• 한국수산과학회지
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• 제54권5호
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• pp.652-659
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• 2021

Microorganism-derived compounds, such as peptidoglycan, lipoteichoic acid, and β-glucan were supplemented in the scuticociliate Miamiensis avidus (M. avidus) vaccine to verify the specify component contribution to the adjuvant effect. Vaccine was formulated with the inactivated M. avidus antigen (YS2, 4.44×10⁵ cells/fish) in combination with either peptidoglycan (10 ㎍ and 100 ㎍/fish), lipoteichoic acid (5 ㎍ and 50 ㎍/fish), or β-glucan (10 ㎍ and 100 ㎍/fish). Olive flounder injected with peptidoglycan supplemented vaccine (10 ㎍ and 100 ㎍/fish) exhibited significant protection, and the relative percent survival (RPS) was 55% and 65% at 4 weeks post vaccination (wpv), respectively, at the corresponding doses. The vaccine groups with added lipoteichoic acid (5 ㎍ and 50 ㎍/fish) exhibited RPS of 40% and 5%, respectively. Additionally, the group with added β-glucan (100 ㎍/fish) exhibited RPS of 35%, but no effect was observed in the group with added 10 ㎍/fish β-glucan. At 8 wpv, olive flounder injected with peptidoglycan and lipoteichoic acid supplemented vaccines exhibited protection with RPS range of 11/11% and 5/21%, respectively, at the respective doses. M. avidus vaccine containing 10 ㎍ and 100 ㎍/fish of β-glucan exhibited the RPS of 32% and 37%, respectively. Conclusively, peptidoglycan contributed in high protection of the M. avidus vaccine, and thus, it can be used as an effective adjuvant in the M. avidus vaccine.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제26권10호
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• pp.605-616
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• 2023

Scuticociliatosis, caused by the parasitic pathogen Miamiensis avidus, poses a significant threat to olive flounder farms in South Korea. Infected fish suffer from severe systemic infections affecting various organs, with potential secondary bacterial diseases. This study investigated the emergence of different M. avidus serotypes in 20 olive flounder farms on Jeju island, South Korea, from 2015 to 2020. Additionally, we identified Tenacibaculum maritimum as a co-infecting bacteria. Based on serotyping and monitoring data, we developed a trivalent vaccine targeting two serotypes of M. avidus and one strain of T. maritimum. The efficacy of the vaccine was evaluated under laboratory conditions and demonstrated a relative percentage of survival (RPS) of 75%, 80%, and 93% for M. avidus serotype I, M. avidus serotype II and T. maritimum, respectively. Furthermore, successful field trials conducted on four different olive flounder farms resulted in significantly higher survival rates (52%-76% RPS) and weight gains in vaccinated fish. Overall, this study presents an effective vaccine against M. avidus and T. maritimum infections in farmed olive flounder, making a valuable contribution to sustainable aquaculture in South Korea.

• 한국어병학회지
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• 제28권3호
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• pp.171-174
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• 2015

Previously, we had reported that some Miamiensis avidus, a major pathogen of scuticociliatosis in cultured olive flounder, strongly agglutinated by flounder immune sera could escape from the agglutinated mass within a few hours. In the present study, we observed that M. avidus not only escaped from the agglutinated mass but also conducted division(s) before shedding its old covering. Furthermore, ciliates that survived the antibody-dependent complement killing (ADCK) assay were not killed even when re-exposed to a freshly prepared ADCK assay. This result suggests that the liberated ciliates from the ADCK assay might change not only their i-antigen types but also the epitopes of major surface antigens, which debilitate antibody-mediated complement killing ability.

• 한국어병학회지
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• 제31권2호
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• pp.109-113
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• 2018

The purpose of the present study was to determine whether the scuticocidal activity of olive flounder (Paralichthys olivaceus) head-kidney leucocytes can be enhanced by stimulation with polyinosine-polycytosine [poly (I:C)]. The growth of Miamiensis avidus was not affected by exposure to unstimulated or poly (I:C)-stimulated leucocytes alone, heat-inactivated immune serum alone, or unstimulated leucocytes plus heat-inactivated immune serum. However, leucocytes stimulated with poly (I:C) showed clearly high scuticocidal activity against M. avidus in the presence of heat-inactivated immune serum. Furthermore, numerous poly (I:C)-stimulated leucocytes occupied the surface of scuticociliates in the presence of the heat-inactivated immune serum, which led to lysis of scuticociliates. These results suggest that both of the stimulation of leukocytes and the immobilization of scuticociliates are necessary to kill scuticociliates by leukocytes.

