• 한국미생물·생명공학회지
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• 제36권3호
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• pp.215-220
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• 2008

본인 등이 분리한 Rahnella aquatilis AY2000균주는 S. cerevisiae나 C. albicans에 대한 항효모 작용이 있다. 그러나, AY2000균주는 한천이 함유된 고체배지에 배양하면 항효모 작용을 항상 관찰할 수 있었으나, 액체배양에서는 AYS의 활성이 불안정하여, AYS의 생산과 저장 동안에 그 활성이 소실되곤 하였다. 따라서 AY2000균주가 액체배양에서 안정된 AYS를 생산하도록 배지조성의 변화와 배양조건을 검토하기 위해 항효모 활성을 중심으로 실험을 행하였다. 그 결과 AY2000균주를 YM배지에 배양시킨 AYS의 MIC는 $23.5{\mu}g/mL$이었으나, MYCS배지에 AY2000균주를 배양시킨 AYS의 S. cerevisiae에 대한 MIC는 $15.6{\mu}g/mL$였다. 또한 AY2000균주를 MYCS배지를 사용하여 배양온도에 따라 항효모 활성을 측정한 결과 $25^{\circ}C$와 MYCS배지의 초기pH를 5.5로 조정하였을 때 MIC는 $15.6{\mu}g/mL$ 유지되었으나, 그외에는 항효모 활성이 약화되었다. MYCS배지에서 탄소원으로 포도당이나 설탕을 사용하면 MIC가 $15.5{\mu}g/mL$ 다른 탄소원에 비해 항효모 활성이 강하였다. 또한 MYCS배지에 사용된 질소원으로 $NH_4$-citrate는 농도가 증가 될 수록 AYS의 항효모 활성이 저하되었으며 오히려 $NH_4$-citrate를 배지에서 제거하는 편이 항효모 활성이 양호하였다. 반면에 금속이온으로 $FeCl_3$를 $NH_4$-citrate가 제외된 MYCS배지에 $100{\mu}M$을 첨가하여 AY2000균주를 배양하면 AYS의 S. cerevisiae에 대한 MIC는 $7.8{\mu}g/mL$. 강한 항효모 활성을 나타내었다. 또한 AY2000균주는 $NH_4$-citrate가 제거되고 $100{\mu}M$ $FeCl_3$를 첨가한 MYCS배지(pH 5.5)에서 배양하면 12-24시간 동안에는 MIC가 $7.8{\mu}g/mL$을 유지하였으나, 그 후 48-60시간 동안에는 MIC가 $31.3{\mu}g/mL$로 항효모 활성이 감소되었다.

• 대한수의학회지
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• 제29권3호
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• pp.393-405
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• 1989

This study was carried out to treatment test for bovine mastitis by the determination of adenosine triphosphate (ATP) based on firefly bioluminescence. The results obtained are followed; 1. In the susceptibility test, cephalothin which looks the most effective were sensitive to Staphylococcus sp. (72.3%), Micrococcus sp. (84.2%), Streptococcus sp. (72.7%) and Gram positive bacilli (72.7%), Gram negative bacilli were sensitive to gentamicin (92.3%) and Yeast-like-fungi was the most sensitive to clotrimazole, and nystatin in order. 2. When the number of bacteria, such as Staphylococcus aureus, Candida tropicalis isolated from the mastitis milk were counted by conventional agar plating technique, and compared with the concentration of bacterial ATP, it gave a good linear relationship. The content of ATP per Staphylococcus aureus, cell was 3.1fM and Candida tropicalis showed the high level of A TP (90fM). 3. The ATP assay was applied to the determination of minimal inhibitory concentration (MIC) of various antibiotics. When Staphylococcus aureus was incubated in the presence of different concentration of tetracycline, erythromycin, kanamycin and streptomycin sulfate and the growth was monitored by the conventional agar plating technique and ATP assay, both methods shown the same results that they were 1mcg/ml, 2mcg/ml, 6.25mcg/ml and 8mcg/ml, respectively. 4. For the determination of susceptibility of sensitive and resistant Staphylococcus au reus isolated for the milk with mastitis to tetracycline, erythromycin kanamycin and streptomycin sulfate, the minimum time required for the test was determined by the assay of ATP every 30 minutes during incubation of 3 hours at $37^{\circ}C$. ATP concentration time curve calculated on both resistant and sensitive strains incubated 3 hours as the optimum time for the determination of susceptibilities of various antibiotics exemed. The ATP concentration of each test broth (antibiotic containing), expressed as a percentage of its own control brith (antibioticfree) indicated values of 30% to be indicative of each antibiotic sensitivity. Single time point ATP assay carried out on the various sensitive and resistant of Staphylococcus aureus to antibiotics examined after 3 hours at $37^{\circ}C$ correlated exactly with disc diffusion and MIC. 5. In the cure of intramammary treatment of bovine mastitis in lactating quarters, the cure rate of Staphylococcal mastitis showed to cephalexin (80%), cloxacillin and gentamicin (70%), ampicillin and oxytetracycline (60%), and Streptococcal mastitis showed to cephalexin (85%), penicillin (80%), cloxacillin and oxytetracycline (75%), and ampicillin (70%), but intramammary antimycotic drug (clotrimazol) were only a little effect about fungal mastitis.

