국내 도축장 및 도축장 출하 닭을 대상으로 NDV 오염 실태를 조사하였다. 조사결과, 닭출하농장, 닭수송용차량, 도축장 현수실, 도축장 냉각수에서 각각 조사 대상건수의 13.0%, 13.3%, 16.0%, 10.8%에서 NDV가 분리되었다. 시기별로 보면 차량, 현수실, 냉각수 모두에서 7월에 가장 많이 바이러스가 분리되었다. Pathotyping RT-PCR을 실시한 결과, 이들 분리된 NDV 분리주는 모두 저병원성 NDV 양성 반응을 나타내었으며, F 단백질 분절 부위에 모두 $^{112}GKQGR/L^{117}$ motif를 가지고 있었다. 본 연구에서 분리된 NDV 분리주의 F 단백질 유전자를 분석하여 보았을 때, 조사한 NDV 분리주 25주 중 24주가 NDV V4주와 같은 유전적 cluster를 형성하였으며, 나머지 1주는 NDV Ulster 2C주와 같은 유전적 cluster를 형성하였다. 이와 같은 연구 결과로 보아 국내에서는 출하 닭, 수송 차량, 현수실, 냉각수 등 생산에서 도축 단계까지 일련의 과정에서 높은 빈도로 저병원성 NDV 오염이 이루어지고 있음을 알 수 있었다.
The objective of this experiment was to investigate the effect of Newcastle disease virus (NDV) and infectious bursal disease virus (IBDV) vaccination on performance of broiler chicks for five weeks. Two types of poultry houses and three patterns of vaccination ($NDV^-/IBDV^-$, $NDV^+/IBDV^-$ and $NDV^+/IBDV^+$) were factorially assigned to six treatments. NDV, B1 strain and IBDV, Bursin-2 vaccine were orally administered at 5, 14 and 7, 18 days, respectively. Forty eight hundred chicks were grouped into four replications with two hundnyd hybro $\times$ hybro chicks per each treatment. Weight gain, feed conversion ratio (FCR), mortality and product index were surveyed at the end of experiment. Bursa index and IBDV antibody titer of chicks were weekly measured. Weight gain of chicks vaccinated with $NDV^+/IBDV^+$ was significantly increased compared to that of other treatments at both window and windowless poultry houses (p<0.05). Chicks vaccinated with $NDV^+/IBDV^+$ also showed significantly improving the FCR and mortality compared to those of other treatments at both poultry houses (p<0.05). The bursa indecies of both poultry houses were high from one-day- to three-weeks-old, but were low for the rest of two weeks. IBDV antibody of all chicks was detected 100% by agar gel precipitation (AGP) test at one day old, but was not detected in $NDV^-/IBDV^-$ and $NDV^+/IBDV^-$ treatments at four weeks old. However, it showed 100% in $NDV^+/IBDV^+$ treatment. Antibody titer using ELISA showed similar trend to that of AGP test. The results of this experiment confirmed that IBDV and NDV combined vaccine significantly improved the performance of broiler chicks.
Park, I.K.;Jiang, H.L.;Yun, C.H.;Choi, Y.J.;Kim, S.J.;Akaike, T.;Kim, S.I.;Cho, C.S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권4호
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pp.543-547
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2004
Newcastle disease vaccine (NDV)-loaded chitosan microspheres (NDV-CM) were prepared. Stimulatory effects of these NDV-CM on antibody response compared to free NDV were examined in vitro and in vivo. In vitro stimulation of macrophages with virus vaccine resulted in higher number of cells compared to saline-treated control. Both NDV and NDV-CM induced secretion of interleukin-1 (IL-1) in dose dependent manner and the secretion of IL-1 by NDV-CM was delayed compared to free NDV. Irrespective of vaccine formulation, NDV subunit antigen was not effective in preventing mortality of the birds after challenge. However, CM loaded with NDV made of whole viron had antibody responses and protection similar to those shown by ND-K, a commercial inactivated oilemulsion vaccine.
