• 제목/요약/키워드: NAD(P)H

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유기주석화합물이 해산 어류의 간장 MFO 효소계에 미치는 영향 (Effects of Tributyltin in vitro on Hepatic Monooxygenase System in Marine Fishes)

  • 전중균;이미희;이지선;심원준;이수형;허형택
    • 환경생물
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    • 제21권1호
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    • pp.18-25
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    • 2003
  • 본 연구는 내분비교란물질로 알려진 TBTC가 해양생물에게 미치는 영향을 조사하는 연구의 일환으로, 이 화합물에 노출시킨 어류의 간장 MFO 효소계의 반응을 in vitro로 조사하였다. 대상 어류는 개복치(Mola mola), 숭어(Mugil cephalus), 강도다리(Ptatichthys stellatus), 청어(Clupeu pallasii), 붕장어(Astroconger myriaster), 조피볼락 (Sebastes schlegeli), 참돔(Pugrus major), 넙치(Paralichthys olivaceus)이며, 이들의 간장 미크로좀을 2mM의 TBTC와 in vitro (3$0^{\circ}C$, 20분)로 배양하고 cytoch-rome P45O (CYP), cytochrome b5, NAD(P)H -cytochro-me c 환원효소를 비롯한 탈알킬화 효소들(EROD, PROD, MROD, ECOD)의 변화를 조사하였다. TBTC는 환원효소의 측정 시에는 DMSO에, 그리고 그 밖의 효소 측정시에는 메탄올에 녹여 2% 농도로. 첨가하였다. 어류의 간장 CYP 함량은 TBTC와 배양 후 대부분(6 어류/8어류)에서 10% 이하로 크게 저해되었으나, cyto-chrome b5함량은 변함이 없었다. 하지만 NAD(P)H 의존성 환원효소의 반응은 어류에 따라 달랐고, CYP 외에 두 환원효소도 모두 영향을 받아 저해되는 타입 1(개복치, 조피볼락, 청어, 강도다리, 참돔), CYP 외에 NADH 의존성 환원효소만 저해되는 타입 2(붕장어, 숭어)및 CYP 저해되지만 두 환원효소는 영향을 받지 않거나 오히려 유도되는 타입 3 (넙치)으로 구분되었다. 그리고 대부분(7/8)의 어류에서는 NADH 의존성 환원효소가 NADPH 의존성 환원효소에 비해 더욱 저해되는 경향을 보였다. TBTC는 어류의 탈알킬화 효소에도 영향을 미쳤고, 어류별 EROD활성의 저해는 개복치, 참돔, 붕장어, 조피볼락(잔존율 1~7%)>숭어, 청어 (14~30%)>넙치, 강도다리(56~65%)의 순이었으며, ECOD 활성의 저해도 개복치, 참돔, 붕장어 (36~38%)>조피볼락(63%))숭어, 청어, 넙치, 강도다리(90%)의 순으로 비슷한 경향이었다. 한편, 넙치와 강도다리에서는 PROD가 MROD보다 더욱 심하게 저해되었다. 이처럼 어류 간장의 약물대사 효소계는 TBTC에 의한 저해 정도가 어류에 따라 심한 차이를 보였다.

OSA 공정의 세포 내 ATP, NAD(H), NADP(H) 농도 (Intracellular Concentrations of NAD(P), NAD(P)H, and ATP in a Simulated Oxic-settling-anaerobic (OSA) Process)

  • 벤추라 제이알;남지현;양빈친;나리;길혜진;남덕현;강기훈;장덕진
    • 한국물환경학회지
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    • 제31권6호
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    • pp.599-609
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    • 2015
  • OSA (oxic-settling-anaerobic)공정은 종래 활성슬러지법(conventional activated sludge)의 잉여슬러지 감량을 목적으로 슬러지 반송라인에 혐기조가 추가된 공정이다. 본 연구에서는 호기조(1)-혐기조-호기조(2)가 순차적으로 구성된 OSA 모의공정의 슬러지 감량원리를 조사하기 위해 각 반응조의 세포 내 에너지 전달물질(ATP, NAD(H), NADP(H)) 변화를 관찰하였다. 시간이 경과함에 따라 호기조 및 혐기조 모두 에너지전달물질이 급격히 감소하였다. 혐기조의 경우 호기조(1)과 (2)보다 낮은 에너지를 함유하는 것으로 나타났으며, 혐기조를 거친 호기조(2)의 경우 호기조(1) 보다 에너지 전달물질이 낮은 수준으로 관찰되었다. 또한, OSA 공정에서 내생호흡을 유도하여 슬러지를 감량하는 혐기조의 화학적 산소요구량 (SCOD), 체류시간 및 온도변화에 따른 호기조(1)과 (2)의 에너지량 차이를 확인한 결과 낮은 농도의 SCOD, 긴 체류시간 및 높은 온도는 호기조(2)의 세포 내 에너지량을 감소시켰다. 혐기조 및 호기조(2)의 세포 내 에너지 수준은 각각 호기조(1)의 57.73% 및 39.12% 수준으로, 두 단계의 호기조 사이에 추가된 혐기조는 OSA 공정의 세포 내 에너지 수준을 낮출 뿐 아니라, CAS 공정보다 적은 양의 슬러지가 생산하였다. 본 연구결과를 토대로, 호기조 사이에 추가된 혐기조의 운전조건에 따라 각 반응조의 세포 내 에너지 수준의 조절뿐만 아니라 잉여슬러지의 생성을 제어할 수 있을 것이라 생각된다.

