The RK-temperate phage which infected with Bacillus cereus was isolated and the characters were investigated. The induction of RK-temperate phage from host bacterium attained by ultraviolet light irradiation (15W, 30cm, 30-120sec) and mitomycin C treatment (0.2-2 ug/ml). The host range of RK-temperate phage was not revealed with lysogenic and related strains of B. cereus. But B. cereus(PS) 352 which obtained by N-nitrosoguanidine treatment (1,000{$\mu}g/ml)$ to phage infected with host bacteria was sensitive bacteria of RK-temperate phage. RK-temperate phage was stabilized at the condition of nutrient broth (pH 7-8), Tris-buffer (pH 7-8) and ammonium buffer (pH 8-9) and Sorensen's phosphate buffer (pH 6-7), but unstabilized at other salt solutions and pH range. Also, thermostability was to $45^{\circ}C$ but unstabilized at above $50^{\circ}C$. At RK-temperate phage, the measurment values of head, neck, mid tail and end tail were 59nm, $9{\times}16nm,\;10{\times}189nm,\;and\;10{\times}14nm$ respectively. The morphology of head was regular polyhedron, and the end tail was coneate form. On the one hand, the number of capsid protein layer of tail were consist of 4, 35, and 1 at neck, mid tail, and end tail, respectively. RK-temperate phage was identified with DNA phage and G+C contents were 38.63. The latent time of RK-temperate phage was 30 minutes and the burst size was 70-80. And the host bacteria was lysed in case of multi-infection, above moi 1.
The recombinant fluorescent chinese hamster ovary (CHO) cell line was developed and optimized through this study for biomonitoring system. This cell line, called KFC-A10, contains recombinant plasmid(pKCFG) constructed in this study for detecting toxic conditions (Mitomicyn C, EDCs, ${\gamma}-ray$, etc.). It is known that c-Fos is involved in proliferation and differentiation of the signal transduction and overexpression of this gene can lead cell to death under the toxic conditions including apoptosis status. Therefore, pKCFG which has the c-fosSRE::GFP is induced by toxic chemicals, especially DNA damage agents and apoptotic chemicals, and produces green fluorescence protein(GFP) under these toxic conditions. Through the characterization of KFC-A10 using fluorescent assays of GFP, it was shown that KFC-A10 cell line had a manifest GFP expression pattern due to various toxicants especially mitomycin C, ${\gamma}-ray$ and bisphenol A. Therefore this study proved the possibility of using GFP as a reporter for detecting various toxicants
The RK-temperate phage which infected with Bacillus cereus was isolated and the characters were investigated. The induction of RK-temperate phage from host bacterium attained by ultraviolet light irradiation (15W, 30cm, 30-120sec) and mitomycin C treatment (0.2-2 ug/ml). The host range of RK-temperate phage was not revealed with lysogenic and related strains of B. cereus. But B. cereus(PS) 352 which obtained by N-nitrosoguanidine treatment(1,000.$\mu$g/ml) to phage infected with host bacteria was sensitive bacteria of RK-temperate phage. RK-temperate phage was stabilized at the condition of nutrient broth (pH 7-8), Tris-buffer (pH 7-8) and ammonium buffer (pH 8-9) and Sorensen's phosphate buffer (pH 6-7), but unstabilized at other salt solutions and pH range. Also, thermostability was to 45.deg.C but unstabilized at above 50.deg.C. At RK-temperate phage, the measurment values of head, neck, mid tail and end tail were 59nm, 9*16nm, 10*189nm, and 10*14nm respectively. The morphology of head was regular polyhedron, and the end tail was coneate form. On the one hand, the number of capsid protein layer of tail were consist of 4, 35, and 1 at neck, mid tail, and end tail, respectively. RK-temperate phage was identified with DNA phage and G+C contents were 38.63. The latent time of RK-temperate phage was 30 minutes and the burst size was 70-80. And the host bacteria was lysed in case of multi-infection, above moi 1.
