Interleukin-2 enhancer binding factor 2 (ILF2) was reported to regulate transcription of interleukin-2 (IL-2), a central cytokine in the regulation of T-cell responses. This property of ILF2 was well characterized in human and mammals, but little is known in bony fish. In this paper, an ILF2 homologue was cloned and well characterized from Tetraodon nigrovirid is for the further investigation of the function of ILF2 in bony fish. The full-length Tetraodon ILF2 cDNA was 1380 bp in size and contained an open reading frame (ORF) of 1164 bp that translates into a 387 amino-acid peptide with a molecular weight of 42.9 kDa, a 5' untranslated region (UTR) of 57 bp, and a 3' UTR of 159 bp containing a poly A tail. The deduced peptide of Tetraodon ILF2 shared an overall identity of 58%~93% with other known ILF2 sequences, and contained two N-glycosylation sites, two N-myristoylation sites, one RGD cell attachment sequence, six protein kinase C phosphorylation sites, one amino-terminal RGG-rich single-stranded RNA-binding domain, and a DZF zinc-finger nucleic acid binding domain, most of which were highly conserved through species compared. Constitutive expression of Tetraodon ILF2 was observed in all tissues examined, including gill, gut, head kidney, spleen, liver, brain and heart. The highest expression was detected in heart, followed by liver, head kidney and brain. Stimulation with LPS did not significantly alter the expression of Tetraodon ILF2. Gene organization analysis showed that the Tetraodon ILF2 gene have fifteen exons, one more than other known ILF2 genes in human and mouse. Genes up- and down-stream from the Tetraodon ILF2 were Rpa12, Peroxin-11b, Smad4, Snapap and Txnip homologue, which were different from that in human and mouse.
Allergic skin inflammation such as atopic dermatitis (AD) is characterized by edema and infiltration with various inflammatory cells such as mast cells, basophils, eosinophils and T cells. Thymic stromal lymphopoietin (TSLP) is produced mainly by epidermal keratinocytes, as well as dermal fibroblasts and mast cells in the skin lesions of AD. Omega-3 polyunsaturated fatty acids in fish oil can reduce inflammation in allergic patients. Fermentation has a tremendous capacity to transform chemical structures. The antiinflammatory effects of fish oil have been described in many diseases, but the beneficial effects by which fermented olive flounder oil (FOF) modulates the allergic response is poorly understood. In this study, we produced FOF and tested its ability to suppress the various allergic inflammatory responses. The ability of FOF to modulate the immune system was investigated using a mouse model of AD. The FOF-treated group showed significantly decreased immunoglobulin E (IgE) and histamine in serum. Also, the increased TSLP expression was significantly inhibited in the FOF group; the FOF-treated group was not appreciably different from the hydrocort cream treatment group. In addition, FOF treatment resulted in a smaller spleen size with reduced the thickness and length compared to the induction group. Splenocytes from mice treated with FOF produced significantly less IFN-${\gamma}$, IL-4, T-box transcription factor (T-bet) and GATA binding protein 3 (GATA3) expression compared with the induction group. These results suggest that FOF may be effective in treating the allergic symptoms of AD. 5.
A novel serine/threonine protein phosphatase with EF-hand motif, which belongs to PPEF family was partially cloned from rat brain cDNA by employing RT-PCR method. The size of the amplified clone was 1.6kbp. The amplified DNA was subcloned into pGEM-T-Easy vector and the resulting plasmid was maned as pGEM-rPPEF2. The nucleuotide sequence is shared by 88% with that of mouse PPEF-2 cDNA, and the deduced amino acid sequence reveal 92% homology with that of mouse PPEF-2 cDNA. The N-terminal region of the cloned rat brain PPEF contains a putative phosphatase catalytic domain (PP domain) and the C-terminal region contains multiple $Ca^{2+}$ binding sites (EF region). The putative catalytic domin (PP) and the EF-hand motif (EF) regions were subcloned into pGEX4T-1 and were overexpressed in E. coli DH5 as glutathione-S-transferase (GST) fusion proteins. Expression of the desired fusion protein was identified by SDS-PAGE and also by immunoblot analysis using monoclonal antibody against GST. The recombinant proteins were purified by glutathione-agarose chromatography. This report is first to demonstrate the cloning of PPEF family from rat brain tissues. The clone reported here would be invaluable for the investigation of the role of this new type-phosphatase in rat brain.
