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A Screening Method for Src Homology 3 Domain Binding Blockers Based on Ras Signaling Pathway

  • Ko, Woo-Suk;Yoon, Sun-Young;Kim, Jae-Won;Lee, Choong-Eun;Han, Mi-Young
    • BMB Reports
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    • 제30권5호
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    • pp.303-307
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    • 1997
  • Grb2, which is composed of a Src homology 2 (SH2) domain and two Src homology 3 (SH3) domains, is known to serve as an adaptor protein in signaling for Ras activation. Thus, a blocker of the Grb2 interactions with other proteins can be a potential candidate for an anticancer drug. In this study, we have developed a high throughput screening method for SH3 domain binding ligands and blockers. Firstly, we made and purified the glutathione S-transferase (GST)-fusion proteins with the Grb2 SH2 and SH3 domains, and the entire Grb2. This method measures the binding of a biotin-labeled oligopeptide, derived from a Grb2/SH3 binding motif in the hSos, to the GST-fusion proteins, which are precoated as glutathione S-transferase fusion protein on a solid phase. When $1\;{\mu}g$ of each fusion protein was used to coat the wells, both N- and C- terminal SH3 the domains as well as the whole of Grb2 were able to interact with the biotin-conjugated ligand peptide, while the SH2 domain and GST alone showed no binding affinity. Although N- and C- terminal SH3 domains showed an increase of binding to the ligand peptide in proportion to the amount of peptide, the GST fusion protein with Grb2 demonstrated much higher binding affinity. GST-Grb2 coating on the solid phase showed a saturation curve; 66 and 84% of the maximal binding was observed at 100 and 300 ng/$100\;{\mu}l$, respectively. This binding assay system was peptide sequence-specific, showing a dose-dependent inhibition with the unlabeled peptide of SH3 binding motif. Several other peptides, such as SH2 domain binding motifs and PTB domain binding motif, were ineffective to inhibit the binding to the biotin-conjugated ligand peptide. These results suggest that our method may be useful to screen for new anticancer drug candidates which can block the signaling pathways mediated by SH3 domain binding.

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Inositol 1,4,5-Trisphosphate-induced Increase in $Ca^{2+}-ATPase$ Activity in the Microsomes of Tracheal Epithelial Cells

  • Cho, Hyoung-Jin;Park, Sung-Shin;Kim, Young-Kee
    • The Korean Journal of Physiology
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    • 제29권2호
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    • pp.269-277
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    • 1995
  • Membrane vesicles were prepared by differential centrifugation from epithelial cells of porcine trachea. Total activity of microsomal ATPases was measured spectrophotometrically by a coupled enzyme assay. The steady-state activity of the enzyme was $329{\pm}10$ nmol/min mg protein. Thapsigargin, a specific antagonist of intracellular $Ca^{2+}-ATPase$, inhibited about 50% of the activity, leaving $178{\pm}18\;nmol/min .mg$ protein (n=6), indicating that the $Ca^{2+}-ATPase$ is one of the major microsomal ATPases. The microsomes used in this study appeared to be tight-sealed vesicles since they showed saturation in $^{45}Ca^{2+}$ uptake experiments. Inositol 1,4,5-trisphosphate $InsP_{3}, 4\;{\mu}M$, an agonist of $InsP_{3}$-sensitive $Ca^{2+}$ release channel ($InsP_{3}$, receptor), and Ca-ionophore A23187 $(10\;{\mu}M)$ induced $^{45}Ca^{2+}$ releases of 20% and 50% of stored $^{45}Ca^{2+}$, respectively. The addition of $(10\;{\mu}M\;InsP_{3}$ also increased the microsomal ATPase activity from $282{\pm}8$ nmol/min mg protein to $334{\pm}21$ nmol/min . mg protein in the intact vesicles. Similar increase in the activity was observed by making microsomes leaky (uncoupling) using the Ca-ionophore A23187. ;$InsP_{3}-induced$ effects were blocked by either thapsigargin or heparin suggesting that: 1) the $InsP_{3}-induced$ increase in ATPase activity is mediated by microsomal $Ca^{2+}-ATPase$, and 2) dissipation of $Ca^{2+}$ gradient across the microsomal membrane is responsible for the $InsP_{3}-induced$ effect. In order to test the dependence of the $Ca^{2+}-ATPase$ activity on the activity of $InsP_{3}-induced$ the activity of ATPases was monitored in various concentrations of free $Ca^{2+}$ using $EGTA-Ca^{2+}$ buffers. The $Ca^{2+}$-dependent biphasic change is the well-known character of $InsP_{3} receptor but not of microsomal $Ca^{2+}-ATPase$ in non-excitable cells; however, the activity of microsomal ATPase appeared biphasic and a maxim진 activity of $397{\pm}36nmol/min\;.mg$ protein was obtained in the solution containing 100 nM free $Ca^{2+}$. Below or above this concentration, the activity of ATPases was lower. These results strongly support a positive correlation of microsomal $Ca^{2+}-ATPase$ to the $InsP_{3}$ receptors in epithelial microsomes.