Lee Kang Kyoo;Park Kyung Ran;Lee Jong Young;Shin Hyun Soo;Lee Chong In;Chang Woo Ick;Shim Young Hak
Radiation Oncology Journal
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v.16
no.1
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pp.7-16
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1998
Purpose : To evaluate survival rate and prognostic factors affecting survival of patients with esophageal cancer treated with concurrent chemoradiation. Materials and Methods : Eligibility included biopsy proven invasive carcinoma of the cervical or thoracic esophagus, confined to esophagus and mediastinum with or without regional lymph node and supraclavicular lymph node, and ECOG Performance status $H_0-H_2$. Patients received radiation therapy with 5940cGy over 7 weeks and chemotherapy, consisted of 5-FU(1000 $mg/m^2/day$ in continuous infusion for 5 days, days 1 to 5 and days 29 to 33) and mitomycin C($8mg/m^2$ intravenous bolus at day 1). After concurrent chemoradiation, maintenance chemotherapy was followed with 5-FU(1000 $mg/m^2/day$ in continuous infusion for 5 days at 9th, 13th, and 17th weeks) and cisplatin($80mg/m^2$ intravenous bolus at the first day of each cycle). Results : From November 1989 to November 1995, 44 patients were entered in this study. After treatment, complete response rate and partial response rate were $59\%$ and $41\%$. Overall 1, 2, and 5-year survivals were $59\%$, $38\%$, and $9.6\%$(median 17 months), Prognostic factors affecting survival were response to treatment and T-stage. Among 26 complete responders, there were 6 local recurrences, 3 distant recurrences, 1 local and distant recurrence, and 2 unknown site recurrences Acute and chronic complication rates with grade 3 or more were $20\%$ and $13.0\%$ and there was no treatment-related mortality. Conclusion : Concurrent chemoradiation, compared with historical control groups that treated with radiation alone, improved median survival and did not significantly increase treatment-related complications. Complete responders had longer survival duration than partial responders. Predominant failure pattern was local failure. So, efforts to improve local control should be proposed.
In search for new antitumor agents, twelve 6-aziridinylbenzimidazole derivatives were synthesized and their cytotoxicities were tested against three cancer cell lines (mouse lymphocytic leukemia P388 and B16, and human gastric carcinoma SNU-16). From 4-amino-3-nitrotoluene as the starting material, 2-(acetoxymethyl)benzimidazoles (5a-d) were obtained by Phillips reaction. These benzimidazoles were then reacted with Fremy's salt to give a mixture of three 2-(acetoxymethyl) (8a-c) and four 2-(hydroxymethyl)benzimidazole-4,7-diones (9a-d). Addition of these quinones with aziridine afforded 6-aziridinyl-2-(acetoxymethyl) (10a-c) and 6-aziridinyl-2-(hydroxymethyl)benzimidazole-4,7-diones (11a-d). Utilizing 2-(hydroxymethyl)benzimidazole-4,7-diones (9b,d), esters 10d and 13e-h were prepared by the sequential reactions of esterification and addition. The synthesized compounds show potent cytotoxicity against all of three cell lines tested. The cytotoxicities of 10a-d or 11a-d against SNU-16 were wuperior to those of 13e-h, and were equal to or slightly higher than that of mitomycin C. compounds 11a-d were slightly more cytotoxic than 10a-d in all cell lines tested.
The young cells of Clostridiunm saccaroperbutylacetonicum were rapidly autolysed by exposing them to the hypertonic solution of sucrose(0.3-0.6M) without any other supplement to decompose the rigid cell wall. The cells were converted into the spherical cells by lysis. The spherical cells had following properties: (1) they were absent in the cell wall and osmotically fragile. (2) they were stabilized in the existence of 0.4M sucrose and 5mM $MgSO_4$ (3) they were resistant against adsorption of phage particles. (4) they allowed infection of the isolated phage DNA and produced progeny phage particles. (5) they were able to biosynthesize their macromolecules for a few hours according to a balanced manner of biosynthesis. (6) they were able to produce the bacteriocin particles by mitomycin C treatment. (7) they were unable to multiply. These results were all in the level of typical properties of bacterial protoplasts. It was apparent that the spherical cells formed by lysis occcurring by treatment with hypertonic sucrose were protoplasts.