For evaluation of biological effect of $p^+(50.5MeV)$ Be neutron beam produced by Korea Cancer Center Hospital (KCCH) cyclotron the RBE had been measured in experimental tumor Walker 256 carcinosarcoma as well as normal tissue, mouse intestine and bone marrow, in single and fractionated irradiation. As pilot study, the RBE had been measured for the mouse jejunal crypt cells in single whole body irradiation of which the result was 2.8. The obtained RBE values of TCD 50 of Walker 256 tumor, bone marrow and intestine En single irraiation were 1.9, 1.9 and 1.5 respectively. In fractionated irradiation, the RBE value of tumor Walker 256 was decreased as increasing of fraction number and increased as increaing of fraction size.
A storage mite, Tyrophcgus putrescentiae, is recently known to be widely distributed in Korea, being commonly found in house dust, and may, therefore, be allergenically important. The purpose of this study was to develop mass rearing techniques for supplying a large quantity of allergens. The laboratory mouse food powder gave the highest yield, showing 1,251.5-fold increase in number after 10 weeks, and the mixed powder of laboratory mouse food and yeast (1 : 1) also gave same level of the production (1.203 1-fold increase in week 10). Several different combinations of temperature and relative humidity conditions were compared, and the maximum propagation was obtained at $25^{\circ}C$ and 64% RH, showing 960-fold increase in number. When the same amount of culture media was used the size of the culture container did not significantly influence the quantitative yield of T. putrescentice mites.
The present study was designed to investigate the appearance of the congenital aggregates of the ectodermal glial cells in the brain of the normal rodents. The brain samples were taken from mice fetus, juvenile mice, rats and rabbits. The appearance regions of the glial cell aggregates (GCA) were investigated and the cells in the GCA were identified with electron microscope. 1. GCA in the mouse fetus tended to be higher in cell density, larger in size and lower frequency in appearance than juvenile mouse. The regions of higher appearance frequency of GCA in the juveniles of mice, rats and rabbits were ordered as subependymal layer in the collateral trigone of lateral ventricles, molecular layer of the neocortex, inner layer except the molecular layer in the neocortex, cerebral medulla, corpus callosum and hippocampus. Appearance frequency of GCA in the neonatal mice tended to be higher until 5 day after birth, and were markedly decreased on 10 and 15 day after birth. 2. GCA tended to be closed on one side of the blood vessels or neurons but not perivascular or perineuronal appearance. 3. In electron microscophy, GCA were composed of immature oligodendrocytes and astrocytes in the subependymal, and tended to be more mature and loose in the neocortex and to be appended some microglia cells with age. The cells in the GCA of older mice tended to be more mature than in young mice.
To investigate the morphological changes of epithelial cells of ductus epididymides by sperm entrance, the Korean striped field mouse, Apodemus agrarius coreae was studied with light and transmission electron microscopy. 1. The diameters of the caput epididymis (Cp) and its lumen were $135\sim145{\mu}(140{\pm}0.5{\mu})$ and $115\sim120{\mu}m(117{\pm}0.1{\mu}m)$. The length and width of the epithelium were $27.0\sim28.5{\mu}m(28.0{\pm}0.1{\mu}m)$ and $4.8\sim5.4{\mu}m(5.1{\pm}0.2{\mu}m)$. 2. The diameters of the corpus epididymis (Cr) and its lumen were $160\sim170{\mu}m(166{\pm}0.2{\mu}m)$ and $140\sim150{\mu}m(145{\pm}0.3{\mu}m)$. The length and width of the epithelium were $17.4\sim18.0{\mu}m(17.6{\pm}0.5{\mu}m)$ and $8.8\sim10.4{\mu}m(9.5{\pm}0.2{\mu}m)$. 3. The diameters of the cauda epididymis (Cu) and its lumen were $270\sim280{\mu}m(275{\pm}0.2{\mu}m)$ and $265\sim275{\mu}m(268{\pm}0.3{\mu}m)$. The length and width of the epithelium were $11.2\sim13.4{\mu}m(12.3{\pm}0.3{\mu}m)$ and $9.2\sim11.2{\mu}m(10.0{\pm}0.2{\mu}m)$. Therefore, the size of diameter and lumen of the ductus epididymides and the width of the epithelium increased from Cp and Cr to Cu, but the length of epithelial cells decreased from Ca and Cr to Cu. These data suggest that the morphological changes of epithelial cells of the ductus epididymides may be the results of the sperm entrance.
