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흉막 결핵의 진단에 있어서 흉수 검체양에 따른 중합효소연쇄반응 검사의 민감도 (Sensitivity of Polymerase Chain Reaction for Pleural Tuberculosis according to the Amount of Pleural Effusion Specimens)

  • 문진욱
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제62권3호
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    • pp.184-191
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    • 2007
  • 연구 배경: 결핵성 흉막염의 진단에 있어서 흉수에 대한 중합효소연쇄반응 검사는 매우 낮은 민감도를 보였으며, 이는 흉수 내의 결핵균의 수가 적은 데에 기인하는 것으로 추정된다. 이번 연구에서는 흉수의 검체양을 증가시켰을 때 결핵성 흉수에 대한 중합효소연쇄반응 검사의 민감도가 향상되는지를 알아보고자 하였다. 방 법: 결핵성 흉막염에 대한 감별 진단이 필요하였던 53명의 환자에 대하여 전향적인 연구를 시행하였다. 각각의 환자로부터 얻은 흉수를 10 ml, 25 ml, 50 ml로 양을 달리 하여 결핵균에 대한 중합효소연쇄반응 검사를 시행하였으며, Cobas Amplicor MTB (Roche Diagnostic Systems)를 이용하였다. 결핵성 흉막염은 흉수에서 결핵균이 배양된 경우, 흉막 생검에서 결핵이 진단된 경우, 가래에서 결핵균이 배양된 경우 및 기타 원인이 배제된 상태에서 임상적으로 결핵성 흉수가 의심되며 항결핵제 투약으로 흉수가 호전된 경우를 포함하였다. 결 과: 53명의 환자 중 26명이 결핵성 흉막염으로 진단되었다. 흉수에 대한 항산균 바름질, 결핵균 배양, 아데노신 디아미나아제 측정 및 흉막 생검의 민감도는 각각 3.8%, 15.4%, 88.5%, 84.6%이었다. 10 ml, 25 ml, 50 ml의 흉수를 이용한 결핵균 중합효소연쇄반응 검사는 각각 3명(11.5%), 4명(15.4%), 3명(11.5%)에서 양성이었으며, 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다(p>0.05, symmetry exact 검사). 결 론: 결핵균의 수가 극히 적을 것으로 예상되는 흉수 등의 검사물에 대해서는 결핵균 중합효소연쇄반응 검사의 임상적 유용성이 극히 제한적이며, 검사물의 양을 증가시키더라도 민감도는 향상되지 않는다.

다제내성 결핵 균주에서 리팜핀과 리파부틴간의 교차내성률 및 rpoB 유전자 돌연변이와의 연관성 (Cross-resistance Between Rifampicin and Rifabutin and Its Relationship with rpoB Gene Mutations in Clinically Isolated MDR-TB Strains)

  • 김병주;오승환;조은진;박승규
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제60권2호
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    • pp.171-179
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    • 2006
  • 목 적 : RFP과 RBU 사이의 교차 내성률은 다양하게 보고되고 있으며 rpoB 돌연변이가 이에 관여하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 본원에서 동정되어 보관중인 다제내성 결핵균주를 대상으로 하여 두 약물간의 교차 내성률 및 rpoB 돌연변이와의 연관성을 조사함으로써 다제내성 결핵의 치료에 있어 RBU의 효용성에 대하여 알아보고자 하였다. 방 법 : 2004년 한 해 동안 본원 검사실에서 다제내성 결핵균으로 동정되어 보관중인 130균주를 대상으로 하였다. RFP과 RBU의 내성검사는 L-J 배지를 이용한 절대농도법으로 시행하였으며 추가로 다음과 같은 다섯 가지의 농도를 이용하여 RBU의 MICs를 조사하였다; 10, 20, 40, 60, $120{\mu}g/ml$. 내성기준농도는 RFP의 경우 $40{\mu}g/ml$, RBU의 경우 $20{\mu}g/ml$로 하여 내성유무를 판정하였다. rpoB 돌연변이는 LiPA법을 이용한 REBA $MTB-Rifa^{(R)}$검사로 조사하였으며 염기서열분석을 의뢰하여 그 결과를 검증하고 구체적인 개별 돌연변이양상을 알아보았다. 결 과 : RFP은 모두 내성으로 확인되었고 RBU의 $MIC_{50}$$80{\mu}g/ml$, $MIC_{90}$${\geq}160{\mu}g/ml$였으며 RFP과 RBU간의 교차내성률은 70.5%였다. REBA $MTB-Rifa^{(R)}$검사 결과 rpoB 돌연변이는 대부분 코돈 524-534 사이에서 발생하였고 검사를 시행한 100균주 가운데 98개의 균주에서 돌연변이가 확인되어 RFP내성을 진단할 수 있는 진단율은 약물감수성검사와 비교하여 98%의 일치율을 보였다. 염기서열분석결과 코돈 531과 513의 돌연변이는 돌연변이의 양상에 관계없이 항상 RBU내성과 관련되어 있었던 반면 코돈 526의 돌연변이는 돌연변이의 양상에 따라 내성 혹은 감성과 관련되어 있었다. 가장 흔한 돌연변이는 Ser531Leu로 전체의 45.5%를 차지하였다. 약물감수성검사에 비추어 His526Gln, His526Leu, Leu533Pro, Gln513Glu, Leu511Pro가 감성 돌연변이로 판단되었다. 결 론 : 두 약제간의 내성률을 고려하여 볼 때 RBU은 일부 다제내성 결핵의 치료에 있어서 효과가 있겠다. 우선 RBU에 대한 전통적인 약물감수성 검사를 도입하여 적절한 내성기준농도를 확립하는 노력이 필요하며 현재까지 rpoB 유전자 검사법은 임상에 적용하기에 한계가 있는 것으로 사료된다.

