A lectin from the hemolymph of purse crab, Philyra pisum, was found to have anti-proliferative activity on human lung cancer cells by our laboratory. In this study, P. pisum lectin (PPL) was molecularly characterized including molecular mass, amino acid sequences, amino acid composition, and the effects of metal ions, temperature, and pH on the activity. We found that PPL showed mitogenic activity on human lymphocytes and BALB/c mouse splenocytes. The mitogenic activity (maximum stimulation index, $SI=9.57{\pm}0.59$) of PPL on human lymphocytes was higher than that of a standard well-known plant mitogen, concanavalin A (maximum $SI=8.80{\pm}0.59$). The mitogenic activity mediated by PPL is required for optimum dosing, and higher or lower concentrations caused decreases in mitogenic response. PPL also induced mitogenic activity on mouse splenocytes, however, the maximum SI ($1.77{\pm}0.09$) on mouse splenocytes of PPL was lower than that ($2.14{\pm}0.15$) of concanavalin A. In conclusion, PPL is a metal ion-dependent monomer lectin with mitogenic activity, and could be used as a lymphocyte or splenocyte stimulator.
The aqueous extract of fresh ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) contains a macromolecular fraction that showed mitogenic and comitogenic activities in human peripheral blood Iymphocytes. Purification of the crude extract by size (ultrafiltration, Sephadex G-200) and charge (DEAE-cellulose. DEAE-Sepharose) yielded a semi-purified fraction (DS-3). This fraction contains at least three subgroups of anionic macromolecules with apparent molecular weight greater than 600 kilodaltons. It is a glycoprotein with a large amount of glucuronic acid. It acts as a mitogen in both T and B cells of human peripheral blood lymphocytes. It could also potentiate the mitogenic action of Concanavalin A in Iymphocyte T cells. Such potentiation is not due to increased binding of Concanavalin A to the cell surface. Its mitogenic and co-mitogenic effects do depend on the presence of extracellular Ca2+.
The aqueous extract of fresh ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) contains a macromolecular fraction that showed mitogenic and co-mitogenic activities in human peripheral blood lymphocytes. Purification of the crude extract by size (ultrafiltration, Sephadex G-200) and charge (DEAE-cellulose, DEAE-Sepharose) yielded a semi.purified fraction (DS-3). This fraction contains at least three subgroups of anionic macromolecules with apparent molecular weight greater than 600 kilodaltons. It is a glycoprotein with a large amount of glucuronic acid. It acts as a mitogen in both T and B cells of human peripheral blood lymphocytes. It could also potentiate the mitogenic action of Concanavalin A in lymphocyte T cells. Such potentiation is not due to increased binding of Concanavalin A to the cell surface. Its mitogenic and co-mitogenic effects do depend on the presence of extracellular Ca2+.
The purpose of the present study was to evaluate the effect of platelet - derived growth factor(PDGF) - BB and insulin - like growth factor(IGF) - 1, Centella Asiatica, and Zea Mays L. on the mitogenic activity of PDL cells from healthy and RPP patients. Combination of PDGF - BB and IGF - 1, Centella Asiatica, and Zea Mays L. were treated on PDL cells and the mitogenic effects were meaured by quantitative assay of methyl - $^3H$ - thymidine incorporation during DNA synthesis. Combination of PDGF - BB and IGF - 1 enhenced the mitogenic effects of both healthy and RPP PDL cells, however, the effect was less pronounced on RPP PDL cells. In cases of Centella Asiatica and Zea Mays L., no mitogenic effect on healthy PDL cells could be noticed.
Several lines evidence indicate that microtubule depolymerization initiates DNA synthesis or enhances the effects of serum or purified growth factors in many types of fibroblasts. Yet little is known about the intracellular events responsible for the mitogenic effect of microtubule disrupting agents. The effects of antitubulin agents on DNA synthesis in sparse and dense cultures in the presence or absence of serum and possible involvement of G-proteins in their mitotic action were examined. In these studies, colchicine by itself appeared to be mitogenic only for confluent quiesecent human lung fibroblasts. In sparse culture, however, colchicine inhibited serum-stimulated DNA synthesis. Colcemid, another antitubulin agent, showed similar effects of growth inhibition and stimulation in sparse and confluent cultures while lumicolhicine, inactive colchicine, did not. The mitogenic effect of two antitubulin agents, colchicine and colcemid, was partially inhibited by pertussis toxin. These data suggest that microtubular integrity is associated with the expression of either negative or positive control on DNA synthesis and mitogenic effect of antitubulin agents may be partially mediated by pertussis toxin-sensitive G protein.
