To investigate the ultrastructural changes of kidney and clarify to a cause of its changes in lead intoxicated rats, the 0.5% lead acetate administed orally to the rats and those were sacrifled at 2 day, 1, 2, 4, 6 and 8 week after the treatment of lead acetate. Each extirpated kidney was histopathologically examined under the electron microscopy and histochemical examination was also carried out. Concomitantly, the activity of free radical metabolizing enzyme was determined. The blood levels of lead concentration showed a gradual increase from the first group reaching the plateau at the one or two week group with the slightly decreasing value throughout the whole course of the experiment. And the urinary ALA concentration showed a gradual increase from the first group to the 8 week group. In the kidney tissue of rat sacrified at 6 week, the proximal tubular cells showed dilatation of endoplasmic reticulum, mitochondrial swelling, increased numbers of secondary lysosomes and myelin figure-like residual bodies on electron microscope and oxygen free radicals are identified by histochemistry on light microscope whereas there were no differences in the activity of catalase and glutathione peroxidase between the lead acetate treated group and control group. But the activity of xanthine oxidase was more increased in lead acetate treated rats than control group. Furthermore, the superoxide dismutase activity was significantly increased in the experimental group than the control group. In conclusion, it is assumed the kidney damage in lead intoxicated rat may be induced by free radicals.
Fabry disease is an X-linked lysosomal storage disorder caused by a deficiency of the enzyme ${\alpha}-galactosidase$ A, resulting in the accumulation of glycosphingolipids within the lysosomes of various cell types. It has a wide spectrum of clinical phenotypes, and renal failure is a serious complication. Fabry disease is confirmed either by measurement of ${\alpha}-galactosidase$ A activity or by genetic testing for GLA mutations. Renal biopsy findings on light microscopy, specifically enlarged podocytes with foamy cytoplasm, and osmiophilic inclusion bodies in the cytoplasm in all types of renal cells on electron microscopy, are characteristic of this disease. The predominant differential diagnosis is iatrogenic phospholipidosis in association with certain drugs that can cause cellular injuries indistinguishable from Fabry disease. Here, we report the case of a 10-year-old boy with microscopic hematuria who underwent a renal biopsy that showed morphological findings consistent with Fabry disease, although the patient had neither a GLA mutation nor a history of drug consumption. Six years later, spontaneous regression of this renal pathology was observed in a second renal biopsy examination.
In order to know the morphological changes of liver in nitrate poisoning, the ultrastructural studies were carried out on the rabbit liver after potassium nitrate was administered orally at lethal dose, in single treatment, as acute case and at two different levels. 1.0 and 0.5g/kg of body weight daily for 43 and 60 days as chronic case, respectively, The results were summarized as followings: 1. In the hepatic cells of acute case, mitochondria were swollen, disappearance of cristae and variable in shape. Dilatation of rough endoplasmic reticulum and vacuoles containing degenerated cell organells were observed. Glyogen particles were decreased in number. Degenerated Kupffer cells were often seen in acute case. 2. In the hepatic cells of chronic case, there were increase of smooth endoplasmic reticulum, marked enlargement of rough endcplasmic reticulum, detachment of membrane bound ribosome and some rough endoplasmic reticulum changed into smooth endoplasmic reticulum. Secondary lysosome, abundant glycogen paricles and myelin-figure structures were also observed in the cytoplasm of the hepatic cells. The endothelial cells were proliferated in the area of the necrotic cells.
