H. Y. Jang;H. S. Kong;Park, K. D.;G. J. Jeon;Lee, H. K.;B. K. Yang
Proceedings of the KSAR Conference
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2003.06a
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pp.47-47
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2003
The present study was conducted to determine the expression of the antioxidant enzyme(CuZn-SOD, Mn-SOD and GPX and apoptosis gene(caspase-3) for in vitro culture in in vitro maturation and in vitro fertilization(IVM/IVF) embryos in porcine. Porcine embryos derived from IVM/IVF were cultured in NCSU23 medium under 5% $CO_2$ in air at 38.5$^{\circ}C$. The patterns of gene expression for several antioxidant enzyme and apoptosis genes during preimplantion porcine embryo development were examined by the modified semi-quantitative single cell reverse transcriptase- polymerase chain reaction (RT-PCR). Preimplantation porcine embryos produced by IVM/IVF have expressed mRNAs for CuZn-SOD and GPX, whereas transcripts for Mn-SOD have not detected at any developmental stages. Expression of caspase-3 mRNA was detected at 2 cell, 8 cell, 16 cell and morula stages. The fas ligand transcripts were detected in porcine blastocyst. These results suggest that various antioxidant enzymes and apoptosis genes play crucial roles in in vitro culture of porcine IVM/IVF embryos.
Oxygen derived radicals($O_2\;^-$, $H_2O_2$, and $OH^-$) are thought to play a role in a lot of human diseases. And it has been believed that antioxidant enzymes such as superoxide dismutase(SOD) and catalase could protect the tissues from damage resulting from the oxygen derived free radicals. The purpose of this study was performed to investigate the activity of the SOD(CuZn- and Mn-SOD) and catalase in inflammatory gingival tissues and the correlation between boold glucose level and antioxidants and age in non-insulin dependent diabetes mellitus(NI- DDM) patients. For this study, the patients were classified into normal, inflammatory, and diabetic, and ten their papillary bleeding index(PBI) and gingival index were checked. Subjects consisted of 11 healthy patients with no inflammatroy gingiva, 20 adult periodontitis patients, and 8 diabetic patients, aged 33 to 66(average: 44.62). The blood glucose level of diabetic group was ranged from 120ml/dl to 160ml/dl(physical status 0 : averge : 135.67ml/dl). Gingival tissues were surgically obtained from the patients during periodontal surgery, extraction, and clinical corwn lenghening procedure. The activity of CuZn and Mn- SOD and catalase in the gingival tissues was measured by using UV-spectrophotometer by the same methods that Crapo et al. And Aebi did, respectively. The results were as follows : 1. The Mn-SOD activity was significantly lower in inflammatory group in comparison to normal group(P<0.05), and the activities of antioxidants in diabetic group were not significant in comparison to normal inflammatory group(P>0.05). 2. The activities of antioxidants showed little variation among individuals of different ages (P>0.05). 3. The higher blood glucose level was, the higher gingival index was(P<0.05). 4. There was no correlation between blood glucoe level and activity of antioxidant in inflammatory gingival tissues of NIDDM patients(P>0.05). In conclusion, these results, within the limits of the present experiment, suggest that the activity of Mn-SOD might reflect the inflammatory status of gingival tissue, and the activity of antioxidants was independent of blood glucose level of diabetic patients in physical status 0.
This study examined effects of the active ingredients from ginseng on paraquat(PQ) toxitity. Mice were given PQ(25mg/kg, ip) and then they were given total saponins (TS; 5mg/kg, orally), protopanaxadiol (PD; 5mg/kg, orally) and protopanaxatriol(PT; 5mg/kg, orally) per day for periods of 1,3 & 7 days. We measured the activities of superoxide dismutase (SOD), electrophoretic isozyme band, catalase (CAT) were compared in the liver of mouse that dose with PQ and/or TS, PD and PT. The activities of SOD, CAT were generally higher in PQ+PD group than others groups. Especially the activity of SOD was the highest in PQ+PD group than others groups. SOD isozyme separated into three bands by electrophoresis. One band was located to near the anode side and two bands were cathode side. As the results of treated with KCN, we were confiremed that the Cu, Zn-SOD was located to near the anode side but the Mn-SOD were cathode side. Our results suggested that an antioxidant effect of ginseng saponins elevated a protection ability to an oxidative damage by direct action of SOD, CAT and reinforced the synthetic ability of endogenous antioxidant material in living organism. Particularly, PD was a effective antioxidant compared with others.
