• Tuberculosis and Respiratory Diseases
• /
• 제56권5호
• /
• pp.514-522
• /
• 2004

연구 배경 : 비스테로이드성 항염증제는 대장암의 화학 예방에 이용되고 있다. 지속적으로 비스테로이드성 항염증제를 복용한 결과 대장암 발생의 위험이 40-50% 감소하였다. Sulindac은 비스테로이드성 항염증제의 일종으로 대장암의 예방 효과가 있으며 암세포의 성장 억제와 세포 고사를 유도시킨다. 이에 저자들은 3가지 비소세포 폐암 세포주에서 sulindac의 영향을 알아보고자 하였다. 방 법 : A549(선암), NCI-H157(편평상피암), NCI-H460(대세포암) 세포주에 sulindac을 농도별로 투여하여, MTT assay로서 암세포의 생존율을, 유식세포 분석법과 핵산 염색으로 세포 고사의 비율을, 유산탈수소효소유리로서 세포 사멸의 정도를 시간대별로 측정하였다. 결 과 : Sulindac에 의해 농도와 시간에 의존적으로 비소세포 폐암 세포주에서 암세포의 생존율이 감소하였고, 유산 탈수소 효소 유리는 증가하였으며, 세포 고사 역시 농도, 시간에 의존적으로 증가하였다. 결 론 : Sulindac은 비소세포 폐암 세포주에서 농도, 시간에 의존적으로 암세포의 생존율 감소와 세포 고사증가를 유도하였다.

• 한국식품영양학회지
• /
• 제32권5호
• /
• pp.511-521
• /
• 2019

The purpose of this study was to investigate the inhibitory effect of enzyme activity and anti-proliferation of human cancer cell lines (HCT 116, NCI-H460 and MCF-7) of peanut skin depending on cultivars (Arachis hypogaea L. cv. K-Ol, cv. Sinpalkwang, cv. Daan, cv. Heuksaeng) and extraction solvent. Peanut skin was extracted with 80% ethanol, 80% methanol, 80% acetone, and distilled water, followed by analysis of the enzyme inhibitory activity and anticancer activity. Methanol extract of Daan cultivar most effectively inhibited ${\alpha}$-gluosidase (65.08%, 0.025 mg/mL), tyrosinase (82.49%, 2 mg/mL) and ACE (73.61%, 10 mg/mL). The inhibitory effect of peanut skin extracts on colon cancer cell (HCT-116), lung cancer cell (NCI-H460) and breast cancer cell (MCF-7) growth were investigate using MTT assay. The highest anti-proliferation of cancer cell line of peanut skin extracts was observed in the methanol extract of Daan cultivar. The cell viability on HCT 116, NCI-H460 and MCF-7 cell lines of methanol extracts from peanut skin of Daan cultivar was 48.13%, 41.03%, and 36.02% at $200{\mu}g/mL$, respectively. These results suggest that peanut skin extracts may mediate physiological activity, and provide valuable information for the use of peanut byproduct as a functional food material.

• Journal of Applied Biological Chemistry
• /
• 제57권2호
• /
• pp.113-122
• /
• 2014

A5E is complex of several medicinal herb ethanol extracts. The aim of this study is investigating the anticancer effect for non-small cell lung cancer. The antitumor effects of A5E on NCI-H460 were examined by regulation of cell proliferation, apoptosis, cell cycle arrest, mitochondrial membrane potential (${\Delta}{\Psi}_m$), and apoptosis-related protein. Cell proliferation was measured by MTS assay. Apoptosis induced by A5E was confirmed by Annexin V-fluorescein isothiocyanate (FITC)/Propidium Iodide (PI) staining, and cell cycle arrest was measured by PI staining. NF-${\kappa}B$ translocation was detected by immunofluorescence and MMP (${\Delta}{\Psi}_m$) was measured by JC-1 staining. The expression of extrinsic pathway molecules such as FasL and FADD were elevated, and procaspase-8 was processed by A5E. In addition, intrinsic pathway related molecules were altered. The Bcl-2 and Bcl-xl levels decreased, Bax increased, and cytochrome C was released. In addition, the mitochondrial membrane potential collapsed, and caspase-3 and poly-(ADP-ribose) polymerase were processed by A5E. Moreover, A5E affected the cellular survival pathway involving phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/Akt and NF-${\kappa}B$. PI3K and Akt were downregulated, also NF-${\kappa}B$ expression was decreased, and nuclear translocalization was inhibited by A5E. These results suggested that A5E delays proliferation, inhibit cell cycle progression and induce apoptosis in human lung cancer cell. We conclude that A5E is a potential anticancer agent for human lung carcinoma.

