Seo, Minseok;Lee, Hyun-Jeong;Kim, Kwondo;Caetano-Anolles, Kelsey;Jeong, Jin Young;Park, Sungkwon;Oh, Young Kyun;Cho, Seoae;Kim, Heebal
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.29
no.3
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pp.343-351
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2016
Although the chemical, physical, and nutritional properties of bovine milk have been extensively studied, only a few studies have attempted to characterize milk-synthesizing genes using RNA-seq data. RNA-seq data was collected from 21 Holstein samples, along with group information about milk production ability; milk yield; and protein, fat, and solid contents. Meta-analysis was employed in order to generally characterize genes related to milk production. In addition, we attempted to investigate the relationship between milk related traits, parity, and lactation period. We observed that milk fat is highly correlated with lactation period; this result indicates that this effect should be considered in the model in order to accurately detect milk production related genes. By employing our developed model, 271 genes were significantly (false discovery rate [FDR] adjusted p-value<0.1) detected as milk production related differentially expressed genes. Of these genes, five (albumin, nitric oxide synthase 3, RNA-binding region (RNP1, RRM) containing 3, secreted and transmembrane 1, and serine palmitoyltransferase, small subunit B) were technically validated using quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) in order to check the accuracy of RNA-seq analysis. Finally, 83 gene ontology biological processes including several blood vessel and mammary gland development related terms, were significantly detected using DAVID gene-set enrichment analysis. From these results, we observed that detected milk production related genes are highly enriched in the circulation system process and mammary gland related biological functions. In addition, we observed that detected genes including caveolin 1, mammary serum amyloid A3.2, lingual antimicrobial peptide, cathelicidin 4 (CATHL4), cathelicidin 6 (CATHL6) have been reported in other species as milk production related gene. For this reason, we concluded that our detected 271 genes would be strong candidates for determining milk production.
Two experiments were conducted to evaluate the effects of forage:concentrate ratios and feeding principles on milk yield, milk composition, body weight change, postpartum oestrus and feed cost. A total of 36 crossbred F1 cows (Holstein Friesian${\times}$Local Yellow) in the 8th week of lactation were used. In each experiment, animals were divided into three groups using a randomized block design according to the milk yield of the previous eight weeks. Cows were fed 30, 50 and 70% concentrate in the diet based on DM. In experiment 1 (Fc), cows were given the same amount of DM with constant ratios of forage and concentrate within treatments. In experiment 2 (Fa), cows were given the same constant amounts of concentrate as in experiment 1 and ad libitum forage. The forage consisted of a natural grass mixture based on 5 species of grasses with high nutritive values. There was no difference in total DM intake between treatments within experiments. However, cows fed forage ad libitum had higher DM intakes compared to cows fed constant forage (1.6, 4.5 and 9.5% for cows fed 70, 50 and 30% forage, respectively). Daily milk yield of cows fed forage ad libitum was higher than that of cows fed constant forage:concentrate ratio. Within experiment, milk yield was highest for cows fed 30% DM forage, followed by cows fed 50% and then cows fed 70% forage (11.17, 10.98 and 10.71 for the 30Fc, 50Fc and 70Fc cows; 11.73, 11.16 and 10.81 kg for the 30Fa, 50Fa and 70Fa cows, respectively). Decreased forage ratio in the diets resulted in decreased milk fat content and tended to increase milk protein. Increased concentrate ratio in the diet and feeding forage ad libitum increased body weight gain. The effect of forage:concentrate ratio on postpartum oestrus was not significant. The feed cost per kg milk produced was lowest for the cows fed 70% forage. It is concluded that increased ratio of concentrate resulted in increased body weight gain, milk yield, milk protein, and decreased milk fat. Feeding forage ad libitum increased feed intake, milk yield and body weight gain. The ratio of 50% forage is more suitable for milk production and animal condition, but in terms of feed cost and under the conditions of small dairy farmers, the 70% ad libitum forage feeding is recommended.
