최근 기후의 급속한 변화에 따라서 식품과 농산물에 Aspergillus, Fusarium 및 Penicillium속에 해당하는 곰팡이에 의한 오염이 빈번하고 이들에 의해 생성되는 aflatoxins, fumonisins, ochratoxins, patulin, trichothecenes, zearalenone등의 곰팡이 독소로 인해서 인간의 건강에 위해를 끼치고 또한 경제적인 손실을 가져오게 하고 있다. 최근 건강에 대한 소비자의 관심으로 인하여 기존에 사용되고 있는 프로피온산 및 소브산과 같은 보존료에 대한 거부감이 증가하고 있어 천연의 소재로부터 이를 대체할 만한 항진균제의 개발이 필요한 상황이다. 본 총설에서는 곰팡이의 생육 및 독소 생성을 제어하기 위한 생물학적 방법으로 유산균의 역할에 대하여 살펴보고자 하였다. 최근의 연구에 의하면 유산균은 저분자 화합물인 유기산, reuterin, 단백질 유래 화합물, 하이드록시 지방산, 페놀 화합물과 같은 다양한 대사산물을 통하여 곰팡이의 생육을 효과적으로 억제시키고 있으며, 또한 유산균의 세포벽 구성성분과의 흡착, 곰팡이 독소의 분해 및 곰팡이 독소의 생산 저해 등을 통하여 곰팡이 독소의 생산을 감소시키고 있는 사실이 제시되고 있다. 유산균은 다양한 종류를 포함하고 있으며 다양한 대사산물을 생산하고 있으므로 이를 바탕으로 효과적으로 곰팡이의 생육 및 독소 생산을 제어할 수 있는 잠재력 갖추고 있으므로, 유산균은 식품에 있어서 곰팡이의 생육을 조절하는 소재로서 주목 받을 것으로 기대된다.
Che, Zhengquan;Liu, Yulan;Wang, Huirong;Zhu, Huiling;Hou, Yongqing;Ding, Binying
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제24권2호
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pp.250-257
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2011
An experiment was conducted to determine the effects of different mycotoxin adsorbents including esterified glucomannan (EGM), hydrated sodium calcium aluminosilicate (HSCAS) and compound mycotoxin adsorbent (CMA) on performance, blood parameters, and liver pathological changes in broilers fed mold-contaminated feed. Two hundred and forty 10-day-old broilers were randomly assigned to one of the five dietary treatments including: i) control diet; ii) mold-contaminated diet; iii) moldcontaminated diet+0.05% EGM; iv) mold-contaminated diet+0.2% HSCAS; v) mold-contaminated diet+0.1% CMA. At 35-days-old, blood and liver tissue samples were collected for analysis. 0.1% CMA improved ADG and ADFI during 10-42 d compared to the moldcontaminated group (p<0.05). The mold-contaminated diet increased total white blood cell (WBC) number, haemoglobin (Hgb) concentration, hematocrit (Hct) level, serum aspartate aminotransferase (AST) and ${\gamma}$-glutamyl transferase (GGT) activities, and decreased red blood cell (RBC) number and serum globulin (GLB) and urea nitrogen (BUN) concentrations (p<0.05). The three mycotoxin adsorbents alleviated the alteration of RBC, WBC, Hgb and AST caused by the mold-contaminated diet. Furthermore, 0.1% CMA increased GLB concentration and decreased Hct level and GGT activity (p<0.05). Liver superoxide dismutase (SOD) activity was reduced, and myeloperoxidase (MPO) activity was increased by the mold-contaminated diet (p<0.05). Both EGM and HSCAS prevented the increase of MPO activity (p<0.05). Liver lesion, including severe vacuolar degeneration of hepatocytes, was observed in chicks fed the mold-contaminated diet. 0.05% EGM prevented these effects except for biliary hyperplasia and mild vacuolar degeneration. 0.2% HSCAS showed medium vacuolar degeneration of hepatocytes. Liver of broilers fed 0.1% CMA revealed a mild vacuolar degeneration. These results indicate that a mold-contaminated diet results in adverse effects on blood parameters and liver morphology. 0.05% EGM and 0.2% HSCAS partially alleviated the adverse effects. However, 0.1% CMA almost completely ameliorated the adverse effects.
Mycoflora was assessed in the commercial meju from four well-separated geographic origins. A total of 112 fungal isolates were identified by phenotypic characteristics and molecular taxonomy using sequencing the internal transcribed spacer of the rDNA and revealed 19 species from 13 genera. Enzymatic characteristics of protease and amylase, and mycotoxin production were analyzed.