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무안반도 연안수질의 시ㆍ공간적 변동과 소규모 방조제의 영향 (Temporal and Spatial Fluctuations of Coastal Water Quality and Effect of Small Tide Embankment in the Muan Peninsula of Korea)

  • 이대인;조현서;이규형;이문옥
    • 한국해양환경ㆍ에너지학회지
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    • 제6권4호
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    • pp.24-36
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    • 2003
  • 본 연구는 무안반도 주변 연안수질의 계절별, 조석별 변동과 방조제의 수문개방시 시간에 따른 수질에 미치는 영향을 평가하였다. 주요 수질인자 중 용존산소는 하계의 대부분 정점과 추계 썰물시 저층에서 불포화상태를 나타내었지만, 다른 조사시기에서는 대부분 포화상태를 나타내었는데, 광합성에 의한 영향보다는 기후변동에 크게 영향을 받는 것으로 사료되었으나 생물성장에는 악 영향을 미치지 않는 범위였다. 화학적 산소요구량은 춘계 밀물시와 추계의 밀물과 썰물시에 표층과 저층 모두 평균 2㎎/L이상의 고농도를 나타내고 있어 해역수질환경 기준 II등급을 초과하였는데, 이것은 이 지역이 매우 낮은 Chl. a농도로 보아서 식물플랑크톤에 의한 유기물보다는 이 시기에 증가된 저층교란에 의한 부유물질과 담수유입의 영향이라 판단되었다 용존무기질소는 전 조사기간에 걸쳐 0.11~8.63㎍-at/L의 변동범위로 하계와 추계에서 다소 높고, 조석별 차는 뚜렷하지 않았으며 저층에서 놀게 나타났다. 용존무기인은 ND~2.08㎍-at/L의 변동범위를 보였으며 춘계를 제외하고는 평균 0.30㎍-at/L이상의 다소 높은 값을 보였다. N/P비는 대부분 16이하로 조사해역은 질소가 식물플랑크톤 등의 기초생산자에 대한 성장을 제한하고 있는 것으로 판단되었다. 부영양화 지수는 대부분 1이하였으나, 추계에는 밀물시 방조제 지선 주변해역에서 1이상의 부영양화 현상을 나타내었고 썰물시에는 남부해역에서 부영양화 현상을 나타내었다. 추계 강우시 방조제 수문을 약 12분 동안 개방으로 인해 담수가 방류된 후 조석류에 따라서 방조제와 지선 주변해역에서 COD, DIN, DIP 등의 농도가 1시간 내지 2시간 안에 일시적으로 급증하였으나 그 후 다시 감소하여 방류전의 농도로 회복하는 특성을 보여 주었다. 따라서 본 해역의 지속적 건강성을 위해서는 간석지 매립에 의해 조성된 방조제를 통한 방류량 및 오염부하량을 효과적으로 관리해야 하는 것으로 평가되었다.

