de Souza, Angelica Cristina;Carvalho, Fernanda Paula;Silva e Batista, Cristina Ferreira;Schwan, Rosane Freitas;Dias, Disney Ribeiro
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제23권10호
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pp.1403-1412
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2013
Ethanol fuel production from lignocellulosic biomass is emerging as one of the most important technologies for sustainable development. To use this biomass, it is necessary to circumvent the physical and chemical barriers presented by the cohesive combination of the main biomass components, which hinders the hydrolysis of cellulose and hemicellulose into fermentable sugars. This study evaluated the hydrolytic capacity of enzymes produced by yeasts, isolated from the soils of the Brazilian Cerrado biome (savannah) and the Amazon region, on sugarcane bagasse pre-treated with $H_2SO_4$. Among the 103 and 214 yeast isolates from the Minas Gerais Cerrado and the Amazon regions, 18 (17.47%) and 11 (5.14%) isolates, respectively, were cellulase-producing. Cryptococcus laurentii was prevalent and produced significant ${\beta}$-glucosidase levels, which were higher than the endo- and exoglucanase activities. In natura sugarcane bagasse was pre-treated with 2% $H_2SO_4$ for 30 min at $150^{\circ}C$. Subsequently, the obtained fibrous residue was subjected to hydrolysis using the Cryptococcus laurentii yeast enzyme extract for 72 h. This enzyme extract promoted the conversion of approximately 32% of the cellulose, of which 2.4% was glucose, after the enzymatic hydrolysis reaction, suggesting that C. laurentii is a good ${\beta}$-glucosidase producer. The results presented in this study highlight the importance of isolating microbial strains that produce enzymes of biotechnological interest, given their extensive application in biofuel production.
본 연구에서는 미생물의 대사체계를 이용하여 유자껍질내의 유자정유성분을 생전환 시키므로써 고부가가치 고기능성 천연향의 발굴 생산을 시도하였다. 유자정유 성분 대사능 유전자를 지닌 E. coli 형질전환주 EC3, EC4, EC6의 공동 배양액을 유자정유가 유일한 탄소원인 M9배지에서 28$^{\circ}C$로 진탕배양 하였다. 각 공동 배양액(EC3+EC4. EC3+EC6, EC4+EC6 and EC3+C4+EC6)은 각 형질전환주의 단독배양 보다 3∼4배 더 높은 생육도를 나타냄을 알 수 있었다. 공동배양에 의해 생전환된 물질들은 GC-MS에 의해 확인하였다. 각 공동배양액의 주요한 대사산물로는 linalool, 4-terpineol, ${\alpha}$-terpineol이 공통적으로 검출되었다. 소량씩 존재하나 배양액의 주요한 향을 결정할 것으로 보이는 각기 다른 terpene 계열 화합물들이 각각의 공동배양액 대사산물로 검출 되었는데, 공동배양액EC3+EC4에서는 elemol, ocimene, nonanal, trans-2-nonenal이 공동배양액EC3+EC6에서는 cis-ocimene, 2-octanol, octanal. ${\alpha}$-terpinolene, 공동배양액 C4+EC6에서는 ocimene, 그리고 공동배양액EC3+EC4+EC6에서는 nonanal, 2-octenol, iso-menthol, ocimene이 각각 검출되었다.
Current fuel ethanol research and development deals with process engineering trends for improving biotechnological production of ethanol. Recently, a large amount of studies regarding the utilization of lignocellulosic biomass as a good feedstock for producing fuel ethanol is being carried out worldwide. The plant biomass is mainly composed of cellulose, hemicellulose and lignin. The main challenge in the conversion of biomass into ethanol is the complex, rigid and harsh structures which require efficient process and cost effective to break down. The isolation of microorganisms is one of the means for obtaining enzymes with properties suitable for industrial applications. For these reasons, crude cultures containing cellulosic biomass degrading microorganisms were isolated from rice field soil, cow farm soil and rotten rice straw from cow farm. Carboxymethyl cellulose (CMC), xylan and Avicel (microcrystalline cellulose) degradation zone of clearance on agar platefrom rice field soil resulted approximately at 25 mm, 24 mm and 22 mm respectively. As for cow farm soil, CMC, xylan and Avicel degradation clearancezone on agar plate resulted around at 24mm, 23mm and 21 mm respectively. Rotten rice straw from cow farm also resulted for CMC, xylan and Avicel degradation zone almost at 24 mm, 23 mm and 22 mm respectively. The objective of this study is to isolatebiomass degrading microbial strains having good efficiency in cellulose hydrolysis and observed the effects of different substrates (CMC, xylan and Avicel) on the production of cellulase enzymes (endo-glucanase, exo-glucanase, cellobiase, xylanase and avicelase) for producing low cost biofuel from cellulosic materials.