The alkaloids, piperlongumine, piperine, pipernonaline, and piperoctadecalidine, isolated from Piper longum L., were found to inhibit the biosynthesis of aflatoxin $B_1$ (AF$B_1$) in Aspergillus flavus WRRC 3-90-42-12. Piperlongumine was the most active among the compounds tested, with a 96% inhibition of AF$B_1$biosynthesis at 0.2% (w/v) supplement in a potato dextrose agar (PDA) medium. The three other piperidine alkaloids, pipeline, pipernonaline, and piperoctadecalidine, also inhibited the biosynthesis of AF$B_1$. Of these three alkaloids, piperoctadecalidine exhibited a potent inhibitory activity with a 100% inhibition of AF$B_1$ production at 0.7% (w/v) supplement in a PDA medium. Therefore, piperlongumine and piperoctadecalidine could be used as antiaflatoxigenic agents in agricultural industries. To determine the antiaflatoxigenic mode of action of piperlongumine, further studies are needed.
Fusarium graminearum is an important pathogen of cereal crops in many areas of the world causing head blight and ear rot of small grains. In addition to serious economic losses, this fungus produces mycotoxins, such as trichothecenes and zearalenone on diseased crops and has been a potential threat to human and animal health. To massively identify pathogenesis-related genes from F. graminearum, two representative strains (SCKO4 from rice and Z03643 from wheat) were mutagenized using restriction enzyme-mediated integration (REMI). In total, 20,DOD REMI transformants have been collected from the two strains. So far, 63 mutants for several traits involved in disease development such as virulence, mycotoxin production, and sporulation have been selected from 3,000 REMI transformants. Now, selected mutants of interest have being genetically analyzed using a newly developed outcross method (See Jungkwan Lee et al poster). In addition, cloning and characterization of genomic DNA regions flanking the insertional site in the genome of the mutants are in progress.
Total aflatoxin and ochratoxin were detected in 3 naturally contaminated fish feed samples using immune-affinity method. The results revealed that the average levels of aflatoxins in the 3 examined samples were (15, 22 and $12\;{\mu}g/kg$) respectively while the average levels of ochratoxins were (15, 6 and $6\;{\mu}g/kg$). The results of determination of the effects of clay as a mycotoxin binder on the health status and performance of Oreochromis niloticus in comparing with a control group revealed that the survival rate in control group was 81% after the end of the culture season. The results also revealed that the survival rate in group 2 which received clay treated feed was 86%. The results of regular parasitological examination revealed the identification of trichodina as external protozoa in Oreochromis niloticus from both ponds but without manifestation of disease signs. The results of bacteriological examination revealed the isolation and identification of Pseudomonas flouresence from some moribund Oreochromis niloticus. Higher performance parameters were recorded in group 2 that received feeds treated with clay which reflected in the total production which reaches 1646.47 kg while in the control pond, the total production was1308.36 kg.
본 연구에서는 가래떡에 오염된 곰팡이를 분리 동정한 후 곰팡이독소 생산 가능성을 조사하여 식품 이물 중 곰팡이에 대한 위험성을 분석하였다. 실험에 사용된 가래떡은 전라남도 소재 떡 제조업체에 곰팡이로 추정되는 이물이 발견되어 반품된 제품을 사용하였다. 곰팡이 이물을 채취한 후 Potato dextrose agar, Malt extract agar, Czapek yeast extract agar에 접종하고 25℃에서 7일간 배양하여 순수 분리 결과를 판단하였다. 순수 분리가 확인된 집락에 대해 광학현미경으로 포자의 미세구조를 관찰하여 형태학적으로 동정하였다. 유전학적 동정은 ITS primer를 이용하여 증폭된 PCR 산물의 유전자 염기서열을 분석하였다. Colony-1과 2는 각각 배지에서 동일한 성상을 나타내어 순수분리 되었음을 확인하였다. Colony-1은 출아세포가 관찰되어 효모로 판정하였다. Colony-2는 방추형의 분생자가 관찰되어 Fusarium 속 곰팡이로 판정하였다. 유전자 염기서열 분석 결과 Fusarium 속 곰팡이가 총 76건으로 나타났으며, 그중 Fusarium solani가 53건으로 가장 높게 나타났다. 형태학적 동정 결과와 유전학적 동정 결과를 바탕으로 Colony-2는 Fusarium spp.로 동정되었고 그 중 Fusarium solani로 추정되었다. Fusarium 속 곰팡이는 Nivalenol, Zearalenone, Fumonisin 등의 곰팡이독소를 생산하여 구토, 설사, 암 등을 유발한다. 이러한 결과를 종합해 볼 때 가래떡에서 분리된 Fusarium 속 곰팡이에 의한 곰팡이독소 생산 가능성은 상존하는 것으로 판단되었다. 따라서 곰팡이 이물이 보고되면 곰팡이를 분리 동정하여 곰팡이독소를 생산할 수 있는 균종인지 판단하고, 그 결과에 따라 행정조치를 강화하여야 할 것으로 판단된다.