In this work, we evaluated the characteristics of flow field and uniformity of the nose-only exposure chambers for the inhalation toxicity test. Computational fluid dynamics (CFD) modeling was carried out to demonstrate uniformity of the nose-only exposure chambers. Because it is very important in the inhalation toxicity experiments that test materials are distributed uniformly to each holder of the chamber. The test was done with these 3 types of chamber with different form to develop inhalation toxicity evaluation system, easy-to-operate system among exposure chamber used for evaluating inhalation toxicity of environmental chemical mixtures. Through CFD interpretation, nose-only exposure chamber was made with the selection of the optimal conditions. For its evaluation, one type of fragrance was selected and measured particle size distribution of each port. The gene becoming luminous to green fluorescence was combined with GPT-SPE, a type of tGFP vector, to be inhaled to the mouse. Based on this, luminous intensity was checked. As a result, total particle number concentration of each port had average value of $3.17{\times}10^6{\sharp}/cm^3$ and range of the highest and lowest concentration value was approximately ${\pm}4.8%$. Autopsy of lung tissues of mouse showed that it had clearly better delivery of gene compared to the control group.
As a mood-altering drug, long-term alcohol consumption have significant harmful effects on the human body and people's mental functioning. This study observed that the suppression of cell mediated immunity induced in spleen of ICR mouse by long-term alcohol administration. After 8% alcohol voluntary administered for 120 days, the splenic tissue irnmunohistochemically stained by following ABC method that used monoclonal antibody including L3T4(CD4), Ly-2(CD8), IL-2 receptor(CD25R) and NK-1.1(CD56) after embedding with paraffin. The results were as follows. 1. The size of marginal zone in splenic white pulp was diminished and the number of macrophage in marginal zone was decreased in test group than control group. 2. After alcohol administration, the number of Helper T lymphocyte, cytotoxic T lymphocyte, and IL-2 receptor were decreased in periarterial lymphatic sheaths of white pulp and penicilla artery of red pulp and the degree of CD4, CD8, and CD25R positive reaction were soften. 3. In test group, the number of NK cell were decreased. These results indicated that the secretion of lymphokine as IL-2 was inhibited by long-term alcohol administration and subsequently prevent to activate and proliferate splenic T lymphocytes and NK cells as cell mediated immunity component.
Alcohol is a major risk factor for several diseases and especially excessive, long-term alcohol consumption are caues the damage of immunity such as the inhibiton of secretion of lymphokine and proliferation of immune component cell. This study observed that the inhibition of T lymphocytic differentiation and secretion of interleukin 2(IL-2) induced in thymus of ICR mouse by chronic alcohol administration. After 8% alcohol voluntary administered for 120 days, the thymic tissue immunohistochemically stained by following ABC method that used monoclonal antibody including L3T4(CD4), Ly-2(CD8), and IL-2 receptor(CD25R) after embedding with paraffin. The results were as follows. 1. The size of thymic medulla in test group reduced than control group. 2. The number of helper T lymphocyte, cytotoxic T lymphocyte, and IL-2 receptor were decreased in thymic medulla and cortico-medullary junction of test group and the degree of CD4, CD8, and CD25R positive reaction were soften in test group. These results indicated that the secretion of IL-2 in thymus was inhibited by chronic alcohol administration and subsequently prevent to differentiate from thymocytes to T lymphocytes. As this view, cell mediated immunity were reduced by chronic alcohol administration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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