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허혈성 심뇌혈관질환자에서 폐쇄성 수면무호흡증 정도 및 영향요인 (Level of Obstructive Sleep Apnea of Patients with Ischemic Cardio-cerebrovascular Disease and Affecting Factors)

  • 김선화;황선영
    • 한국콘텐츠학회논문지
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    • 제18권4호
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    • pp.114-127
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    • 2018
  • 본 연구는 허혈성 심뇌혈관질환자의 폐쇄성 수면무호흡증 위험정도를 파악하고 그 영향요인을 규명하기 위해 시도되었다. 심뇌혈관집중치료실에 입원한 허혈성 심뇌혈관질환자 141명을 대상으로 구조화된 자가설문지 사용하였고, 펄스 옥시미터를 사용하여 세 시점에서 수면 중 혈중산소포화도를 측정하였으며 SPSS/WIN 20.0을 이용하여 통계분석을 시행하였다. 연구 결과 대상자의 평균연령은 $64.4{\pm}11.1$세였고 남자가 61%였다. 심뇌혈관질환자의 21.3%가 폐쇄성 수면무호흡증 고위험군으로 파악되었고 71.6%에서 수면의 질이 낮은 것으로 나타났다. 폐쇄성 수면무호흡증 고위험군의 수면 중기와 말기에 측정한 산소포화도는 저위험군보다 통계적으로 유의하게 낮은 것으로 나타났으며, 다중회귀분석 결과, 심뇌혈관질환자의 폐쇄성 수면무호흡증 영향요인으로서 과거흡연, 잦은 코골이, 비만, 운동부족이 확인되었다. 따라서, 본 연구결과는 심뇌혈관질환 간호에 있어 폐쇄성 수면무호흡증 또는 잦은 코골이를 위험요인으로 중요하게 인식하고, 심뇌혈관질환의 이차적 재발 예방을 위해 폐쇄성 수면무호흡증 고위험군의 조기선별 및 환자와 가족을 지지하고 건강행태 개선을 위한 상담과 퇴원교육을 강화하기 위한 기초자료로 활용될 것이다.

아산만지역 충적점토의 토질특성에 관한 연구(II) (Studies on the Engineering Characteristics of Alluvial Clayey Deposits in the Bay Area of Asan (II))

  • 유능환;유연택
    • 한국농공학회지
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    • 제30권2호
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    • pp.55-66
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    • 1988
  • This study was conducted to investigate the various engineering properties and correlationshops among the soil constants of alluvial clayey deposits distributed in the bay of Asan and their results are summarized as follows : 1. Grain size distribution of soil was consisted of 12 % of clay, 46-73 % of silt, 2-23 % of sand, and as for the consistency characteristics, 26-36 % of liquid limit, 18-21 % of plastic limit and 6-16 % of plastic index, and so the soil belonging to as a lower plastic nonorganic clay, it's specific gravity was 2,66-2.70, and the location on the plastic chart was approximately above the A-line. Z The natural moisture content and unit weight were 30-43 % and 1.76-1.87 g I cm$_3$, respectively, and according to increment of natural moisture content, the unit weight was decreased, and the initial void ratio and degree of saturation were shown of 0,87-1119 and 92- 100 %, most of saturated. 3. Cone resistance value which was shown 2.4 - 6.5 kg / $cm^2$ was a little lower and it was increased with the depth of layer and shown the formular $q_c=0.7_z+1.32$. 4. Unconfined compression strength was about 0.18-0.43kg /$cm^2$, cu, 0.1-0.22kg / $\psi$, $2-6^{\circ}$ under uu-test condition of triaxial, and CCU, 0.08-0.3 kg/cm , $\psi$, $12-18^{\circ}$ under the condition of cu-test. 5. Pre-consolidation load of characteristics of consolidation was 0.4-0.8 kg / $cm^2$, compression index, about 0.17-0.33. 6. Liquid limit and plastic index were incresased with the increment of clay content but most of alluvial clay was appeared as a normal through non-activity clay soil shown more natural moisture content than liquid limit, and their relationship as follows : LL=0.38( cy+54.8), PI=0.836(LL -17.8), PI =0.468(LL -0.48) 7. The initial void ratio presented correlationship of positive among clay content, natural moisture content and liquid limit, and that of reverse with unit weight, and their results as follws : $e_o=0.024(w_n+0.2)$, $e_o=e_o=0.0003c_y+0.0005 LL+0.0151 W_n+\frac{3.58}{r-t}-1.52$ 8. It was shown that the compression index has correlationship of postive among the clay content, liquid limit, plastic index, natural moisture content and initial void ratio, and their relationships as follows ; $c_c=0.44(e_o-0.47)$, $c_c=0.001$