Kim, Hyun-Il;Park, Kyoung-Phil;Park, Chan-Hee;Cho, Hyun-Ah;Yang, Ho-Suk;Hahn, Tae-Wook
대한수의학회지
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제49권1호
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pp.39-44
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2009
Transmission of avian viruses both bird-to-bird and from birds to non-avian species is a major health concern. Newcastle disease virus (NDV) is an economically important avian virus that poses substantial risks to the poultry industry. Rapid and sensitive diagnostic methods, such as the enzymelinked immunosorbent assay (ELISA), are required to track such infections. To develop an ELISA for detecting anti-NDV antibody in avian sera, the nucleocapsid protein (NCP) gene of the NDV La Sota strain was cloned and expressed in Escherichia coli and the 513-amino acid recombinant NCP was purified by Ni-NTA affinity chromatography. To evaluate its ability to replace NDV whole virus antigen as a coating antigen, NCP-coated and whole NDV-coated ELISAs were tested and compared using a panel of NDV positive antisera from chickens. Results using purified NCP were highly correlated with those obtained using whole NDV (r= 0.927), demonstrating that recombinant NCP expressed in Escherichia coli is a suitable substitute antigen for whole NDV in a diagnostic ELISA.
This Study was conducted to determine vaccination programs for the control of Newcastle Disease(ND) in chickens and investigate protective effect against Newcastle disease virus (NDV) after live ND vaccination. Maternal HI antibody titer level of chickens according to day(age) 1, 7, 14, 21, 28 and 35 were decreased gradually as 7.10$\pm$0.74, 6.57$\pm$0.74, 3.71$\pm$1.25, 2.20$\pm$1.03, 1.20$\pm$1.23 and 0.50$\pm$0.71. As a result of HI test and ELISA, both chickens vaccinated with VG/GA strain live vaccine at 1-day-old and chickens not vaccinated do not have antibody titer for protection against NDV at 14-day-old. Except for LaSota strain vaccine, in case of vaccination with VG/GA spray and VG/GA, B1 and LaSota strain drinking water at 14-day-old, the protective effect was 100% in chickens inoculated NDV($10^{7.2}$$EID_{50}$/50${\mu}\ell$, eye drop) at 21-day-old, but not 10~50% at 28-day-old. These data suggest that live NDV vaccination should be given at 10-day-old 20-25day-old for protect against NDV at periodic outbreaks of ND caused by velogenic viscerotropic NDV in the environment of a farm.
본 연구에서 NDV의 L유전자와 F유전자를 표적 부위로 각각 제작한 primer 세트를 사용함으로써 하나의 PCR 튜브에서 NDV 검출(386 bp의 증폭 크기)과 함께 병원성 NDV(229 bp의 증폭 크기)를 동시에 감별 증폭할 수 있는 dRT-PCR 검사법을 개발하였다. 개발된 dRT-PCR검사법은 NDV를 특이적으로 검출하고, 병원성을 감별하였다. 특히 국내 병성감정 실시기관에서 적용 중인 기존의 RT-PCR 상용키트에서는 검출하지 못하는 class I NDV과 PPMV(class II 유전형 VI형)을 NDV를 검출함과 동시에 병원성 NDV도 감별가능하였다. 개발된 dRT-PCR 검사법의 검출 민감도는 약 $10^{3.0}EID_{50}/0.1mL$로 평가되었다. 또한 ND발생국의 야외 시료에 적용했을 때, NDV 공통항원 검출율은 94.4%였으며, 병원성 NDV 검출율은 100%이었다. 그러므로 본 연구에서 개발한 dRT-PCR 검사법은 의심축 사례에서 ND를 신속 정확하게 진단하는 데 유용할 진단 방법을 제공할 수 있을 것으로 판단된다.