To determine whether antioxidant enzyme systems are related to chilling tolerance, changes of antioxidant enzyme activities during the chilling stress were determined in the leaves of a chilling-tolerant cultivar (Cucurbita ficifolia, cv. Heukjong) and a chilling-sensitive cultivar (Cucurbita moschata, cv. Jaerae 13). Leaves of chilling-tolerant plant have two major isoforms, Fe-SOD and Mn-SOD, at the Rm values of 0.20 and 0.52, respectively. In leaves of chilling-sensitive plant, two major isozymes of SOD was observed, one isoform is Mn-SOD at the Rm value of 0.20, and the other isoform is Cu/zn-SOD at the nm value of 0.58. When plants were treated with chilling stress, Cu/zn-SOD at the Rm value of 0.58 was newly expressed at 10 days after chilling stress in the chilling-tolerant plants, and density of this band increased at five days after chilling stress in the chilling-sensitive plants. One APX isozyme band was observed in unstressed plants of both cultivars. Under the chilling stress one APX isozyme band was newly expressed at 10 days after chilling stress in the chilling-tolerant cultivar. Significant genotype differences were observed fnr POD isozyme banding patterns such as few main isozyme bands in chilling-tolerant plants, and one band in chilling-sensitive plants. Densities of three POD isozyme bands at the Rm of 0.36, 0.40 and 0.54 increased at 10 days after chilling stress in the chilling-tolerant plants, while two bands at the nm of 0.36 and 0.54 increased at 10 days and 20 days after chilling stress in the chilling-sensitive plants, respectively. Activities of SOD, APX and POD significantly increased during five days after chilling stress in both cultivars. In the chilling-tolerant cultivar, activities of these enzymes were higher in chilling-stressed plant than in unstressed plants. However, activities of these enzymes in the chilling-sensitive cultivar decreased rapidly after five days of chilling stress, and were lower in chilling stressed plants than in unstressed plants.
Park, In-Kyung;Im, Jin-Taek;Choi, Do-Yul;Koh, Tae-Song
Journal of Animal Science and Technology
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v.50
no.2
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pp.185-198
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2008
Influences of dietary brown seaweed(BSW) on the nutrient metabolism, anti-oxidant enzyme activity and cell-mediated immune response were studied in broiler chicks activated acute phase response. 72 Hatched male broiler chicks(Ross) were divided into 12 pens, 6 heads per pen, and fed the BSW 0.0% (Basal) or 2.0% diet, respectively, and injected with the Salmonella typhimurium lipopoly saccharide(LPS) for activation of the acute phase response three times at 8, 10 and 12 d of age. During 4 wks of experimental feeding, growth performance of broiler chicks was not affected by dietary BSW and the acute phase response. Compared with control birds, the acute phase response did not affect the daily weight gain in birds fed BSW 2.0% diet, decreased nitrogen balance(NB) or metabolizable energy(ME) utilization per metabolic body size(kg0.75), and enhanced activities of peroxidase or extracellular SOD(EcSOD), tumor necrosis factor-alpha and ovotransferrin in plasma and MnSOD and CuZnSOD in erythrocyte cytosol. Compared to BSW 0.0% diet, 2.0% diet enhanced protein retention(NB) per kg0.75 regardless the acute phase response, did not affect uric acid nitrogen excretion(UAN) per kg0.75 in birds during the acute phase response, decreased(p<0.05) the UAN excretion per kg0.75 in control birds. And BSW 2.0% diet also decreased(p<0.05) plasma peroxide level and erythrocyte peroxidase or MnSOD activity but increased plasma peroxidase and EcSOD activity and interleukin-1 activity secreted from LPS-stimulated PBMC in 4 week broiler chicks.
A Superoxide Dismutase (SOD) gene from the obligate intracellular bacterium Orientia tsutsugamushi has been cloned by using the polymerase chain reaction with degenerate oligonucleotide primers corresponding to conserved regions of known SODs. Nucleotide sequencing revealed that the predicted amino acid sequence was significantly more homologous to known iron-containing SODs (FeSOD) than to manganese-containing SODs (MnSOD). Conserved regions in bacterial FeSOD could also be seen. Isolation of the oriential SOD gene may provide an opportunity to examine its role in the intracellular survival of this bacterium.