본 연구는 미국산 옥수수와 인도산 옥수수의 steam flaking 처리가 in vtro 가스발생량과 미생물 성장량 그리고 곰팡이 독소 aflatoxin $B_1$과 ochratoxin A의 농도에 미치는 영향을 구명하기 위하여 수행되었다. 실험 설계는 4개의 처리구, (1) USCW (미국산 무처리 옥수수), (2) USCF (미국산 steam flaking 옥수수 ), (3) IDCW (인도산 무처리 옥수수) 그리고 (4) IDCF (인도산 steam flaking 옥수수), 처리구당 4반복으로 6개의 발효시간대(3, 6, 9, 12, 18 및 24)를 두고 in vitro 실험을 수행하였다. 공시한 옥수수중 aflatoxin $B_1$이나 ochratoxin A와 같은 곰팡이 독소의 함량은 항구, hopper, 사일로 그리고 가공 전까지 보관기간이 길어짐에 따라 증가하는 경향을 보였다. 공정라인별로 곰팡이 독소를 측정한 결과 입고 시 인도산 옥수수(IDCW)와 미국산 옥수수 (USCW)의 aflatoxin $B_1$ 수치는 각각 11.71 ppb와 1.78 ppb으로 나타났지만 steam flaking 후의 aflatoxin $B_1$ 함량은 USCW 구와 IDCW구에서 전혀 검출되지 않아(0.00 ppb) steam flaking 처리가 곰팡이 Aspergillus flavus를 감소시킬 수 있는 것으로 조사되었다. 그러나 이러한 경향은 ochratoxin A 함량에서 관찰되지 않았다. In vitro 실험에서 gas 발생량은 원산지별로는 미국산 옥수수 (USCW & USCF)가 인도산 옥수수 (IDCW & IDCF) 보다 유의적으로 높았으며 가공 처리별로는 steam flaking 처리한 옥수수가 알곡 옥수수보다 발효 3시간대를 기준으로 $1.5{\sim}2%$ 정도 높았다. 배양액 중의 pH 는 $6.05{\sim}6.54$의 범위로서 미생물이 성장하기에 적정한 pH를 유지하였으며 처리 구간에 유의적인 차이는 찾아 볼 수 없었으나 USCF구의 pH가 다른구에 비해 다소 낮았다. pH는 배양 12 시간까지 감소하였으며 이 시간 중에 가스 발생량은 급격히 증가하였다. In vitro 미생물 성장량도 발효 18시간까지 증가하다가 그 이후 시간대에서는 성장량이 증체를 보이거나 오히려 감소하는 경향이었다. 결론적으로 원산지별로는 in vitro 실험결과와 곰팡이 독소 함량을 기준으로, 미국산 옥수수가 인도산 옥수수보다는 품질이 훨씬 높았으며, 수입산 옥수수의 steam flaking 처리는 invitro 가스발생량 및 미생물 성장량을 개선 시킬 뿐만 아니라, aflatoxin $B_1$이나 ochratoxin A와 같은 곰팡이 독소를 감소시키는 역할을 하였다.
Tyrosinase is an enzyme which catalyzes an enzymatic browning of some foods and in vivo synthesis of melanin. In order to produce natural and edible inhibitor of the enzyme which is expected to have whitening effect on melanogenesis, a microorganism was selected from fermented foods. It was named as NU-7, and cultured in mushroom (Lentinus edodes, Shiitake) media. Optimal media to produce tyrosinase inhibitor was formulated by varing nitrogen or carbon content. If glucose content was in a range of 3-20% and ammonium sulfate was in a range of 0-0.25%, production of inhibitor was independent of cell mass. Addition of ammonium sulfate as a nitrogen source had little effect on inhibitor production. Production of inhibitor (Y) was proportionally related to shiitake content (X) with a regression equation of Y= -0.96X$^{2}$ + 13.07X + 14.43 (R = 0.96). These results indicate that shiitake and glucose are necessary for the production of tyrosinase inhibitor. In the analysis of mycotoxin in culture broth, aflatoxin was not detected, suggesting that it would be probably edible.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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