Cecen, Emre;Altun, Zekiye;Ercetin, Pinar;Aktas, Safiye;Olgun, Nur
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권21호
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pp.9445-9451
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2014
Neuroblastoma is the most common extracranial solid tumor in children. Approximately half of the affected patients are diagnosed with high-risk poor prognosis disease, and novel therapies are needed. Sanguinarine is a benzophenanthridine alkaloid which has anti-microbial, anti-oxidant and anti-inflammatory properties. The aim of this study is whether sanguinarine has in vitro apoptotic effects and which apoptotic genes might be affected in the human neuroblastoma cell lines SH-SY5Y (N-myc negative), Kelly (N-myc positive, ALK positive), and SK-N-BE(2). Cell viability was analysed with WST-1 and apoptotic cell death rates were determined using TUNEL. After RNA isolation and cDNA conversion, expression of 84 custom array genes of apoptosis was determined. Sanguinarine caused cell death in a dose dependent manner in all neuroblastoma cell lines except SK-N-BE(2) with rates of 18% in SH-SY5Y and 21% in Kelly human neuroblastoma cells. Cisplatin caused similar apoptotic cell death rates of 16% in SH-SY5Y and 23% in Kelly cells and sanguinarine-cisplatin combinations caused the same rates (18% and 20%). Sanguinarine treatment did not affect apoptototic gene expression but decreased levels of anti-apoptotic genes NOL3 and BCL2L2 in SH-SY5Y cells. Caspase and TNF related gene expression was affected by the sanguinarine-cisplatin combination in SH-SY5Y cells. The expression of regulation of apoptotic genes were increased with sanguinarine treatment in Kelly cells. From these results, we conclude that sanguinarine is a candidate agent against neuroblastoma.
미생물셀룰로오스의 생산성을 높이기 위하여 원심(centrifugal) 임펠러와 경사원심(inclined centrifugal) 임펠러가 사용되었다. 발효조 내의 유체흐름 형태와 부피산소전달 계수가 고찰되었으며 원심 임펠러 및 경사원심 임펠러가 장착된 발효조 내에서 G. hansenii PJK 균주에 의하여 미생물 셀룰로오스가 생산되었다. 유체는 발효조 하부에서 원심 임펠러의 실린더 내부를 통과하여 발효조 벽면을 향해 순환되었다. 임펠러의 회전속도 100 rpm에서 부피산소전달계수는 터바인 임펠러 계에 비하여 경사원심 임펠러의 경우는 23%, 원심 임펠러의 경우는 15%에 불과하였다. 하지만 미생물셀룰로오스 생산 불능 돌연변이주로의 전환이 방지되어 20 rpm의 경사원심 임펠러의 회전속도에서 미생물셀룰로오스의 생산량이 터바인임펠러의 최적회전속도 300 rpm에서의 미생물셀룰로오스 생산량과 같았다.
In order to increase protease stability of a novel Trp-rich model antimicrobial peptide, $K_6L_2W_3$ (KLWKKWKKWLK-$NH_2$)and investigate the effect of L-amino acid to peptoid residue conversion on biological functions, we synthesized its antimicrobial peptoid, $k_6l_2w_3$. Peptoid $k_6l_2w_3$ had similar bacterial selectivity compared to peptide $k_66L_2W_3$. The bactericidal rate of $k_6l_2w_3$ was somewhat slower than that of $K_6L_2W_3$. Peptoid $k_6l_2w_3$ exhibited very little dye leakage from bacterial outer-membrane mimicking PE/PG liposomes, as observed in $K_6L_2W_3$, indicating that the major target site of $K_6L_2W_3$ and $k_6l_2w_3$ may be not the cell membrane but the cytoplasm of bacteria. Trypsin treatment of $K_6L_2W_3$ completely abolished antimicrobial activities against Escherichia coli and Staphylococcus aureus. In contrast, the antimicrobial activity of $k_6l_2w_3$ was completely preserved after trypsin treatment. Taken together, our results suggested that antimicrobial peptoid $k_6l_2w_3$ can potentially serves as a promising therapeutic agent for the treatment of microbial infection.
To evaluate the indoor air quality of food manufacturing plants, the presence of viable bacteria and fungi was assessed in the indoor air of the facilities at which 9 food items were manufactured. Air samples were collected from the general zone, low clean zone and clean zone of each factory with an air sampler, in combination with plate counts agar using for bacteria, and dichloran-glycerol agar for fungi. The samples were incubated at $25^{\circ}C$ for 4 to 7 days. After culture, the colony forming units (CFU) on each plate were counted and corrected with a positive hole conversion table. The average concentration of bacteria was $2.2{\times}10^3\;CFU/m^3$ in the general zone, $1.2{\times}10^3\;CFU/m^3$ in the low clean zone and $7.3{\times}10^2\;CFU/m^3$ in the clean zone. The average concentration of fungal microbes was $2.5{\times}10^3\;CFU/m^3$ in the general zone, $2.6{\times}10^3\;CFU/m^3$ in the low clean zone, and $2.0{\times}10^2\;CFU/m^3$ in the clean zone. No meaningful differences were detected between the general zone and the low clean zone, but the clean zone had significantly lower concentrations than the other zones. Additionally, the identification of the fungi was performed according to morphological method using a giant culture and slide culture. The fungi were identified as belonging to 18 genera, and the genera Cladosporium(33%), Penicillium(29%) and Aspergillus(26%), predominated. Aspergillus isolates were identified to species level, and A. ochraceus, a mycotoxigenic species, was identified. As part of the effort to control the quality of the indoor air of food manufacturing plants, our results show that continued studies are clearly warranted.