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The Effect of Pulsatile Versus Nonpulsatile Blood Flow on Viscoelasticity and Red Blood Cell Aggregation in Extracorporeal Circulation

  • Ahn, Chi Bum;Kang, Yang Jun;Kim, Myoung Gon;Yang, Sung;Lim, Choon Hak;Son, Ho Sung;Kim, Ji Sung;Lee, So Young;Son, Kuk Hui;Sun, Kyung
    • Journal of Chest Surgery
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    • 제49권3호
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    • pp.145-150
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    • 2016
  • Background: Extracorporeal circulation (ECC) can induce alterations in blood viscoelasticity and cause red blood cell (RBC) aggregation. In this study, the authors evaluated the effects of pump flow pulsatility on blood viscoelasticity and RBC aggregation. Methods: Mongrel dogs were randomly assigned to two groups: a nonpulsatile pump group (n=6) or a pulsatile pump group (n=6). After ECC was started at a pump flow rate of 80 mL/kg/min, cardiac fibrillation was induced. Blood sampling was performed before and at 1, 2, and 3 hours after ECC commencement. To eliminate bias induced by hematocrit and plasma, all blood samples were adjusted to a hematocrit of 45% using baseline plasma. Blood viscoelasticity, plasma viscosity, hematocrit, arterial blood gas analysis, central venous $O_2$ saturation, and lactate were measured. Results: The blood viscosity and aggregation index decreased abruptly 1 hour after ECC and then remained low during ECC in both groups, but blood elasticity did not change during ECC. Blood viscosity, blood elasticity, plasma viscosity, and the aggregation index were not significantly different in the groups at any time. Hematocrit decreased abruptly 1 hour after ECC in both groups due to dilution by the priming solution used. Conclusion: After ECC, blood viscoelasticity and RBC aggregation were not different in the pulsatile and nonpulsatile groups in the adult dog model. Furthermore, pulsatile flow did not have a more harmful effect on blood viscoelasticity or RBC aggregation than nonpulsatile flow.

합성마그네타이트를 이용한 수상자성유체의 제조 및 특성 (Preparation and properties of water-based magnetic fluid with synthesized magnetite)

  • 김만;오재현;서호준;조명호;김미성
    • 한국자기학회지
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    • 제4권2호
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    • pp.173-178
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    • 1994
  • 본 연구에서는 습식법에 의해 얻어진 초미립 마그네타이트 표면에 오레인산이온을 화학흡 착시키고, 그 위에 SDBS로서 물리흡착층을 형성시켜 수상자성유체를 제조하였다. 이때 마그네타이트의 입도, 계면활성제의 첨가량 및 pH변화등이 분산특성에 미치는 영향을 조사하였으며, 자기기록 pattern 에 의한 관찰등을 통한 분산상태를 조사하였다. 수상자성유체의 분산율은 $Fe^{2+}/Fe^{3+}$의 비에 관계없이 합성마그네타이트 27 g에 대해서 오레인산 첨가량 $2.66{\times}10^{-2}mol$, SDBS 첨가량 10 g하에서 90%이상 유지되었다. 고체함량이 0.05 g/cc에서 0.4 g/cc로 증가함에 따라 수상자성유체의 자화값 은 $Fe^{2+}/Fe^{3+}=0.5$인 경우 1.98 emu/g에서 9.63 emu/g으로, $Fe^{2+}/Fe^{3+}=1.0$일 때에는 2.7 emu/g에서 14.63 emu/g으로 증가하였다. 이때 자성유체의 점도는 $Fe^{2+}/Fe^{3+}=0.5$하에서 1.3 cp에서 4.4 cp로 증가하였다. 1N-HCl 및 1N-NaOH를 사용하여 수성자성유체의 pH변화에 따른 분산특성을 조사한 결과 pH 3.0 ~ 11.0의 영역에서 안정한 분산특성을 나타내었다. 자성유체의 분산특성을 관찰함에 있어서 자기기록 pattern 관찰을 통한 선명도의 확인에 의해서 분산상태를 조사할 수 있었다.