• 동의생리병리학회지
• /
• 제22권3호
• /
• pp.630-641
• /
• 2008

Gamisamgibopae-tang (GMSGBPT) is a traditional Korean medicine, which has been used for patients suffering from a lung disease in Oriental medicine. In the present study, we examined the biochemical mechanisms of apoptosis by GMSGBPT in NCI-H460 and A549 human non-small-cell lung cancer cell lines. It was found that GMSGBPT could inhibit the cell proliferation of A549 cells in a concentration-dependent manner, however GMSGBPT did not affect the cell proliferation of NCI-H460 cells. Apoptotic cell death in A549 cells were detected using DAPI staining and annexin V fluorescein methods. The induction of apoptotic cell death by GMSGBPT was connected with a down-regulation of anti-apoptotic Bcl-2 and Bcl-xL expression, and proteolytic activation of caspase-3 and caspase-9 in A549 cells. However, GMSGBPT did not affect the levels of pro-apoptotic Bax and Bad expression, and activity of caspase-8. GMSGBPT treatment also concomitant degradation and/or inhibition of poly (ADP-ribose) polymerase (PARP), ${\beta}$-catenin, phospholipase C-1 (PLC${\gamma}$1) and DNA fragmentation factor 45/inhibitor of caspase-activated DNase (DFF45/ICAD). Taken together, these findings suggest that GMSGBPT may be a potential chemotherapeutic agent for the control of human non-small-cell lung cancer cells and further studies will be needed to identify the active compounds that confer the anti-cancer activity of GMSGBPT.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
• /
• 제71권4호
• /
• pp.259-265
• /
• 2011

Background: Epidermal growth factor receptor (EGFR) tyrosine kinase inhibitors, gefitinib and erlotinib, are effective therapies for non-small cell lung cancer (NSCLC) patients whose tumors harbor somatic mutations in EGFR. The mutations are, however, only found in about 30% of Asian NSCLC patients and all patients ultimately develop resistance to these agents. Ionizing radiation has been shown to induce autophosphorylation of EGFR and activate its downstream signaling pathways. In the present study, we have tested whether the effect of gefitinib treatment can be enhanced after ionizing radiation. Methods: We compared the PC-9 and A549 cell line with its radiation-resistant derivatives after gefitinib treatment with cell proliferation and apoptosis assay. We also analyzed the effect of gefitinib after ionizing radiation in PC-9, A549, and NCI-H460 cells. Cell proliferation was determined by MTT assay and induction of apoptosis was evaluated by flow cytometry. Caspase 3 activation and PARP cleavage were evaluated by western blot analysis. Results: PC-9 cells having mutated EGFR and their radiation-resistant cells showed no significant difference in cell viability. However, radiation-resistant A549 cells were more sensitive to gefitinib than were their parental cells. This was attributable to an increased induction of apoptosis. Gefitinib-induced apoptosis increased significantly after radiation in cells with wild type EGFR including A549 and NCI-H460, but not in PC-9 cells with mutated EGFR. Caspase 3 activation and PARP cleavage accompanied these findings. Conclusion: The data suggest that gefitinib-induced apoptosis could increase after radiation in cells with wild type EGFR, but not in cells with mutated EGFR.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
• /
• 제72권4호
• /
• pp.343-351
• /
• 2012