An experiment was carried out to assess the effects of xylanase supplementation on the performance, net energy and gut microflora of broilers fed a wheat-based diet. Day-old male broiler chicks were allocated to two dietary treatments. Each treatment was composed of six replicate cages of seven broilers per cage. The diets were wheat-based and offered as mash. The treatments included i) basal diet deficient in metabolizable energy; and ii) basal diet supplemented with a commercial xylanase added at 4,000 U/kg feed. Bird performance, nutrient utilization and gut microbial populations were measured. Heat production and net energy were determined using an auto-control, open circuit respiration calorimetry apparatus. Results showed that exogenous xylanase supplementation improved feed conversion efficiency (p<0.05) and increased diet AME (+4.2%; p<0.05), as well as heat production (HP), net energy for production (NEp), production of $CO_2$, and consumption of $O_2$. The respiratory quotient (RQ) was also increased (p<0.01) by the addition of xylanase. NEp value was increased by 26.1% while daily heat production per kg metabolizable body weight was decreased by 26.2% when the xylanase was added. Xylanase supplementation numerically increased the ileal digestibility of protein and energy by 3 and 6 percentage units respectively (p>0.05). The ileal digestibility of hemicellulose was significantly improved by xylanase addition (p<0.05).
Objective: This study assessed the effects of probiotics on cecal microbiota, gene expression of intestinal tight junction proteins, and immune response in the cecal tonsil of broiler chickens challenged with Salmonella enterica subsp. enterica. Methods: One-day-old broiler chickens (n = 240) were randomly allocated to four treatments: negative control (Cont), multi-strain probiotic-treated group (Pro), Salmonella-infected group (Sal), and multi-strain probiotic-treated and Salmonella-infected group (ProSal). All chickens except those in the Cont and Pro groups were gavaged with 1×108 cfu/mL of S. enterica subsp. enterica 4 days after hatching. Results: Our results indicated that body weight, weight gain, and feed conversion ratio of birds were significantly reduced (p<0.05) by Salmonella challenge. Chickens challenged with Salmonella decreased cecal microbial diversity. Chickens in the Sal group exhibited abundant Proteobacteria than those in the Cont, Pro, and ProSal groups. Salmonella infection downregulated gene expression of Occludin, zonula occludens-1 (ZO1), and Mucin 2 in the jejunum and Occludin and Claudin in the ileum. Moreover, the Sal group increased gene expression of interferon-γ (IFN-γ), interleukin-6 (IL-6), IL-1β, and lipopolysaccharide-induced tumor necrosis factor-alpha factor (LITAF) and reduced levels of transforming growth factor-β4 and IL-10 compared with the other groups (p<0.05). However, chickens receiving probiotic diets increased Lactobacillaceae abundance and reduced Enterobacteriaceae abundance in the ceca. Moreover, supplementation with probiotics increased the mRNA expression of Occludin, ZO1, and Mucin 2 in the ileum (p<0.05). In addition, probiotic supplementation downregulated the mRNA levels of IFN-γ (p<0.05) and LITAF (p = 0.075) and upregulated IL-10 (p = 0.084) expression in the cecal tonsil. Conclusion: The administration of multi-strain probiotics modulated intestinal microbiota, gene expression of tight junction proteins, and immunomodulatory activity in broiler chickens.
Microbial oxidoreductive systems have been widely used in asymmetric syntheses of optically active alcohols. However, when reused in multi-batch reaction, the catalytic efficiency and sustainability of non-growing cells usually decreased because of continuous consumption of required cofactors during the reaction process. A novel method for NADPH regeneration in cells was proposed by using pentose metabolism in microorganisms. Addition of D-xylose, L-arabinose, or D-ribose to the reaction significantly improved the conversion efficiency of deracemization of racemic 1-phenyl-1,2-ethanediol to (S)-isomer by Candida parapsilosis cells already used once, which afforded the product with high optical purity over 97%e.e. in high yield over 85% under an increased substrate concentration of 15 g/l. Compared with reactions without xylose, xylose added to multi-batch reactions had no influence on the activity of the enzyme catalyzing the key step in deracemization, but performed a promoting effect on the recovery of the metabolic activity of the non-growing cells with its consumption in each batch. The detection of activities of xylose reductase and xylitol dehydrogenase from cell-free extract of C. parapsilosis made xylose metabolism feasible in cells, and the depression of the pentose phosphate pathway inhibitor to this reaction further indicated that xylose facilitated the NADPH-required deracemization through the pentose phosphate pathway in C. parapsilosis. moreover, by investigating the cofactor pool, the xylose addition in reaction batches giving more NADPH, compared with those without xylose, suggested that the higher catalytic efficiency and sustainability of C. parapsilosis non-growing cells had resulted from xylose metabolism recycling NADPH for the deracemization.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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