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Comparison of Efficacy of Propofol When Used with or without Remifentanil during Conscious Sedation with a Target-Controlled Infuser for Impacted Teeth Extraction

  • Sung, Juhan;Kim, Hyun-Jeong;Choi, Yoon Ji;Lee, Soo Eon;Seo, Kwang-Suk
    • 대한치과마취과학회지
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    • 제14권4호
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    • pp.213-219
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    • 2014
  • Background: Clinical use of propofol along with remifentanil for intravenous sedation is increasing in these days, but there are not enough researches to evaluate proper target concentration when these drugs are infused by using target controlled infusion (TCI) pump in dental treatment cases. In this study, we compared efficacy of TCI conscious sedation and target concentration of propofol when it used with or without remifentanil during conscious sedation with the help of a TCI for the surgical extraction of impacted teeth. Methods: After IRB approval, all the charts of patients who had undergone surgical extraction of impacted teeth under propofol TCI sedation for 6 months were selected and reviewed for this study. After reviewal of charts, we could divide patients in two groups. In one group (group 1), only propofol was selected for sedation and initial effect site concentration of propofol was $1{\mu}g/ml$ (n = 33), and in another group (group 2), both propofol and remifentanil was infused and initial effect site concentration of each drug was $0.6{\mu}g/ml$ and 1 ng/ml respectively (n = 25). For each group, average propofol target concentration was measured. In addition, we compared heart rate, respiratory rate, and systolic and diastolic blood pressure as well as oxygen saturation. Besides, BIS, sedation scores (OAAS/S), and subjective satisfaction scores were compared. Results: Between group 1 and 2, there were no significant differences in demographics (age, weight and height), and total sedation time. However, total infused dose and the effect site target concentration of propofol was $163.8{\pm}74.5mg$ and $1.13{\pm}0.21{\mu}g/ml$ in group 1, and $104.3{\pm}46.5mg$ and $0.72{\pm}0.26{\mu}g/ml$ in the group 2 with $1.02{\pm}0.21ng/l$ of the effect site target concentration of remifentanil, respectively. During sedation, there were no differences between overall vital sign, BIS and OAAS/S in 2 groups (P > 0.05). However, we figured out patients in group 2 had decreased pain sensation during sedation. Conclusions: Co-administration of propofol along with remifentanil via a TCI for the surgical extraction of impacted teeth may be safe and effective compared to propofol only administration.

The effects of hydrogen treatment on the properties of Si-doped Ga0.45In0.55P/Ge structures for triple junction solar cells