Background: The phosphoinositide 3-kinase (PI3K)/Akt/mammalian target of rapamycin (mTOR) signaling axis has emerged as a novel target for cancer therapy. Agents that inhibit this pathway are currently under development for lung cancer treatment. In the present study, we have tested whether dual inhibition of PI3K/Akt/mTOR signaling can lead to enahnced antitumor effects. We have also examined the role of autophagy during this process. Methods: We analyzed the combination effect of the mTOR inhibitor, temsirolimus, and the Akt inhibitor, GSK690693, on the survival of NCI-H460 and A549 non-small cell lung cancer cells. Cell proliferation was determined by MTT assay and apoptosis induction was evaluated by flow cytometry and terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling assay. Autophagy induction was also evaluated by acridine orange staining. Changes of apoptosis or autophagy-related proteins were evaluated by western blot analysis. Results: Combination treatment with temsirolimus and GSK690693 caused synergistically increased cell death in NCI-H460 and A549 cells. This was attributable to increased induction of apoptosis. Caspase 3 activation and poly(ADP-ribose) polymerase cleavage accompanied these findings. Autophagy also increased and inhibition of autophagy resulted in increased cell death, suggesting its cytoprotective role during this process. Conclusion: Taken together, our results suggest that the combination of temsirolimus and GSK690693 could be a novel strategy for lung cancer therapy. Inhibition of autophagy could also be a promising method of enhancing the combination effect of these drugs.

• Molecules and Cells
• /
• 제27권1호
• /
• pp.125-125
• /
• 2009

• 생명과학회지
• /
• 제18권8호
• /
• pp.1140-1146
• /
• 2008

본 연구에서는 항균작용, 항암작용, 항산화작용이 있는 것으로 알려져 있는 마늘을 이용하여 소비자의 요구에 부합하는 기능성 전통 고추장 개발을 목표로 마늘죽을 첨가한 고추장을 제조한 후 이에 대한 성분 분석, 항산화능력 및 항암 능력을 살펴본 결과는 다음과 같다. 고추장의 품질 기준으로 평가되는 아미노태 질소함량분석 결과, 마늘죽 첨가 고추장이 시판 고추장에 비해 높은 것으로 나타났으며 숙련된 패널을 대상으로 관능 평가한 결과 생마늘 첨가 고추장이 색을 제외한 항목에 있어 마늘 특유의 향에 대한 거리감으로 인해 낮게 평가된 반면 마늘죽 형태로 첨가한 고추장의 경우 평가항목 모두에서 높은 점수를 얻었다. 질량 분석기를 이용하여 마늘죽 첨가 고추장을 정성 분석한 결과 diallyl disulfide (C6H10S2)와 diallyl trisulfide (C6H10S3)와 같은 유효 기능성 성분인 설파이드계 화합물이 존재하는 곳으로 확인되었다. 항산화 능력은 마늘죽 첨가고추장이 라디칼 소거능 및 환원력에 있어서 모두 시판 고추장에 비해 높은 것으로 조사되었으며 특히 MTT assay법으로 위암(MKN45), 대장암(HCT116), 폐암세포(NCI-H460)를 대상으로 항암효과를 조사한 결과 마늘죽 첨가 고추장의 경우 모든 암세포에 대해 항암효과가 있는 것으로 나타났으며 특히 위암(MKN45)세포에 대한 항암효과가 가장 높은 것으로 나타났다. 결론적으로, 마늘죽 첨가 고추장(마늘 함량 23%, w/w)이 시판 고추장 및 생마늘 첨가 고추장(마늘 함량 10%, w/w)보다 항산화 및 항암효과가 높은 이유는 마늘 함유량이 높기 때문으로 생각된다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
• /
• 제60권3호
• /
• pp.304-313
• /
• 2006