Kim, Huyn-Sik;Huh, In-Hoi;Lee, Sang-Joon;Ann, Hyung-Soo
YAKHAK HOEJI
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v.38
no.6
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pp.806-813
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1994
These experiments were conducted to investigate the effects of Cervi cornu extract on lymphocyte blastogenesis in spleen, thymus, lymph node, born marrow cells of Balb/c mouse, haemagglutination reaction against sheep red blood cell (SRBC), plaque forming cell (PFC) assay against SRBC and IL-2 production. Lymphocyte blastogenesis was determined by $[^3H]-thymidine$ incorporation. According to the lymphcoyte blastogenesis test on the immune cell. Ceriv cornu extrat was showed a potent mitogenic activity on the spleen and lymph node cells, but had mild mitogenic activity on the thymus and born marrow cells. Mitogenic active component of Crevi cornu extract was identified to be materials where molecular weights are higher than 5,000 by membrane filteration method. Cervi cornu extrat was shown to increase mitogenic effect on the lipopolysaccharide (LPS)-stimulated spleen cells significantly, but decrease mitogenic effect on the Con A stimulated spleen cell at the concentration 0.3%, 1% and 3%. Ceriv cornu extract didn't show to be haemagglutination reaction and showed to inhibit the Con A-induced haemagglutination reaction against SREC. Result of SRBC-PEC test. Ceriv cornu extract significantly increase the number of PEC at the concentration of 0.1% and 1%. When IL-2 or IL-4 production was determined by proliferation of CTLL-2 cells. Ceriv cornu extract was not shown to stimulate the production of IL-2. From the above results, it is shown that Ceriv cornu extract increased antibody production by B cells, but nor IL-2 production by helper T cells.
The responses of human pulp fibroblastic cells to Ga-As Semi-Conductor-Dens-Bio Laser (Frequency: 5 Hz~10,000 Hz Model: SD-101A RCA, U.SA)) were examined in vitro using pulp fibroblastic cells obtained from the pulp tissue of human tooth. The mitogenic effect of soft laser was assessed by measuring the MTT assay. The morphologic effect for soft laser showed under the scanning and transmission electron microscopy. The results as follows; 1. The mitogenic response of the soft laser was not observed until 4th time of radiation, while the mitogenic response at 4th time increased mitogenic effect by as much as 1.7 fold compared to the control value. 2. The mitogenic response of the soft laser on pulp fibroblast differ from the mitogenic response on other fibroblasts. 3. In scanning electron microscopic study, The microvilli of cell surface increased gradually with width and length after laser radiation, it demonstrate that development of microvilli have close connection with differentiation of cells. 4. Under the transmission electron microscope, The laser-treated cells maintained their elongated shape and a high degree of cellular polarization. The large cell body containing a well developed Golgi complex, a large number of profiles of rough endoplasmic reticulum, and great numbers of mitochondria. 5. The laser-treated cells maintained the long straight bundles of closely apposed microfilaments or individual filaments forming a cross-linked network. These findings suggest that the laser may have important roles in promotion of pulp healing and consequently may be useful for clinical application in pulp regenerative procedures.
We investigated the immunological function of cheese whey protein concentrate (CWPC), which is a by-product of cheese production, using mitogenic activity in murine splenocytes as an index. A fraction isolated by gel filtration and anion exchange chromatography of CWPC showed high mitogenic activity, comparable to the activity of lipopolysaccharide (LPS). The fraction was detected as a single band on SDS-PAGE. It contained calcium, inorganic phosphorus, and carbo-hydrate, indicating the active component to be a glycophosphopeptide (GPP) Since pronase digestion of GPP did not reduce its mitogenic activity, carbohydrate rather than peptide may be important in the activity, When applied on an anti-${\beta}$-caseinophosphopeptide (${\beta}$-CPP ) antibody affinity column, the GPP was separated into two components, one with affinity to ${\beta}$-CPP and the other without such affinity. Both the components contained N-linked oligosaccharide chains and had the mitogenic activity. These results demonstrate that cheese whey contains a GPP having strong mitogenic activity
The immunostimulatory activities of Lactobacillus plantarum, the major microorganism in kimchi fermentations were investigated. Five strains of L. plantarum exhibited weak immunopotentiating activity, but L. plantarum PS-21 showed as strong a mitogenic activity as Bifidobacterium adolescentis M101-4, a known positive strain. It is of interest that, L. plantarum PS-21 stimulated proliferation of Peyer's patch cells, one of the most important tissues in the gut-associated lymphoreticular system. Cell' wall fractions from L. plantarum PS-21 also showed strong mitogenic activity compared with the soluble cytoplasmic fraction. A peptidoglycan fraction (PG) extracted from the cell wall of L. plantarum PS-21 was identified as an active mitogenic component when used in murine lymph node and spleen cell test systems. PG showed dose-dependent mitogenic activity and significantly enhanced antibody production in lymph node cells when studied in vitro. The lysosomal enzyme activity of murine peritoneal macrophages was increased when analyzed following injection of PG to the host animal. Furthermore, PG enhanced the production of cytokines such ($TNF-{\alpha}$ and IL-6) in the in vitro culture of RAW 264.7 macrophage cells.
Developing new substance for immunosuppressor or immunomodulator from natural products is extremely important in the present biomedicine. In this paper, we focused our efforts on the mitogenicity and immunochemical properties of the two lectins (LCC-I, LCC-II) obtained from marine animal Lunella coronata coreensis. Immunochemical techniques were employed to elucidate the structural and/or functional similarities between the LCC lectins. Molecular weight of the LCC lectins, LCC-I and LCC-II were estimated to be around 60 KD and 66-70 KD, respectively. LCC lectins were mitogens for murine splenic lymphocytes, and the optimum mitogenic doses were 31.25 $\mu\textrm{g}$/ml and 3.91 $\mu\textrm{g}$/ml, respectively. LCC-II lectin was a good mitogen toward human peripheral lymphocytes at a concentration about 31.25 $\mu\textrm{g}$/ml.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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