  • 이상수;양창재;하승규;김창주;신건욱;오세웅;박진섭;박원규;최원준;윤의준
    • 한국진공학회:학술대회논문집
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    • 한국진공학회 2010년도 제39회 하계학술대회 초록집
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    • pp.143-144
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    • 2010
  • 3-5족 화합물 반도체를 이용한 집광형 삼중 접합 태양전지는 40% 이상의 광변환 효율로 많은 주목을 받고 있다[1]. 삼중 접합 태양전지의 하부 셀은 기계적 강도가 높고 장파장을 흡수할 수 있는 Ge이 사용된다. Ge위에 성장될 III-V족 단결정막으로서 Ge과 격자상수가 일치하는 GaInP나 GaAs가 적합하고, 성장 중 V족 원소의 열확산으로 인해 Ge과 pn접합을 형성하게 된다. 이때 GaInP의 P의 경우 GaAs의 As보다 확산계수가 낮아 태양전지 변환효율향상에 유리한 얇은 접합 형성이 가능하고, 표면 에칭효과가 적기 때문에 GaInP를 단결정막으로 선택하여 p-type Ge기판 위 성장으로 단일접합 Ge구조 제작이 가능하다. 하지만 이종접합 구조 성장으로 인해 발생한 계면사이의 전위나 미세결함들이 결정막내부에 존재하게 되며 이러한 결함들은 광학소자 응용 시 비발광 센터로 작용할 뿐 아니라 소자의 누설전류를 증가시키는 원인으로 작용하여 태양전지 변환효율을 감소시키게 된다. 이에 결함감소를 통해 소자의 전기적 특성을 향상시키고자 수소 열처리나 플라즈마 공정을 통해 수소 원자를 박막내부로 확산시키고, 계면이나 박막 내 결함들과 결합시킴으로서 결함들의 비활성화를 유도하는 연구가 많이 진행되어 왔다 [2][3]. 하지만, 격자불일치를 갖는 GaInP/Ge 구조에 대한 수소 열처리 및 불순물 준위의 거동에 대한 연구는 많이 진행되어 있지 않다. 따라서 본 연구에서는 Ga0.45In0.55P/Ge구조에 수소 열처리 공정을 적용을 통하여 단결정막 내부 및 계면에서의 결함밀도를 제어하고 이를 통해 태양 전지의 변환효율을 향상시키고자 한다. <111> 방향으로 $6^{\circ}C$기울어진 p-type Ge(100) 기판 위에 유기금속화학증착법 (MOCVD)을 통해 Si이 도핑된 200 nm의 n-type GaInP층을 성장하여 Ge과 단일접합 n-p 구조를 제작하였다. 제작된 GaInP/Ge구조를 furnace에서 250도에서 90~150분간 시간변화를 주어 수소열처리 공정을 진행하였다. 저온 photoluminescence를 통해 GaInP층의 광학적 특성 변화를 관찰한 결과, 1.872 eV에서 free-exciton peak과 1.761 eV에서 Si 도펀트 saturation에 의해 발생된 D-A (Donor to Acceptor)천이로 판단되는 peak을 검출할 수 있었다. 수소 열처리 시간이 증가함에 따라 free-exciton peak 세기 증가와 반가폭 감소를 확인하였고, D-A peak이 사라지는 것을 관찰할 수 있었다. 이러한 결과는 수소 열처리에 따른 단결정막 내부의 수소원자들이 얕은 불순물(shallow impurity) 들로 작용하는 도펀트들이나, 깊은 준위결함(deep level defect)으로 작용하는 계면근처의 전위, 미세결함들과의 결합으로 결함 비활성화를 야기해 발광세기와 결정질 향상효과를 보인 것으로 판단된다. 본 발표에서는 상술한 결과를 바탕으로 한 수소 열처리를 통한 박막 및 계면에서의 결함준위의 거동에 대한 광분석 결과가 논의될 것이다.

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Chloral hydrate/Hydroxyzine과 Midazolam/Meperidine의 경구 투여 진정효과에 관한 비교 연구 (A COMPARATIVE STUDY OF CHLORAL HYDRATE/HYDROXYZINE VERSUS MIDAZOLAM/MEPERIDINE AS ORAL CONSCIOUS SEDATIVE REGIMENS)

  • 김용헌;김지연;박기태
    • 대한소아치과학회지
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    • 제32권2호
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    • pp.262-269
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    • 2005
  • 본 연구의 목적은 소아 환자의 치과 진료를 위한 진정요법 시 chloral hydrate와 hydroxyzine의 경구 투여와 midazolam과 meperidine의 경구 투여간의 임상적인 진정효과 및 합병증 발생 여부를 비교하는 것이다. 삼성서울병원 소아치과를 내원한 환아 중 ASA I 또는 II에 해당하는 4세 미만의 아동 15명을 대상으로 하여 한 달여 간격으로 두 차례에 걸친 진정요법을 시행하였다. 2회의 진정요법 중 1회는 chloral hydrate (60mg/kg)/hydroxyzine(25mg)을 경구 투여하고 나머지 1회는 midazolam(1mg/kg)/meperidine(1mg/kg)을 경구 투여하였으며 투여 순서는 무작위로 정하였다. 두 차례 모두 $N_2O-O_2$ 흡입진정을 병용하였다. 각 치료과정에 따른 진정효과는 Houpt Scale(수면, 움직임, 울음, 전반적인 행동 지수)로 측정하였고 pulse oximeter를 이용하여 저산소증의 유무를 비교, 평가하고 약물 투여 후 구토의 여부를 함께 평가하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Chloral hydrate와 hydroxyzine을 경구 투여한 군이 midazolam과 meperidine을 경구 투여한 군보다 전반적인 행동 지수에서 통계학적으로 유의하게 우수한 결과를 보였으며 어느 군에서도 저산소증은 보이지 않았다. 본 연구에서는 chloral hydrate와 hydroxyzine의 경구 투여가 midazolam과 meperidine의 경구 투여보다 우수한 진정효과를 보이는 것으로 판단된다.

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