Lysozyme has been reported to be present in the secretory granules of the Paneth cell, and lysozyme immunoreactivity has been detected by immunogold method in Paneth cells of the intestine of human, mouse and rat. The present study was aimed at clarifying the intracellular distribution and changes of the lysozyme immunoreactivity in rabbit Paneth cell after common bile duct ligation of rabbit, using the electron microscope immunogold technique. Healthy adult rabbits weighing about 2kg body weight were divided into normal and bile duct ligated groups. Common bile duct ligation was performed aseptically under ether anesthesia. Experimental animals were sacrificed on the 1st, the 3rd, the 5th, the 7th and the 14th day after the operation. Mucosal specimens from the intestinal gland of ileum were fixed in 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde, followed by 1% osmium tetroxide, embedded in araldite mixture, cut with LKB-V ultratome. Ultrathin sections were placed on parlodion coated nickel grids (200mesh). The section-bearing grids were floated upside down on the added substance in a moist chamber at room temperature except for the primary antibody step, which was at $4^{\circ}C$. Sections were etched with a saturated solution of sodium m-periodate for 60min. After etching, sections were pretreated with 0.02M tris buffered saline (TBS), pH 8.4, with 1% bovine serum albumin (BSA, Sigma) for 60min, then treated polyclonal rabbit anti-human lysozyme (Dakipatts) diluted 1 : 50 in TBS with 0.1% BSA for 20hr. Subsequently, grids were incubated 60min in biotinylated goat anti rabbit IgG (Amersham) diluted 1 : 100 in TBS with 0.1% BSA. After this, sections were incubated 60min on streptavidin gold G10 (Amersham) diluted 1 : 50 in TBS with 0.1% BSA. After each step, the grids were briefly rinsed with TBS with 0.1% BSA. After the strepavidin gold step, the sections were jet washed with distilled water. Counterstain of the sections performed by uranyl acetate and lead citrate, and observed with JEM 100 CX II electron microscope. Observed results were as follow; 1. Secretory granules of mouse Paneth cells have a lysozyme immunoreactivity and also eosinophil leucocyte of rabbit applied for the positive-control stain, are well labeld with gold particles. 2. Normal rabbit Paneth cells have a lysozyme immunoreactivity restricted on the secretory granules. 3. Amount lysosomes containing myelin figures in the Paneth cells were significantly increased from 5th day after the common bile duct ligation. 4. Immunoreactivity of Paneth cell secretory granules were more activated on the 3rd day after the common bile duct ligation as compared with those of the normal animal. But the lysozyme immunoreactivity were decreased from the 5th day after the common bile duct ligation. 5. Considering the above finding, lysozyme contained Paneth cell are affected following of common bile duct ligation, whereas lysosomes containing myelin-figure do not exhibit any immunoreactive relationship with those of secretory granules.
이 실험은 Ehrlich 종양세포를 이식한 후 5-fluorouracil, mitomycin 및 acriflavine-guanosin 복합제(AG60)을 투여하였을 때, 위점막 점액상피세포의 미세구조적 변화를 연구하고자 시행하였다. 실험동물로는 ICR생쥐를 사용하였으며 정상대조군 이외의 종양대조군, 5-fluorouracil, mitomycin C 및 AG60 투여군의 동물들은 샅부위 피부밑조직에 각각 $1{\times}10^7$의 Ehrlich 종양세포를 이식하였다. 각각의 실험군은 종양세포를 이식한 다음날부터 5-fluorouracil (30 mg/kg), mitomycin C ($400{\mu}g/kg$) 및 AG60 (30 mg/kg)을 격일 간격으로 한번씩 피부밑조직에 주사하였다. 종양대조군은 종양세포이식 후에 0.2 mL의 생리식염수를 피부밑조직에 주사하였고 정상대조군은 종양세포를 이식하지 않은 동물을 사용하였다. 종양대조군을 비롯한 실험군은 생리식염수 또는 각각의 약제를 격일 간격으로 7회씩 투여한 다음날, 에테르(ether) 마취하에 앞배벽을 열어 위조직을 절취하였다. 절취한 조직은 2.5% 글루타르알데히드(glutaraldehyde)-1.5% 파라포름알데히드(paraformaldehyde) 혼합액에 고정한 후, 1% 오스뮴사산화물(osmium tetroxide)용액에 다시 고정한 후 탈수과정을 거쳐 애럴다이트(araldite) 혼합액에 포매하였다. 포매된 위점막 조직은 얇은 절편을 만들었으며, 각 절편은 우라닐아세테이트(uranyl acetate)용액과 구연산납(lead citrate)용액으로 대조염색한 후, 전자현미경으로 비교 관찰하였다. 5-fluorouracil 투여군은 종양대조군에 비해 점액상피세포에 수초구조(myelin figure)가 자주 관찰되고, 분비과립이 세포질을 포함한 막성구조에 싸여 속공간으로 함께 분비되는 부분분비현상이 보일 정도로 손상을 받았다. 그리고 mitomycin C 역시 수초구조가 자주 관찰되고 분비과립을 함유한 세포질이 속공간으로 돌출되는 등의 미세구조적 변화를 보였다. 그러나 AG60의 경우는 수초구조와 다소포체가 비교적 자주 관찰되는 외에는 별다른 미세구조적 변화를 관찰할 수 없었다. 이상의 결과를 종합해보면 mitomycin C, 5-fluorouracil 및 AG60을 반복 투여 하면 위점막 점액상피세포의 분비기능이 억제되었음을 시사하는 미세구조적 변화를 보였다. 그러나 세포의 손상 정도가 mitomycin C와 5-fluorouracil 투여군에 비해 AG60 투여군에서 매우 경미하였으므로 AG60은 위점막 점액상피세포의 분비기능에 큰 손상을 주지 않는 약제라고 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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