객담을 이용한 Mycobacteria의 검출과 중합효소 연쇄반응의 민감성 비교 (Identification of Mycobacteria Using Polymerase Chain Reaction and Sputum Sample)

  • 장형석
    • 대한임상검사과학회지
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    • 제47권2호
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    • pp.83-89
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    • 2015
  • 결핵(Mycobacterium tuberculosis, MTB) 감염은 아직까지 전 세계에서 높은 유병률과 사망의 주요 원인이 되고 있으며 비정형 결핵(nontuberculous mycobacteria, NTM)은 최근 후천성 면역결핍증(AIDS)이나, 종양, 이식 등으로 면역력이 저하된 환자들의 임상 검체에서 분리빈도가 증가함에 따라 분리 균주의 임상적 의의가 중요시 되고 있다. 이에 항산균 염색을 이용한 객담 도말검사는 결핵균과 비정형 결핵균을 구별할 수 없다는 제한점이 있고, 균 분리배양검사는 시간이 오래 걸린다는 단점이 있어, 본 연구에서는 이러한 제한점을 가진 기존의 검사법을 대신하여 분자생물학적 방법인 중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)을 이용하여 균 분리배양 검사와 비교하여 보았다. Mycobacteria를 동정하는데 항산균 염색과 3% ogawa 배지를 이용하였고, 균 분리배양 후 M. tuberculosis를 확인하기 위해서 niacin test를 실시한 결과 집락의 DNA를 추출하여 PCR후 동정된 M. tuberculosis와 niacin 양성이 일치함을 확인할 수 있었다. 또, 이 실험에서 항산성균 염색이 2+ 이상인 객담검체와 집락검체 각각에서 DNA를 추출하여 결핵균을 동정하는 방법으로 M. tuberculosis complex에 특징적으로 존재하는 insertion sequence (IS) 6110의 특정부위인 547 bp와 285 bp 부분을 증폭한 two-tube nested polymerase chain reaction을 시행하였고, 비정형 결핵균 동정법으로는 mycobacteria에 공통적으로 존재하는 rpoB 유전자 중 일부인 360 bp 부분을 증폭한 후, 제한효소 Msp I을 첨가 PCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP)을 시행하였으며, 결핵균과 비정형 결핵균 모두 동정율에 거의 차이가 없었다. 1+인 경우는 객담검체에서 PCR한 결과가 31.2%에서 집락검체의 PCR한 결과 93.7%까지 결핵균과 비정형결핵균의 동정율이 높아졌고, trace인 경우 객담검체에서 PCR 결과가 2%에서 집락검체에서 PCR한 결과가 97.9%까지 결핵균과 비정형 결핵균의 동정율을 높일 수 있었다. 이 실험에서 항산성균 염색 1+이하 일때 객담검체와 집락검체로 PCR을 실시하면 결핵균과 비정형 결핵균의 동정율에 차이가 있고, 배양만으로는 결핵균의 동정은 가능하지만 비정형 결핵균의 동정이 가능하지 않으므로 배양검사와 PCR 검사 모두를 병행하므로써 보다 신속하고 정확한 검사결과를 내는데 도움 될 것이다.