Klebsiella pneumoniae 균주의 세포외막에서 분리한 2-furaldehyde dehydrogenase의 특성에 관한 연구 (Characterization of the Outer Membrane-Associated 2-Furaldehyde Dehydrogenase from Klebsiella pneumoniae)

  • 이준우;강사욱;하영칠;한홍의
    • 미생물학회지
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    • 제26권3호
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    • pp.197-206
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    • 1988
  • Klebsiella pneumoniae의 세포외막으로부터 2-furaldehyde를 2-furoic acid로 산화시키는 2-furaldehyde dehydrogenase를 분리하여 그 특성을 조사하였다. 이 효소는 $\beta$-$NAD^{+}$를 특이적으로 요구하였다. 분리과정중의 효소활성도는 2-furaldehyde를 기질로 사용하고 $\beta$-$NAD^{+}$를 조효소로 사용하면서 high performance liquid chromatography에 의해 측정 되었다. 세포외막은 Percoll의 밀도흉배에 의한 초원심분리방법과 $Mg^{2+}$, Triton X-100으로 용해시킨 후, 초원심분리시키는 방법으로 수집되었다. 세포외막단백질은 EDTA와 lysozyme을 처리함으로서 얻어졌고, 효소는 QAE-Sephadex Q-504 S Sephadex G-100-을 사용하면서 column chromatography 방법에 의해 분리되었다. 본 효소는 $85^{\circ}C$, PH9.5, 그리고 1.5% (vol/vol) Triton X-100의 존재하에서 최대활성을 보여주었다. 효소의 분자량은 nondenaturing polyacrylamide gel e electrophoresis의 결과, 88, 000.으로 추정되었고, 2-furaldehyde에 대한 효소의 Km값은 4.72 mM 이였다.

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Arabidopsis SIZ1 positively regulates alternative respiratory bypass pathways

  • Park, Bong-Soo;Kim, Sung-Il;Song, Jong-Tae;Seo, Hak-Soo
    • BMB Reports
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    • 제45권6호
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    • pp.342-347
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    • 2012
  • Plant mitochondria possess alternative respiratory pathways mediated by the type II NAD(P)H dehydrogenases and alternative oxidases. Here, E3 SUMO ligase was shown to regulate alternative respiratory pathways and to participate in the maintenance of carbon and nitrogen balance in Arabidopsis. The transcript abundance of the type II NAD(P)H dehydrogenases NDA2 and NDB2 and alternative oxidases AOX1a and AOX1d genes was low in siz1-2 mutants compared to that in wild-type. The addition of nitrate or ammonium resulted in a decrease or an increase in the expression of the same gene families, respectively, in both wild-type and siz1-2 mutants. The amount of free sugar (glucose, fructose and sucrose) was lower in siz1-2 mutants than that in wild-type. These results indicate that low nitrate reductase activity due to the AtSIZ1 mutation is correlated with an overall decrease in alternative respiration and with a low carbohydrate content to maintain the carbon to nitrogen ratio in siz1-2 mutants.

창이자 및 꿀풀하고초에 의한 NAD(P)H:quinone reductase와 glutathione S-transferase의 유도 (Induction of NAD(P)H:quinone reductase and glutathione S-transferase by Xanthii Fructus and Prunellae Spica Extracts)

  • 손윤희;이기택;박신화;조경희;임종국;남경수
    • 생약학회지
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    • 제32권4호통권127호
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    • pp.269-273
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    • 2001
  • Ethanol extracts from Xanthii Fructus (XFE) and Prunellae Spica (PSE) were investigated for the effects on the induction of cancer chemoprevention-associated enzymes. The following effects were measured: (a) induction of quinone reductase (QR) (b) induction of glutathione S-transferase (GST) (c) reduced glutathione (GSH) level. XFE and PSE were potent inducers of quinone reductase activity in Hepa1c1c7 murine hepatoma cells. Glutathione levels were increased with XFE and PSE. In addition, glutathione S-transferase activity was increased with XFE. However, GST activity was not increased with PSE. These results suggest that XFE and PSE have chemopreventive potentials by inducing quinone reductase and increasing GSH levels.