• 대한한방부인과학회지
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• 제26권1호
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• pp.25-40
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• 2013

Objectives: The object of this study was to observe the in vitro antibacterial effects of five single(Pulsatillae Radix, Patrinae Radix, Sanguisorbae Radix, Sophorae Flos, and Sophorae Radix) aqueous herbal extracts, traditionally used for treating various gynecological diseases including mastitis in Korea, against Staphylococcus aureus. Methods: Antibacterial activities against Staphylococcus aureus of aqueous extracts of Pulsatillae Radix, PatrinaeRadix, Sanguisorbae Radix, Sophorae Flos, and Sophorae Radix were detected using standard agar microdilution methods. In addition, the effects on the bacterial growth curve were also monitored at Minimal Incubation Concentration(MIC) and $MIC{\times}2$ levels. The effects on the intracellular killing and bacterial invasion of individual test materials were also observed using murine macrophage(Raw 264.7) and human mammary gland carcinoma cell(MCF-7). Results: MIC of aqueous extracts of Pulsatillae Radix, Patrinae Radix, Sanguisorbae Radix, Sophorae Flos, and Sophorae Radix against Staphylococcus aureus were detected as $0.215{\pm}0.107$ mg/ml, $0.273{\pm}0.107$ mg/ml, $0.469{\pm}0.297$ mg/ml, $11.850{\pm}8.406$ mg/ml, and $0.664{\pm}0.546$ mg/ml, respectively. MIC of Ciprofloxacin was detected as $0.469{\pm}0.297{\mu}g/ml$ at same conditions. In addition, all five single aqueous herbal extracts were also showed marked dosage-dependent inhibition of bacterial growth. The effects of intracellular killing with Raw 264.7 and inhibition of bacterial invasion with MCF-7 cells were detected, in the order of Sophorae Flos, Pulsatillae Radix, Patrinae Radix, Sanguisorbae Radix and Sophorae Radix aqueous extracts in the present study. Conclusions: The results obtained in this study suggest that all five single aqueous herbal extracts showed antibacterial effects against Staphylococcus aureus and they also showed dosage-dependent inhibitory effects on the bacterial growth. They showed the significant intracellular killing and inhibition of bacterial invasion effects. It means, all five single aqueous herbal extracts may show potent anti-infectious effects against Staphylococcus aureus for mastitis.

• KSBB Journal
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• 제16권3호
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• pp.269-273
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• 2001

218종의 목본식물 자원으포부터 높은 항율력올 보인 Schima wallichii subsp. liukiuellsis로부터 항균활성물질을 추출, 정제하였다. Schim$\alpha$의 향균물질 추출에 가장 적합한 용매는 70% 에탄올이었으며, 계젤에 따른 항균활성은 차이를 보이지 않았고, 부위별로는 가을에 채취한 수피가 가장 좋았다. 조추출물을 유가용매로 정제하여 최종적으혹 buthanol 분획올 얻었고, 이를 silica gel과 sephadex LH-20 및 HPLC분석을 통 하여 흰색결정의 항균물질 Compound I을 얻었다. 항균물질은 UV, IR, MS분석 결과 aglycone으로 ${\alpha}$-sitosterol에 rhamnose, galactose, glucose가 1:1:1로 결합된 물질로 추정되었다. Compound I의 미생물에 대한 MIC는 3종의 bacteria에 L 1.25 g/L, 2종의 fungi에 5.0 g/L로 나타났으며, 효모에 대한 MIC는 0.04 g/L로 매우 높게 나타났다. Compound I은 천연 보존제, 의약품 등으로의 향후 개발이 기대된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제37권4호
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• pp.371-376
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• 2009