희렴 이 뇌허혈에 미치는 효과 (Effects of Siegesbckiae Herba on the Brain Ischemia)

  • 한종현;나한일;경은호;조규원;김경수
    • 동의생리병리학회지
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    • 제18권6호
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    • pp.1643-1651
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    • 2004
  • This experimental study was designed to investigate the effects of SIEGESBECKIAE HERBA extract (SHE) on the change of cerebral hemodynamics 〔regional cerebral blood flow (rCBF) and mean arterial blood pressure(MABP)〕 in normal condition and cerebral ischemic rats, and to determine the mechanism of action of SHE. This study was designed to investigate whether or not SHE inhibit lactate dehydrogenase (LDH) activity in neuronal cells and cytokines production in serum of cerebral ischemic rats. The results were as follows SHE increased rCBF significantly in a dose-dependent manner, but MABP was not changed by SHE in normal rats. The SHE-induced increase in rCBF was significantly inhibited by pretreatment with indomethacin (IDN), an inhibitor of cyclooxygenase but was increased by methylene blue (MTB), an inhibitor of guanylate cyclase. SHE inhibited lactate dehydrogenase (LDH) activity significantly in neuronal cells. rCBF was increased significantly and stably by SHE(10㎎/㎏, i.p.) during the period of cerebral reperfusion, which contrasted with the findings of rapid and marked increase in control group in ischemic rats. In serum by drawing from femoral arterial blood after middle cerebral arterial occlusion(MCAO) for 1hr and reperfusion for 1hr, the sample group was decreased IL-1β production significantly compared to that of the control group. In serum by drawing from femoral arterial blood after MCAO 1hr and reperfusion 1hr, sample group decreased TNF-α production significantly compared to that of the control grolilp. In serum by drawing from femoral arterial blood after reperfusion 1hr, sample group increased TGF-β production significantly compared to that of the control group. In serum by drawing from femoral arterial blood after MCAO for 1hr and reperfusion for 1hr, IL-10 production of the sample group was similar to that of control group. These results suggested that SHE had inhibitive effect on the brain damage by inhibited LDH activity, IL-1β and TNF-α production, but accelerated TGF-β production.

프로판 및 부탄 이용 미생물에 의한 휘발유 첨가제 MTBE의 동시분해 (Cometabolic Biodegradation of Fuel Additive Methyl tert-Butyl Ether(MTBE) by Propane- and Butane-Oxidizing Microorganisms)

  • 장순웅
    • 한국지하수토양환경학회지:지하수토양환경
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    • 제8권4호
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    • pp.45-52
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    • 2003
  • 국내유류오염지역 토양에서 propane과 butane을 탄소원으로 이용하여 분리된 Nocardia SW3를 대상으로 가스기질농도, 온도, pH 변화에 따른 영향, 그리고 MTBE 공대사 분해 특성을 조사하였다. 초기농도변화에 따른 기질분해속도를 비교하면 propane 및 butane이 70$\mu$㏖일때 각각 30.6, 25.4(n㏖/min/mg protein)으로 관찰되어 빠른 기질이용율을 보여주었으며, 최적온도 및 pH조건은 $30^{\circ}C$, 7이었으며, 실험조건인 온도 $15^{\circ}C$$35^{\circ}C$. pH 5∼8 범위내에서 약간의 차이는 있지만 전반적으로 propane과 butane이 효율적으로 이용되었다. Nocardia SW3를 대상으로 propane 및 butane이 탄소원으로 이용될 때 MTBE분해특성을 비교ㆍ평가한 결과, propane 및 butane의 MTBE 분해 활성도는 유사하였으며, 가스기질이 탄소원으로 이용시 MTB표의 분해량을 나타내는 transformation yield($T_y$)는 propane과 butane의 경우 각각 46.7, 35.0(n㏖ MTBE degraded $\mu$㏖ substrate utilized), transformation capacity($T_c$)는 실험 결과 각각 320, 280(n㏖ MTBE degraded/mg biomass used)로 나타났다. 또한 MTBE 부산물로 TBA가 검출되었으며, TBA의 지속적인 분해를 관찰하였다.