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Effects of Xylose Reductase Activity on Xylitol Production in Two-Substrate Fermentation of Recombinant Saccharomyces cerevisiae

  • Lee, Woo-Jong;Kim, Myoung-Dong;Yoo, Myung-Sang;Ryu, Yeon-Woo;Seo, Jin-Ho
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제13권5호
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    • pp.725-730
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    • 2003
  • Three recombinant Saccharomyces cerevisiae strains showing different levels of xylose reductase activity were constructed to investigate the effects of xylose reductase activity and glucose feed rate on xylitol production. Conversion of xylose to xylitol is catalyzed by xylose reductase of Pichia stipitis with cofactor NAD(P)H. A two-substrate fermentation strategy has been employed where glucose is used as an energy source for NADPH regeneration and xylose as substrate for xylitol production. All recombinant S. cerevisiae strains Yielded similar specific xylitol productivity, indicating that xylitol production in the recombinant S. cerevisiae was more profoundly affected by the glucose supply and concomitant It generation of cofactor than the xylose reductase activity itself. It was confirmed in a continuous culture that the elevation of the glucose feeding level in the xylose-conversion period enhanced the xylitol productivity in the recombinant S. cerevisiae.

이원효소 연쇄반응의 형광분석에 의한 Urinary Dipeptidase의 활성도 측정 (Two-enzyme coupled fluorometric assay of urinary dipeptidase)

  • 박행순;위정순
    • 분석과학
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    • 제8권3호
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    • pp.359-364
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    • 1995
  • Urinary dipeptidase와 alanine dehydrogenase의 연쇄반응을 이용한 형광분석법을 개발하였다. 반응계는 기질로서 L-ala-ala, ${\beta}-NAD^+$, L-alanine dehydrogenase와 pH 9의 12.5mM sodium carbonate buffer를 포함하며 urinary dipeptidase를 가함으로써 반응을 시작했다. 생성된 NADH는 여기파장 340nm, 형광파장 460nm에서 측정했다. 기존의 glycyldehydrophenylalanine(Gdp)의 가수분해 방법과 형광분석법을 비교한 결과 0.996의 높은 상관계수를 나타냈으며 10배 이상의 감도 증가를 보였다.

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황기(黃耆) 약침액(藥鍼液)의 Glutathione S-transferase 와 NAD(P)H: Quinone Reductase 유도 (Induction of Glutathione S-transferase and NAD(P)H:Quinone Reductase by Astragali Radix Aqua-acupuncture Solution)

  • 류준선;임종국
    • Korean Journal of Acupuncture
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    • 제18권1호
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    • pp.21-26
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    • 2001
  • 발암물질을 무독화시키는 QR 생성 유도를 살펴보기 위하여 황기 약침액 및 열수추출액을 생쥐의 간암세포인 Hepa1c1c7에 처리하여 측정한 결과, 황기 약침액의 농도를 증가시킬수록 많은 QR 생성율을 보였으며, GSH 생성이 증가하였고, GST 생성 또한 증가하였다.

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Iron Toxicity to Peritoneal Macrophage Due to Alteration of Mitochondria by NO

  • Yoon, Ji-Yeon;Kim, Jin-Sun;Lee, Heum-Sook;Lee, Kyo-Young;Cheon, Choong-Ill;Lee, Myeong-Sok;Park, Jong-Hoon;Song, Eun-Sook
    • Animal cells and systems
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    • 제8권2호
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    • pp.97-103
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    • 2004
  • The cytotoxic effect of iron was examined in peritoneal macrophage to determine contributing factors by iron injection to rat. Viability was reduced by 24% by the iron-overload and by 30% by short-term iron addition. Total iron was increased by 45% in the iron-overloaded with remarkable elevation (9 to 14 fold) in the presence of $FeSO_4$. Free calcium was also increased by 19% in control and 44% in iron-overloaded group due to additional $FeSO_4$ NO and MDA were increased by 40% and 136%, respectively, with significant reduction (37%) of NAD(P)H. RCR and cytochrome c oxidase activity were lowered approximately by 10% with reduction of mitochondrial membrane potential. Addition of iron was frequently associated with altered distribution of mitochondria of high membrane potential in the iron-overloaded macrophage. These results suggest altered mitochondria with high NO and low NAD(P)H due to iron.