국내산 양앵두의 유용 생리활성 검토를 목적으로 양앵두 열수 추출물 및 순차적 유기용매 분획물을 조제하였다. 양 앵두 추출물의 약 40%는 당류 성분이었으며, 이의 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올 분획물 및 물 잔류물의 분획효율은 각각 0.01%, 3.45%, 16.30% 및 80.24%로 나타나 양앵두 열수 추출물의 대부분이 부탄올 분획 및 물 잔류물로 이행되었다. 에틸아세테이트 분획물은 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량이 가장 높았으며, 물 잔류물은 34%의 총당을 함유하였다. 조제된 열수 추출물과 분획물의 항세균 활성을 평가한 결과 에틸아세테이트 및 부탄올 분획에서 Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, 및 Salmonella typhimurium에 대해 우수한 항세균 활성이 확인되었으며 (MIC, 0.5~1.0 mg/mL), Pseudomonas aeruginosa에는 항균 활성이 나타나지 않았다. 항Candida 활성은 헥산 분획에서만 확인되었으며, 항생제 내성균에 대해서도 우수한 항균 활성을 나타내었다(MIC, 0.5~1.0 mg/mL). 항산화능 평가의 경우 에틸아세테이트 분획에서 우수한 DPPH 소거능($IC_{50}:195.5\;{\mu}g/mL$) 및 환원력을 나타내었다. 본 연구결과는, 양 앵두가 우수한 항균 활성과 항산화 활성을 가진 유용한 과일자원으로 이용될 수 있음을 제시하고 있다.

• Journal of Yeungnam Medical Science
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• 제10권1호
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• pp.135-143
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• 1993

Bacteroides fragilis의 임상 분리균주 45주의 cefaclor, ciprofloxacin, imipenem의 3종 항균제에 대한 감수성 검사를 기존의 한천 평판희석법과 최근 새로이 개발된 E-test (AB Biodisk, Slona, Sweden)법으로, brain heart infusion, Mueller-Hinton, Wilkins Chalgren 한천 배지 3종류를 사용하여 균의 최소발육 억제 농도 (MIC : Minimal Inhibitory Concentration)의 결과를 비교, 관찰하였으며 5종의 quinolone 제제 (ciprofloxacin, enoxacin, norfloxacin, ofloxacin, pefloxacin)에 대한 Bacteroides fragilis group 60주의 시험관내 감수성 검사를 한천 평판 희석법으로 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 한천 평판 희석법에서 관찰된 MIC를 기준으로 E-test MIC의 결과를 비교하면 실험균주 90.3%가 한천 평판희석법의 MIC (within${\pm}$1 dilution)와 일치하여 E-test가 B. fragilis의 항균제 감수성 검사법에 한 종류로 유용한 것으로 생각되며 사용된 배지에 따른 감수성상의 양상은 큰 차이를 관찰할 수 없었으며 B. gragilis의 항균제 감수성 검사용 기본 배지로 brain heart infusion배지와 Wilkins Chalgren배지는 적합하나 Mueller-Hinton배지는 부적합 한것으로 나타났다. Bacteroides fragilis group 60주에 대한 5종의 quinolone제제에 대한 감수성상은 ofloxacin을 제외한 약재에 대해 대부분 내성을 띄었으며 균종간의 감수성상의 두드러진 차이는 관찰되지 않았다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제29권6호
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• pp.490-496
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• 2006

This study aimed to evaluate in vitro effects of Rheum undulatum L. root on the development of dental caries, especially its effects on viability, dental plaque formation, and glycolytic acid production of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus. Methanol extract of Rheum undulatum L. root and its fractions were prepared and tested. Among the test extract and fractions, dichloromethane fraction (DF) showed the most active antibacterial activity (inhibition zone: 13-17 mm) against S. mutans and S. sobrinus in a disc diffusion method. Minimal inhibitory concentrations (MICs) of DF against these bacteria ranged from 0.25 to 0.5 mg/mL. Furthermore, DF significantly inhibited the caries-inducing factors of these bacteria. At sub-MIC levels, DF inhibited in vitro dental plaque formation by S. mutans and S. sobrinus ($IC_{50}$= 0.079 and 0.142 mg/mL, respectively), which was caused, in part, by the inhibitory effect on the activity of glucosyltransferases. A significant reduction of glycolytic acid production was found at the concentration as low as 0.032 mg/mL for S. mutans and 0.063 mg/mL for S. sobrinus. The possible bioactive compounds that are inducing in vitro anti-cariogenic activity of DF are unknown. Based on the preliminary phytochemical analysis, the activity of DF may be related to the presence of anthraquinones, cardiac glycosides, coumarines, sterols/terpenes, and phenolics. These results indicate that DF is probably useful for the control of dental plaque formation and subsequent dental caries development.

