
$\beta$-Glucosidase was known to be involved in the mutagenic activation of $\beta$-glucosides. The level of $\beta$-glucosidase in the feces of adults was 2.7 times higher than that of infants. There was no difference in the percentage of $\beta$-glucosidase positive strains among Bifidobacterium isolates between adults and infants, corresponding to 90 and 92$%$, respectively. However, the strains from adults showed 1.9 times higher enzyme activity than those from infants when grown in Brain Heart Infusion medium. $\beta$-Glucosidase negative strains could not ferment $\beta$-glucosidase substrates, such as cellobiose, salicin, naringin, esculin and arbutin. Presence of $\beta$-glucosidase in Bifidobacterium did not alter the degree of growth in reconstituted skim milk. The $\beta$-glucosidase level was much lower in milk and vegetable medium, although cells grew above $10^8$cfu/ml, than in BHI medium. This study suggests that metabolic activation of the $\beta$-glucosides by Bifidobacterium $\beta$-glucosidase varies significantly depending on types of growth medium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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