• 제목/요약/키워드: Monolayer culture of dissociated cells

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분리 세포의 단층세포 배양법에 의한 인체 비점막 상피세포의 배양 (In Vitro Culture of Human Nasal Epithelial Cells by Monolayer Culture of Dissociated Cells)

  • 김용대;송시연;민명기;서장수;송계원;박호선
    • Journal of Yeungnam Medical Science
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    • 제15권2호
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    • pp.286-296
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    • 1998
  • 비중격 만곡증 환자의 비내수술시 채취한 정상 하비갑개 점막조직으로 부터 상피세포만을 분리세포의 단층배양법(monolayer culture of dissociated cells)으로 배양하여 비점막 상피세포 배양법을 정립하고 또한 배양된 세포가 상피세포임을 동정하기 위하여 간접 면역형광항체법으로 상피세포 특유의 cytokeratin을 확인하였고 투과전자현미경으로 상피세포만이 가지고 있는 교소체(desmosome) 및 장세사(tonofilament) 등을 확인하였으며 6회까지 계대배양을 할 수 있었다. 향후 본 연구에서 배양된 비점막 상피세포를 이용하여 알레르기성 비염 등과 같은 비점막 염증성 질환의 병태생리에서 상피세포의 역할에 대한 연구와 호산구등 염증 세포의 침윤과 상피세포의 손상에 접착분자 및 cytokine의 상호작용에 관한 연구가 계속될 수 있을 것으로 기대한다.

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Isolation and in vitro culture of primary cell populations derived from ovarian tissues of the rockfish, Sebastes schlegeli

  • Ryu, Jun Hyung;Kim, Hak Jun;Bae, Seung Seob;Jung, Choon Goo;Gong, Seung Pyo
    • Fisheries and Aquatic Sciences
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    • 제19권2호
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    • pp.9.1-9.7
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    • 2016
  • This study was conducted to identify the general conditions for the isolation and in vitro culture of ovary-derived cells in rockfish (Sebastes schlegeli). The effects of three different enzymes on cell retrieval from ovarian tissues were evaluated first, and then the ovary-dissociated cells were cultured under various culture conditions, with varying basal media and culture temperatures, addition of growth factors, and/or culture types. We found that collagenase type I treatment was effective for cell isolation from ovarian tissues. From a total of 42 trials to evaluate the effects of basal media and culture temperatures on cell culture of ovary-dissociated cells, we observed that Leibovitz's L15 medium was more supportive than Dulbecco's modified Eagle's medium for culture, and the cells could grow at all three temperatures tested, 15, 20, and $25^{\circ}C$, at least up to passage 2. However, growth factor addition did not improve cell growth. Introduction of suspension culture after monolayer culture expanded the culture period significantly more than did monolayer culture alone. Our results may provide a basis for developing an in vitro system for S. schlegeli germline cell culture, which will ultimately lead to improvement of the species.

마우스의 악하선 세포의 분리 및 배양조건 확립 (Mouse Submandibular Gland Cells: Isolation and Establishment of Culture Condition En vitro)

  • 소준노;박호원;장선일;이금영;이원구
    • 한국동물학회지
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    • 제34권2호
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    • pp.148-158
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    • 1991
  • 마우스의 악하선 세포를 배양하기 위하여 악하선 조직으로부터 세포를 분리하는 조건과 분리된 세포의 배양조건을 조사하였다. 세포분리에는 0.25% trypsin을 사용하였으며 배양액은 여러 농도의 fetal bovine serum (FBS) 또는 low protein serum replacement(LPSR)가 첨가된 Dulbecco's modified Eagle's medium(DME) 이었다. 배양된 세포의 대부분 상피형 세포로 확인 되었으며, 배양시 5-10%의 FBS를 첨가하였을 경우에 가장 높은 DNA합성능을 보였으나 이보다 높은 농도의 FBS 첨가시에는 오히려 DNA 합성능이 저하되었다. 혈청 대체물인 LPSR 첨가에 의한 악하선 세포를 배양 했을 때 population doubling time은 42.5 시간이었고 세포의 포화밀도는 1.2 $\times$10 5 cells / $cm^2$이었다. Dihydrotestosterone (DHT)은 악하선 배양세포의 DNA 합성에 관여하지 않거나, 관여한다면 DNA 합성을 억제하는 것으로 보였다. 이에 반해 Thyroxine (T4)은 악하선 배양세포의 DNA 합성을 현저히 증가시켰다. T4와 DHT 모두다 배양세포의 단백질 합성능을 증가시켰다. 또한 이 호르몬들이 악하선 배양세포의 epidermal growth factor(EGF) 분비를 증가시킨 결과는 DHT와 T4는 악하선 세포의 EGF 생산 뿐만 아니라 EGF 분비의 조절에도 관련되어 있음을 시사한다. 본 실험에서 정해진 악하선 세포의 배양조건은 악하선 세포의 증식과 기능의 변조를 탐구하는데 유용하게 응용될 수 있을 것으로 생각된다.

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