뉴캣슬병 바이러스가 발견된지 50여년이 지난 오늘에도 그 발생은 전 세계적으로 광범위하다. NDV가 분리됨으로 백신개발이 이루어져 1930년대말부터 완전하지는 못했으나 그런대로 방역을 맡았으며 그후 개량발전된 백신으로 각국에서 예방접종하고 있으나 여전히 발생하고 있다. NDV는 Paramyxovirus로서 RNA를 가지고 있으며 크기는 $100\~600{\mu}m$ 범위의 크기와 lipoprotein envelope로 쌓여 있다. 분리동정에 이용되는 혈구응집소, neuraminidase의 작용, 용혈성 등 모두 envelope와 관련이 있으며 이와 관련된 연구가 많이 진행되고 있다. NDV가 세포에 침투하는 과정에서 특이한 receptor에 부착하여 envelope의 용해 및 nucleocapsid의 세포속에 침투 등이 밝혀지고 있으며 NDV의 Virion은 RNA의존 RNA 복합체를 가지고 있고 보족 RNA는 바이러스 단백질 및 RNA를 산생하기 위해서 숙주에 의하여 전환을 한다. 1 일령추의 뇌내접종, 정맥내 접종 및 계태 아치사시간 등의 방법으로 Velogenic, Mesogenic Lentogenic type으로 분류하고 감염력에 따라 Virulent 또는 avirulent로 구분된다. 국내에서 분리된 NDV는 현재 Velogenic형으로 분류되고 있으나 앞으로 지역별, 계절별, 감염된 숙주별로 광범위하게 분리하여 국내에서 유행하고 있는 NDV의 성상조사와 특성을 파악 할 필요성이 요청된다.
A method for the rapid detection and quantification of Newcastle disease virus (NDV) produced in an animal cell culture-based production system was developed to enhance the speed of the NDV vaccine manufacturing process. A SYBR Green I-based real-time RT-PCR was designed with a conventional, inexpensive RT-PCR kit targeting the F gene of the NDV LaSota strain. The method developed in this study was validated for specificity, accuracy, precision, linearity, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), and robustness. The validation results satisfied the predetermined acceptance criteria. The validated method was used to quantify virus samples produced in an animal cell culture-based production system. The method was able to quantify the NDV samples from mid- or late-production phases, but not effective on samples from the early-production phase. For comparison with other quantifiable methods, immunoblotting, plaque assay, and tissue culture infectious dose 50 ($TCID_{50}$) assay were also performed with the NDV samples. The results demonstrated that the real-time RT-PCR method is suitable for the rapid quantification of virus particles produced in an animal cell-culture-based production system irrespective of viral infectivity.
This study was conducted to investigate the immune response of layers fed diets supplemented with excess micronutrients, i.e., vitamin A, methionine, Zn, Cu, and Fe to the inoculation of Newcastle disease vaccine(NDV) or infectious bronchitis vaccine(IBV). The antibody titer against the NDV increased immediately after the inoculation and stayed high during the next 6 wk. On the other hand, The antibody titer against the IBV increased after 4 wk of inoculation The IgM level increased rapidly after 1 wk of NDV inoculation, however, it decreased after 5 wk of inoculation. The IgA displayed similar pattern to that of IgM in response to NDV inoculation. The pattern of IgM change after IBV inoculation was similar to that when layers were treated with NDV. However, IgA level changed earlier than did IgM. The IgG response to the NDV and IBV was very weak compared to the other immune responses. The excess supplementation of micronutrients to the diets of layers inoculated with NDV elicited favorable antibody titer and immune response compared to the layers fed the control diet. The excess Zn, however, allowed the layers to have higher antibody titer for the 4-wk period after NDV injection: after that they showed no effect of extra-Zn. The immune responses of layers fed excess vitamin A, Cu, methionine, and Fe were markedly higher in IgA and IgG than the control layers. The excess Zn, however, did not bring about any favorable result. No difference was detected in IgG level between control and micronutrients-treated groups.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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