• 생명과학회지
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• 제18권2호
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• pp.167-174
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• 2008

치아우식균으로 알려져 있는 Streptococcus mutans에 대한 초피(Zanthoxylum piperitum)의 항균활성을 조사하기 위해, 뿌리, 줄기, 잎, 과피, 그리고 종자 부분을 methanol, ethyl acetate, hexane, methylene chloride등의 유기용매로 추출한 후 그 추출물의 항균활성을 $1{\sim}3$ mg/disc 농도범위에서 측정하였다. 그 결과, 종자의 경우만 활성이 나타났으며 특히 methylene chloride 추출물에서 비교적 높은 항균활성이 확인되었다. 초피종자의 항균활성이 종자의 정유성분을 추출할 경우에도 회수되는지를 조사하기 위해 초피종자 및 초피과피로부터 정유성분을 추출하고 이들의 S. mutans에 대한 항균활성을 측정하였다. 이때 두 정유성분 모두는 종자의 methylene chloride 추출물 보다 더 강한 항균효과를 보였다. 이 정유성분들의 S. mutans에 대한 최소저해농도(MIC)를 액체배양으로 측정한 결과, 초피종자 정유성분의 MIC는 0.3 mg/ml 로, 또한 초피과피 정유성분의 MIC는 4 mg/ml로 나타났다. S. mutans에 대한 항균활성이 가장 높게 나타난 종자의 정유성분을 박층크로마토그래피 방법으로 7가지 분획으로 나누어 그 항균효과를 서로 비교 조사한 결과, 다섯번째 분획(CS-SD-E)의 항균활성이 다른 분획들의 항균활성에 비해 상대적으로 높았으나, 분획 전의 정유성분에 비해서는 모두 항균활성이 낮았다. 초피종자의 항균활성성분을 조사하기 위해, 초피종자의 methylene chloride 추출물과 초피종자 정유성분을 GC-MS로 비교 분석하였다. 초피종자의 methylene chloride 추출물에서는 S. mutans에 대한 항균활성이 이미 보고된 물질로서 carvacrol (0.24%), ${\beta}$-caryphyllene (1.72%), ${\alpha}$-humulene (0.88%)등이 검출되었고, 초피종자 정유성분에서는 sabinene (1.57%), linalool (1.55%), citronellal (13.67%), terpinene-4-ol (0.45%), citronellol (3.69%), geraniol (0.9%), linalyl acetate (1.35%), ${\beta}$-caryophyllene (1.35%), ${\alpha}$-humulene (0.7818%) 및 ${\delta}$-cadinene (0.67%) 등이 S. mutans에 대한 항균활성이 보고된바 있는 물질로서 확인되었다. 이상의 연구결과는 초피종자가 S. mutans에 대해 항균활성을 가지며, 수증기 증류를 통해 확보하는 종자의 정유성분 회수가 이러한 항균물질을 추출하는 효과적인 방법임을 시사한다. 아울러 본 연구결과는 초피종자 유래의 정유성분이 S. mutans에 의해 발생하는 치아우식의 예방에 활용될 수 있음을 시사한다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제49권4호
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• pp.165-170
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• 2006

The antifungal activity of crude methanolic extract and fractions from Yucca smalliana Fern. leaves, roots and flowers were investigated in vitro against a panel of plant pathogenic fungi. The minimal inhibitory concentration(MIC) was determined by an agar dilution method. Preliminary liquid culture and agar plate assays showed that the growth of Fu sarium oxysporum, Phytophthora capsici, Rhizoctonia solani and Botrytis cinerea were inhibited by Y. smalliana extracts. The extracts from flowers and leaves showed antifungal activity of 64.0% and 34.0% against F. oxysporum, 66.0% and 62.0% against P. capsici, and 27.0% and 41.0% against B. cinerea, respectively. The methanolic extract from Y. smallina leaves in distilled water was fractionated using solvents of increasing polarity: hexane, ethyl acetate and butanol. These fractions had a broad spectrum of antifungal activity, found to reside entirely in the butanol and aqueous fraction. The aqueous fraction showed inhibition rate of 60.0, 67.8, 84.6 and 58.3% against F. oxysporum, R. solani, C. gloeosporioides, and B. cinerea, respectively, and the butganol fracgtion showed 36.0, 46.0, 66.1 and 58.3%, respectively. Phenolics(e.g. flavonoids, steroids and terpenoids) were observed in the thin layer profile of the different fractions. Leave extract showed a prominent antioxidant activity totally scavenging the free radical of DPPH at a concentration of 1 mg/ml.

• 한국수산과학회지
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• 제49권5호
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• pp.678-682
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• 2016

Antibacterial activity of 80% methanol extract from 13 commercial herb medicines was measured against fish pathogens Streptococcus iniae, causing several diseases in various kind of fish. Siegesbeckia pubescens showed the strongest antibacterial activity against S. iniae. Methanol extract of S. pubescens was further extracted using several organic solvents having different polarity. Extract from n-hexane and ethyl acetate fraction showed strong activity. Minimal inhibitory concentration, MIC of S. pubescens extract was measured and resulted showing 8 μg/mL with n-hexane fraction and 32 μg/mL with ethyl acetate fraction against S. iniae. The growth of S. iniae was fully inhibited by adding 50 μg/mL (final concentration) of n-hexane or ethyl acetate fraction in the liquid media. It is needed that, from these results, purification and isolation of responsible active compound(s) of these activities and further study on the synergy effect using combination with commercial antibiotics against fish pathogenic bacteria.