연구배경 : Heme oxygenase-1 (HO-1)은 heme의 분해 대사과정에 관여하는 유도성 효소로 heme을 분해하여 biliverdin, free iron, 및 일산화탄소 등을 생성시킨다. HO-1의 발현은 다양한 스트레스성 자극에 반응하여 생체방어 기능을 갖는 것으로 알려져 있는데 세포성장이나 세포사 특히 세포고사를 조절하는 것으로 보고되고 있다. 현재 신장암, 전립선암, 간암, 육종 등의 고형암에서 발현됨이 알려져 있고, 실제 HO-1 억제제를 투여했을 때 암성장이 억제됨이 보고되었다. 저자들은 폐암세포주들에서 HO-1의 발현유무와 그 역할을 규명하고 나아가 HO-1 억제제의 치료제로서의 가능성을 알아보고자 하였다. 방 법 : 비소세포폐암세포주인 A549, H23, NCI-H157, NCI-H460을 이용하였다. 세포독성은 MTT 방법으로 구하였고, HO-1의 발현은 Western blotting으로 확인하였다. HO의 효소활성은 시간당 세포단백질의 mg당 형성된 빌리루빈의 양을 이용하여 측정하였다. 또한 $H_2O_2$의 생성은 horse radish peroxidase(HRP)와 형광물질인 2',7'-dichlorofluorescein(DCF)를 이용한 두 가지 방법을 이용하였다. A549세포에 HO-1 small interfering RNA(siRNA)을 주입하여 유식세포 분석과 caspase-3에 대한 Western blotting을 통하여 세포고사유무를 확인하였다. 결 과 : 비처리 상태에서 다른 세포주에 비해 A549세포의 HO-1 발현이 증가되었으며 HO-1 활성억제제인 ZnPP를 처리하였을 때 생존율의 의미 있는 감소를 보였다. 이러한 소견과 일치하여 ZnPP는 용량의존적으로 HO 의 효소활성 감소와 세포 내 $H_2O_2$ 생성의 증가를 초래하였다. 또한 HO-1 siRNA로 주입된 A549세포는 세포고사를 유도하였다. 결 론 : HO-1은 폐암의 치료에 있어서 새로운 분자생물학적 기전의 가능성을 제시하여 HO-1에 대한 표적치료의 가능성을 보여줄 것으로 기대된다.

• 생명과학회지
• /
• 제23권2호
• /
• pp.167-174
• /
• 2013

Peroxiredoxin 6 (Prx 6)는 티올-특이적 항산화 단백질에 속하는 효소로서 산화적 스트레스로부터 세포를 보호할 뿐만 아니라 과산화물의 환원작용을 촉매한다. 본 연구에서는 인간 Prx 6의 promoter를 이용하여 항산화반응을 유발하는 추출물을 효과적으로 스크리닝하는 새로운 형질전환마우스를 개발하는 최종목적을 달성하기 위한 중간단계로서, hPrx 6/Luc 벡터를 개발하고, 이들 벡터의 안정적 발현과 성공적 반응성을 세포주를 이용하여 확인하고자 하였다. 이를 위해, 인간 Prx 6 promoter를 증폭하여 luciferase cDNA와 결합한 hPrx 6/Luc 벡터를 제조하였으며, 제조된 벡터를 제한효소 절단과 염기서열분석을 통해 확인하였다. hPrx 6/Luc 벡터는 NCI-H460 세포에 transfection한 후 인삼(KWG), 홍삼(KRG), 맥문동(LP), 홍문동(RLP)의 4가지 추출물을 처리하여 luciferase activity를 측정하였다. 그 결과, luciferase activity는 4가지 추출물에 의해 효과적으로 증가하였고, 특히 KRG과 LP를 처리한 그룹이 KWG과 RLP를 처리한 그룹보다 높았다. 또한, luciferase activity는 RLP 농도에 의존적으로 증가하였다. hPrx 6/Luc 벡터와 hPrx 6 mRNA반응의 차이를 비교하기 위해, 4가지 추출물을 처리한 후 hPrx 6 mRNA의 양을 RT-PCR로 분석하였다. 그러나, hPrx 6 mRNA의 양은 비록 고농도의 RLP 추출물에서는 약간의 증가가 관찰되었지만, 대조군에 비하여 4가지 추출물에서 유의적인 차이가 없었다. 한편, 4가지 추출물에 의한 superoxide dismutase (SOD) 활성의 변화는 비록 일부 차이는 있었지만 hPrx 6/Luc 벡터와 유사한 반응을 나타내었다. 따라서, 이러한 결과는 hPrx 6/Luc 벡터는 성공적으로 제조되었고, 세포내에서 안정적으로 발현하면서 항상화물질에 민감하고 정량적으로 반응할 수 있음을 제시하고 있다. 더불어, 이러한 세포주에서 확인결과를 바탕으로 형질전환마우스가 개발된다면, 항산화물질을 정량적으로 스크리닝하는 시스템으로 적용가능성이 매우 높음을 보여주고 있다.