From April 2008 to January 2009, a total 458 raw milk samples were randomly collected from 15 stock raising farms located in northern area of Kyunggi province and cultured for the presence of Enterococci spp. A total 170 enterococcal isolates were recovered from the raw milk samples. Enterococcus faecalis was predominant species recovered (64.7%), followed by E. faecium (18.8%), E. avium (5.9%), E. gallinarum (5.9%) and E. durans (4.7%). Antimicrobial resistance patterns of 170 Enterococci spp. against ampicillin, erythromycin, tetracyclin, chloramphenicol, vancomycin, ciprofloxacin and streptomycin were tested. According to the result, they showed high level resistance to erythromycin and streptomycin (82,9% and 93,5% respectively), moderately resistance to ampicillin, chloramphenicol and tetracyclin (50%, 45.9% and 32%, respectively) but fortunately, vancomycin and ciprofloxacin are still effective against this species.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.14
no.1
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pp.39-46
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1985
The fatty acid composition, total number of fatty acid acyl carbon atoms and species of triglycerides from human milk samples obtained during 70 days of lactation from 39 mothers were determined by argentation thin-layer and gas chromatographic procedures. The medium- and long-chain saturated fatty acids(8:0, 1O:0, 12:0 and 14:0) which are formed exclusively by synthesis within mammary gland increased significantly from colostrum to mature milk. Long-chain saturated fatty acids(16 : 0, 22 : 0 and 24: 0) were significantly higher than tile levels found in transitional and mature milk. The precursors of w C- and w 3-series, 18:2 w 6 and 18:3 w 3, were increased slightly in progressing lactation. Colostrum contained significantly higher proportions of 18:1 w 9 and w 6- and w 3- derived long-chain polyunsaturated fatty acids than transitional milk, and these levels were further reduced in mature milk. The triglycerides of human milk lipids which were made up of 30-60 acyl carbon atoms showed a pattern with major contributions made by the glycerides with 44-52 acyl carbon atoms. The levels of triglycerides with less than 46 acyl carbon atoms increased significantly with the elapse of lactation period, whereas those with more than 50 acyl carbon atoms decreased significantly. The fully saturated trig1ycerides increased significantly as the lactation proceeded, but the dienoic triglycerides declined significantly.
This study was carried out to evaluate the safety of Korean human milk. The microorganisms were identified from human milk of 149 healthy mothers by two collection methods, hand and pump expression. The means of total bacterial counts were 2.33x10$^4$ cfu/mL on the samples collected by the pump expression and 7.83xl0$^3$ cfu/mL on those collected by the hand expression. Therefore, the total bacterial counts of pump expression samples was 9.80xl0$^2$∼3.06x10$^4$ cfu/mL more than that of hand expression samples. The coliform counts of pump expression was 9.36xl0$^3$∼8.57xl0$^4$ cfu/mL more than that of hand expression. However, there was any significant differences of the lactic acid bacterial counts between the two samples collected by each methods. 100 strains of 5 patterns of total bacterial counts were isolated based on the morphology of colony in the standard plate count agar. 13 species were identified among the isolated strains. The dominant species in Korean human milk were Staphylococcus which 7 subspecies identified(81% in the rate of total bacteria, 1.07x10$^4$ cfu/mL). Other species identified were Micrococcus, Bacillus, Providencia, Pseudomonas, Yersinia and Acinetobacter. 36 strains of 6 patterns of lactic acid bacterial counts were isolated based on morphology of colony in the BCP agar. 7 species were identified among the isolated strains. The dominant species of lactic acid bacteria in Korean human milk were Lactobacillus brevis(50.9% in the rate of lactic acid bacteria, 4.72xl0$^4$ cfu/mL). Others species identified(49.1% lactic acid bacteria) were Lactobacillus curvatus, Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis, Lactobacillus acidophilus, Leuconostic lactis and Streptococcus salivarius subsp. thermophilus.
To understand the formation of initial gut microbiota, three initial fecal samples were collected from two groups of two breast milk-fed (BM1) and seven formula milk-fed (FM1) infants, and the compositional changes in gut microbiota were determined using metagenomics. Compositional change analysis during week one showed that Bifidobacterium increased from the first to the third fecal samples in the BM1 group (1.3% to 35.1%), while Klebsiella and Serratia were detected in the third fecal sample of the FM1 group (4.4% and 34.2%, respectively), suggesting the beneficial effect of breast milk intake. To further understand the compositional changes during progression from infancy to childhood (i.e., from three weeks to five years of age), additional fecal samples were collected from four groups of two breast milk-fed infants (BM2), one formula milk-fed toddler (FM2), three weaning food-fed toddlers (WF), and three solid food-fed children (SF). Subsequent compositional change analysis and principal coordinates analysis (PCoA) revealed that the composition of the gut microbiota changed from an infant-like composition to an adult-like one in conjunction with dietary changes. Interestingly, overall gut microbiota composition analyses during the period of progression from infancy to childhood suggested increasing complexity of gut microbiota as well as emergence of a new species of bacteria capable of digesting complex carbohydrates in WF and SF groups, substantiating that diet type is a key factor in determining the composition of gut microbiota. Consequently, this study may be useful as a guide to understanding the development of initial gut microbiota based on diet.