유구치 1급 와동에서 와동벽 위치에 따른 microtensile bond strength 비교 연구 (MICROTENSILE BOND STRENGTH ACCORDING TO DIFFERENT DENTIN WALL POSITION IN CLASS I CAVITY OF PRIMARY MOLAR)

  • 이현헌;정태련;김정욱;장기택
    • 대한소아치과학회지
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    • 제33권4호
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    • pp.693-698
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    • 2006
  • 유구치 1급 와동의 복합레진 수복 시 C-factor가 가장 크게 나타나며 중합수축에 의한 응력도 가장 크게 나타난다. 이 실험에서는 응력이 각 와동벽 위치에 따라 다르게 나타나는 양상을 microtensile bond strength(MTBS)실험을 통해 확인해보았다. 하악 제2유구치 20개를 두 개의 군으로 나누었다. 각각 다른 종류의 복합레진으로 수복하였고 개별 치아에서 각각 치수벽 시편과 축벽 시편을 얻어 총 4개의 군으로 나누었다. MTBS를 측정하였으며 통계적 유의성을 student T-test를 통해 검정하였다. ZP: Filtek Z250- 치수벽, ZA: Filtek Z250- 축벽, SP : Filtek Supreme - 치수벽, SA: Filtek Supreme - 축벽, 다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다. 1. ZP군과 ZA군, SP군과 SA군 사이에서는 유의한 차이가 존재하였다(p<.001). 2. ZP군과 SP군, ZA군과 SA군 사이에서는 유의한 차이가 존재하지 않았다(p<.001).

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대구지역 한 대학병원에서 비결핵 항산균의 미생물학적 분포 및 임상적 특성 (Microbiologic distribution and clinical features of nontuberculous mycobacteria in the tertiary hospital in Daegu)

  • 홍경수;안준홍;최은영;진현정;신경철;정진홍;이관호
    • Journal of Yeungnam Medical Science
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    • 제32권2호
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    • pp.71-79
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    • 2015
  • Background: Recent studies have shown that the nontuberculosis mycobacterium (NTM) recovery rate in clinical cultures has increased within Korea. However, another study conducted by a secondary hospital within Daegu reported different results. Therefore, the purpose of this study is to understand and evaluate the microbiological distribution and clinical features of NTM in Daegu. Methods: A retrospective study was conducted on 11,672 respiratory specimens undergoing acid fast bacilli (AFB) culture from 6,685 subjects who visited Yeungnam University Respiratory Center from January 2012 to December 2013. Results: Of the 11,672 specimens undergoing AFB culture, 1,310 specimens (11.2%) showed positive results. Of these specimens, NTM was recovered from 587 specimens, showing a recovery rate of 44.8%. Identification test for NTM was performed on 191 subjects; the results were as follows: M. avium-intracellulare complex (MAC) 123 (64.4%), M. abscessus 20 (10.5%), M. kansasii 12 (6.3%), and 33 other NTM germ strains. Of the 382 subjects with NTM, 167 were diagnosed with pulmonary NTM disease (43.7%), however virulence differed depending on NTM strain. Multivariate analysis showed that nodular bronchiectasis, the nodules, and finding consistent with cavity under imaging study were statistically significant for triggering pulmonary NTM disease. AFB culture showing MAC and M. abscessus was statistically significant as well. Positive predictive value for NTM polymerase chain reaction (NTM-PCR) was 88.6%. Conclusion: Results for NTM recovery rate within the Daegu area were similar to those for the Seoul metropolitan area. We can assume that NTM infection is increasing in our community, therefore AFB-positive subjects (1) should undergo NTM-PCR, (2) should have their culture results checked for differentiation of mycobacterium tuberculosis complex (MTB) from NTM, and (3) undergo NTM identification test to confirm its type. Administration of treatment with the above results should be helpful in improving the patients' prognosis.

화담통락탕(化痰通絡湯)이 백서의 뇌혈류변화 및 허혈성 뇌손상에 미치는 영향 (Effects of Hwadamtongrak-Tang on the changes of Cerebral Flow in the rats)