돼지 췌장 유래 엘라스타제의 돌연변이원성을 알아보기 위하여 포유동물 세포를 이용한 돌연변이 시험과 마우스를 이용한 소핵시험을 실시하였다. 엘라스타아제에 의하여 CHO-K1-BH4 cell이 6-thioguanine에 대해 내성을 가지게 되는 변이의 빈도를 조사하였다. 시험결과 엘라스타아제의 농도 증가 (0-30mg/ml)에 따른 변이빈도의 증가가 관찰되지 않았으며, 변이빈도도 음성대조군 변이빈도 치의 2배 이상을 보이지 않았다. 마우스를 이용한 소핵시험에서는 엘라스타아제를 1250, 2500 그리고 5000mg/kg의 용량으로 마우스에 1회 경구 투여 하였으며 양성대조군과 음성대조군에는 각각 mitomycin C 2mg/kg, 10skim milk 20ml/kg 을 각각 복강내와 경구로 투여하였다. 시험결과 엘라스타제 투여군의 소핵 출현빈도는 음성대조군과 비교하여 증가하지 않았다. 위의 결과로 보아 엘라스탄제는 이 시험계들에서 돌연변이원성이 없는 것으로 사려된다.
Kalantari, Heybatullah;Akhbari, Arash;Elliott, Simon
Environmental Mutagens and Carcinogens
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v.22
no.4
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pp.255-258
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2002
In order to determine the safety of chemicals and pharmaceutical products, various methods can be used to evaluate the toxicity. In this study the genotoxic effect of the widely used industrial chemical, cadmium chloride, was assessed using the micronucleus test in peripheral blood of mice. The presence of micronucleated reticulocytes by microscopic observation following acridine orange staining indicated a potential genotoxic effect. The genotoxicity of intraperitoneally (i.p.) administered cadmium chloride (0.5, 1, 2 mg/kg) appeared to be dose dependent, with the maximum tolerated dose (MTD) found to be 2 mg/kg. Compared to the negative control (saline), cadmium chloride (2 mg/kg) exhibited statistically significant genotoxic potential (P<0.05) but was found to be less than the positive control of mitomycin C (0.5 mg/kg) and was not statistically significant compared to historical negative controls (P>0.05).
The medicinal formula, Kilkyungtang (KKT) and two modified Kilkyungtangs (KKT-1 and KKT-2), which were supplemented by the additional crude drug, Houttuyniae herba (KKT-1), and Oldenlandiae diffusae herba (KKT-2) to KKT, had been applied widely as decoctions for the treatment of malignant tumors. Cytotoxic activities against two tumor cell lines, A549 and $B16-F_0$ were investigated. However, none of them were found to exhibit significant cytotoxicity upon tested tumor cells below the concentration of $1000{\mu}g/ml$. However, cytotoxic activities of three reputed antitumor agents, i.e., mitomycin C (MMC), cisplatin (CPT) and 5-fluorouracil (5-FU) was significantly potentiated by the combined treatment of them with KKT, KKT-1 and KKT-2 respectively, especially against A549 (human non small cell lung adenocarcinoma), in vitro.
The s-type pyocin, one kind of bacteriocins, is a bactericidal substabce of protein nature produced by certain Pseudomonas aeruginosa and is active against some other strains of the same or closely related species. Among many Pseudomonas aeruginosa strains collected from the patients at the Hospitals in Seoul and Taegu cities, some Pseudomonas aeruginosa pyocinogeny were determined by pyocin typing. As a result, Pseudomonas aeruginosa 90-2-2205 was selected as the S-type pyocin producing microorganism due to its highest antimicrobial and protease sensitivity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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