Beef, pork, chicken and milk are considered representative protein sources in the human diet. Since the digestion of protein is important, the role of intestinal microflora is also important. Despite this, the pure effects of meat and milk intake on the microbiome are yet to be fully elucidated. To evaluate the effect of beef, pork, chicken and milk on intestinal microflora, we observed changes in the microbiome in response to different types of dietary animal proteins in vitro. Feces were collected from five 6-week-old pigs. The suspensions were pooled and inoculated into four different media containing beef, pork, chicken, or skim milk powder in distilled water. Changes in microbial communities were analyzed using 16S rRNA sequencing. The feces alone had the highest microbial alpha diversity. Among the treatment groups, beef showed the highest microbial diversity, followed by pork, chicken, and milk. The three dominant phyla were Proteobacteria, Firmicutes, and Bacteroidetes in all the groups. The most abundant genera in beef, pork, and chicken were Rummeliibacillus, Clostridium, and Phascolarctobacterium, whereas milk was enriched with Streptococcus, Lactobacillus, and Enterococcus. Aerobic bacteria decreased while anaerobic and facultative anaerobic bacteria increased in protein-rich nutrients. Functional gene groups were found to be over-represented in protein-rich nutrients. Our results provide baseline information for understanding the roles of dietary animal proteins in reshaping the gut microbiome. Furthermore, growth-promotion by specific species/genus may be used as a cultivation tool for uncultured gut microorganisms.
In this study, traditional culture method and 16S rRNA gene analysis were applied to reveal the composition and diversity of lactic acid bacteria (LAB) of fermented cow milk, huruud and urum from Baotou and Bayannur of midwestern Inner Mongolia. Also, the quantitative results of dominant LAB species in three different types of dairy products from Baotou and Bayannur were gained by quantitative polymerase chain reaction (q-PCR) technology. Two hundred and two LAB strains isolated from sixty-six samples were identified and classified into four genera, namely Enterococcus, Lactococcus, Lactobacillus, Leuconostoc, and twenty-one species and subspecies. From these isolates, Lactococcus lactis subsp. lactis (32.18%), Lactobacillus plantarum (12.38%) and Leuconosto mesenteroides (11.39%) were considered as the dominated LAB species under the condition of cultivating in MRS and M17 medium. And the q-PCR results revealed that the number of dominant species varied from samples to samples and from region to region. This study clearly shows the composition and diversity of LAB existing in fermented cow milk, huruud and urum, which could be considered as valuable resources for LAB isolation and further probiotic selection.
The determination of trace selenium in milk powder has been studied by octopole reaction cell(ORC)-ICP-MS. The interferences by polyatomic ions and other concomitant molecular species could be removed remarkably by using $H_2$ as reaction gas in ORC. Compared to the normal mode (no cell gas), the $H_2$ cell gas mode improved the accuracy and precision. The quantitative result was average 102.7% and it was slightly higher than certified standard value of milk powder and the RSD was 7.6%.
In this paper, a rapid and reliable gene-targeted species-specific polymerase chain reaction (PCR) technique based on a two-step process was established to identify bifidobacteria in dairy products. The first step was the PCR assay for genus Bifidobacterium with genus specific primers followed by the second step, which identified the species level with species-specific primer mixtures. Ten specific primer pairs, designed from nucleotide sequences of the 16-23S rRNA region, were developed for the Bifidobacterium species including B. angulatum, B. animalis, B. bifidum, B. breve, B. catenulatum, B. infantis, B. longum, B. minimum, B. subtile, and B. thermophilum. This technique was applied to the identification of Bifidobacterium species isolated from 6 probiotic products, and four different Bifidobacterium spp. (B. bifidum, B. longum, B. infantis, and B. breve) were identified. The findings indicated that the 16S-23S rDNA gene-targeted species-specific PCR technique is a simple and reliable method for identification of bifidobacteria in probiotic products. PCR combined with Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE) for identification of the bifidobacteria was also evaluated and compared with the gene-targeted species-specific technique. Results indicated that for fermented milk products consistency was found for both species-specific PCR and PCR-DGGE in detecting species. However, in some lyophilized products, the bands corresponding to these species were not visualized in the DGGE profile but the specific PCR gave a positive result.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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