  • 박형배;양승정;위통순;박혜선;전상윤;홍석
    • 대한한의학방제학회지
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    • 제14권1호
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    • pp.105-119
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    • 2006
  • Objectives & Methods : This present study was performed to investigate the effect of Hwadamtongrak-Tang extract (HTT) on the regulation of cerebral hemodynamics in terms of regional cerebral blood flow (rCBF) and mean arterial blood pressure (MABP)] in normal and cerebral ischemic rats. Also the effects of HTT on changes in local blood flow, inhibition of LD H activity in neuronal cells, and levels of cytokine production in the serum were determined in the ischemic rat model. The major findings are summarized below. Results : 1. HTT significantly increased rCBF in a dose-dependent manner, but MABP was not changed by HTT treatment. These results suggest that HTT may increase rCBF by dilating cerebral arterial diameter. 2. HTT-induced increase in rCBF was blocked by pretreatment with cyclooxygenase inhibitor indomethacin (IDN, 1 mg/kg, i.p.) and MABP was significantly increased by ID N. 3. Pretreatment of methylene blue $(MTB,\;10\;{\mu}g/kg,\;i.p.)$, an inhibitor of guanylate cyclase, significantly decreased both rCBP and MABP in HTT-treated rats. 4. HTT treatment significantly increased rCBP to a stable level during the period of cerebral reperfusion. 5. HTT significantly inhibited LD H activity in neuronal cells, suggesting a neuroprotection by HTT. 6. Serum interleukin $(IL)-1{\beta}$ and tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$ levels were significantly decreased in the femoral artery 1 hr after middle cerebral arterial occlusion in HTT-treated rats. IL-10 levels in the serum were significantly increased by HTT treatment whereas transforming growth factor $(TGF)-{\beta}$ levels were similar between HTT-treated and control groups. 7. Serum interleukin $(IL)-1{\beta}$ and tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$ levels were significantly decreased in the femoral artery 1 hr after reperfusion in HTT-treated rats. Serum IL-10 levels were significantly decreased in HTT-treated rats compared with the control group, and no significant changes in $(TGF)-{\beta}$ in the serum were observed by HTT treatment. Conclusions: The present data suggest that HTT may have an anti-ischemic effect via the improvement of cerebral hemodynamics and thus protect the brain from ischemic damage.

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온도 차이에 따른 수영훈련이 결핵균 감염정도에 미치는 영향 (Effects of Swim Training on Tuberculosis infection in the Mouse Model at Different Temperature)

  • 곽이섭
    • 생명과학회지
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    • 제15권4호
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    • pp.652-656
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    • 2005
  • 본 연구를 통하여 규칙적인 수영 트레이닝이 체중의 감소를 일으켰으며(온수 및 냉수), 특히 냉수 훈련이 큰 감소를 나타내었다. 온수 훈련군에서는 $INF-\gamma$의 감소를 유발하여 림프구의 증식을 Th0에서 Th2 쪽으로 유도한다는 사실을 알 수 있었으며, 이로 인해 결핵균을 감염시켰을 경우 오히려 폐와 비장에서 결핵균의 수가 현저히 증가하는 사실을 알 수 있어, 수영 훈련군에게서의 결핵균 감염 시 대조군에 비해 균수가 현저히 증가함을 알 수 있었다. 하지만 냉수 훈련군에서는 통제군에 비해 $INF-\gamma$의 현저한 증가를 보여, 결핵균 감염 시 폐에서 결핵균 수가 감소함을 확인 할 수 있었다.

신선조직 검체에서 결핵균 검출을 위한 자동화 중합효소연쇄반응 검사의 유용성 (Usefulness of Automated PCR Test for the Detection of Mycobacterium Tuberculosis in Fresh Biopsy Tissues)

  • 최우순;신소영;김종옥;김명숙;이혜경
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제61권1호
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    • pp.54-59
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    • 2006
  • 연구 배경 : 결핵의 대부분을 차지하는 폐결핵 진단에 객담, 기관지 세척액, 흉수액을 이용한 TB-PCR 검사의 유용성에 대해서는 여러 연구가 있었으나 폐 이외의 결핵 진단을 위한 신선 생검 조직 검체에서의 TB-PCR법 연구는 아직 미흡하다. 이에 저자들은 자동분석법인 COBAS AMPLICOR MTB PCR assay (Roche Molecular System)를 이용하여 신선 생검 조직 검체로 TB-PCR법의 유용성을 알아보았다. 방법 및 대상 : 2004년 10월부터 2005년 12월까지 가톨릭대학교 대전성모병원 병리과와 진단검사의학과에 결핵의진 하에 조직검사와 신선조직을 이용한 항산균 도말검사, 배양검사, TB-PCR 검사가 공히 의뢰된 환자 42예를 대상으로 하였다. 결 과 : 신선 생검 조직 42예를 대상으로 실시한 결과, 임상소견에서 결핵으로 진단된 경우는 18예 이었으며, 그 중 림프절 12예와 폐 조직 2예, 충수 조직 1예, 총 16예(88.9%)에서 PCR 양성을 보였고, 민감도와 특이도, 양성예측도, 음성 예측도는 88.9%, 100%, 100%와 92.3%로 나타났다. 조직학적으로 육아종 소견과 건락성 괴사의 소견 보인 18예(100%)는 모두 결핵으로 진단되었고 그 중 16예(88.9%)에서 PCR 양성을 보였다. 결 론 : 신선 생검 조직 검체를 이용한 TB-PCR 자동분석기의 결과는 임상소견 및 현미경적 소견과 비교 분석 시 민감도와 특이도가 높은 유용한 검사라고 생각되었다.