We investigated photooxidation and responses of antioxidant enzymes involved in scavenging reactive oxygen species (ROS) after light-chilling ($4^{\circ}C$) for 2 days and post chilling ($25^{\circ}C$) in rice leaves. Chilling leaves indicated a 50% reduction in photosynthetic efficiency ($F_v/F_m$ ratio) and a 48% increase of $H_2O_2$, respectively, compared to the control group. In comparison with the control, activities of superoxide dismutase (SOD) and glutathione reductase (GR) increased at light-chilling and post-chilling. CuZn-SOD and Mn-SOD among SOD forms were detected in rice leaves, while Fe-SOD was not found. The increase of SOD and GR activity may serve as a basis for defense against chilling injury as it dismutase superoxide generated by light-chilling. Catalase (CAT) activity decreased during light-chilling, while activity of APX showed remarkable increase during light-chilling in rice leaves. Among CAT isoforms analyzed by 10% native PAGE, activities of isoform -2 and -3 were inhibited during light-chilling. From the elevated APX activity and decreased CAT activity, we suggest that these two enzymes show mutual supplementary relationships, indicating different tendency during light-chilling.
Two experiments were conducted to examine the effects of the acute phase response on the performance and superoxide dismutase(SOD) activities in liver and erythrocyte of broiler chicks fed dietary krill meals A and B in experiment 1 and krill meal A in experiment 2. The experimental diets are basal diet based on yellow corn and soybean meal and diets substituted 2.0% of krill meal A or B with soybean meal of the basal diet, respectively. Day-old birds fed on the experimental diets and the acute phase response(immunological stress) was activated in the birds on 8-day of age by alternate day injection i.p. with 3 doses the Salmonella typhymurium lipopolysaccharide(LPS) in saline. The values during the acute phase response were compared with those controls injected with saline. The performance; daily gain, feed intake, and feed efficiency were different between dietary krill meal A and B in birds during the acute phase response and in the control. The acute phase response increased relative liver and spleen weights. Recovery of birds from the immunological stress was different between krill meals. Dietary krill meals increased activities of MnSOD and Cu/ZnSOD in erythrocyte cytosols during the actute phase response. Dietary krill meals did not affect the PHA-p response. The results indicated that the dietary krill meals may accentuate oxidative stress during the acute phase response.
The transfer of Mn-Superoxide Dismutase (SOD2) gene, complex gene (SA) of CuZnSOD and ascorbate peroxidase (APX), and NDP kinase 2 (NDPK2) gene into Korean 4 cultivars (cvs. Millenium White, Glory Blue, Glory Red, and Glory Purple) and 15 purebred lines of petunia was conducted using Agrobaterium-mediated technique. Two (Wongyo A2-16 and A2-36) of 15 purebred lines and one (cv. Glory Red) of 4 cultivars were effective for the transfer of SOD2 gene. The putative transgenic plants survived on the 2nd selection medium were 124. From PCR analysis, 118 (derived from 4 cultivars and 2 purebred lines) of 124 plants were confirmed to contain marker (npt II ) gene, while 58 of 118 plants did not have target genes. There were no plants with both npt II and SA genes. Twenty seven of 28 SOD2 transgenic plants were re-confirmed as transformants by Sothern analysis. SOD2 and NDPK2 genes were expressed in the transgenic petunias as the ratio of 77.8 to 100.0 % and 23.5%, respectively. T1 seeds were obtained from 36 acclimated transgenic plants (SOD2 34 plus NDPK2) in a glasshouse by self-pollination.
This study was conducted to investigate the effects of Opuntia humifusa supplementation on lipid peroxidation and superoxide dismutase (SOD) protein expression at resting state in various organs of rats fed a high-fat diet. Sixteen Sprague-Dawley male rats, 6 weeks of age, were randomly divided into two groups: a control diet group (CG, n=8) and an experimental diet group (EG, n=8). They were given a high-fat diet (CG) or a diet supplemented with 5% of O. humifusa (EG) for 8 weeks. The results showed that the malondialdehyde (MDA) levels of the kidney and the liver were significantly lower in the EG group than in the CG group (p<0.01). In addition, the MDA levels in the skeletal muscle of the EG group tended to be lower than those in the CG group, but this difference was not significant. The Cu, Zn-SOD protein expression in the kidney of the EG group was significantly increased compared with that of the CG group (p<0.01). The Mn-SOD protein expression in the skeletal muscle of the EG group was significantly increased compared with that of the CG group (p<0.01). These results suggest that O. humifusa supplementation has antioxidative properties, which are exerted in a specific organ manner, and that it inhibits the action of lipid peroxidation and the expression of SOD in rats fed a high-fat diet.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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