• 한국어병학회지
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• 제31권1호
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• pp.15-21
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• 2018

Differences in in vivo virulence and in sensitivity to drugs among different isolates of Miamiensis avidus were analyzed. The isolate III showed the highest resistance against the scuticocidal activity of olive flounder (Paralichthys olivaceus) serum, and induced the highest mortalities of olive flounder fingerlings. The isolate II showed significantly higher serum resistance than the isolate I, but in vivo virulence of isolate II was not significantly different from that of isolate I. The secreted proteinases activity of isolate III was significantly higher than that of isolate I and II, and the activity was significantly reduced by the addition of E-64, a cysteine proteinases inhibitor. There were no differences among isolates in the sensitivity to doxycycline, however, there were significant differences in sensitivities to mebendazole and bithionol. These results suggest that the different characteristics of different M. avidus isolates should be taken into consideration for the development of control measures against scuticociliatosis.

• 한국어병학회지
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• 제22권2호
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• pp.97-105
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• 2009

본 연구는 양식넙치에 높은 폐사율과 성장저하를 일으키는 스쿠티카섬모충 Miamiensis avidus (syn. Philasterides dicentrarchi)의 성장과 병원성에 미치는 온도의 영향을 알아보았다. in vitro 배양조건에서 이분열에 걸리는 시간은 $5{^{\circ}C}$에서 61.82시간, $10{^{\circ}C}$에서 26.32시간, $15{^{\circ}C}$에서 21.14시간, $20{^{\circ}C}$에서 16.86시간 그리고 25℃에서 는 16.21시간이었다. 최고로 배양 가능한 충수는 $1.54-1.75{\times}10^{5}$/ ml의 범위로 $10{^{\circ}C}$이상의 모든 온도범위에서 유사했다. 넙치(평균 8.34 cm, 4.33g)마리당 $1{\times}10^{2}$/ ul, $1{\times}10^{6}$/ ul, $1{\times}10^{4}$/ ul 과 $1{\times}10^{5}$/ ul 으로 스쿠티카충을 복강에 감염시킨 후 $10{^{\circ}C}$, $15{^{\circ}C}$와 $20{^{\circ}C}$에서 사육하면서 폐사를 관찰하는 실험을 2회 실시한 결과, 수온 $10{^{\circ}C}$에서는 폐사가 현저히 낮았고 온도가 높아질수록 폐사가 증가하였다. 또한 감염농도가 높아질수록 폐사는 증가하였다. 그러므로 스쿠티카섬모충 M. avidus는 온도가 높을수록 증식이 잘 되며 또한 수온이 높아질수록 온도의존적으로 폐사가 증가하므로 폐사를 경감시키기 위해서는 고수온기의 수온관리가 중요한 것으로 사료된다.

• 한국어병학회지
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• 제36권2호
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• pp.311-321
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• 2023

Miamensis avidus에 대한 alginate Microsphere (Alginate MS) 경구백신의 넙치에 대한 효능을 침지와 주사경로의 공격감염으로 확인하였다. Trial 1에서는 불활화 M. avidus (IMa)와 IMa를 alginate로 코팅한 IMa+Alginate MS 를 사료와 혼합하였으며 총 5일 동안 3.75 × 10⁶ cells/fish의 농도로 먹였다. 경구백신 투여 5주 후 침지로 공격감염했을 때, IMa+Alginate MS 그룹의 상대생존율 (RPS)은 50% (50% 해수 침지감염)와 37.5% (100% 해수 침지감염)였다. IMa 단독투여 그룹은 낮은 생존율을 보였다. Trial 2에서는 항원을 2.38 × 10⁶ cells/fish의 농도로 5일간 나누어 먹였다. 경구백신 투여 2주 후에는 복강주사로 효능을 평가하였고, IMa+Alginate MS 투여구의 상대생존율은 30.8%였으며 IMa 단독투여 그룹은 백신의 투여효과가 전혀 없었다. 경구백신 투여 종료 5주 후 50% 해수에서 침지감염으로 공격감염 한 경우 IMa+Alginate MS 투여구의 상대생존율은 42.9%, IMa 단독투여 그룹의 상대생존율은 14.3%를 기록하였다. 본 연구의 결과는 Alginate로 M. avidus항원을 코팅함으로써 M. avidus항원을 단독으로 투여하는 것보다 넙치에 높은 방어력을 제공할 수 있음을 나타낸다.

• 한국어병학회지
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• 제19권2호
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• pp.173-181
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• 2006

Miamiensis avidus는 넙치에 폐사를 일으키는 스쿠티카 섬모충이다. M. avidus에 대한 넙치의 면역반응을 측정하기 위하여 FKC (formalin killed cell)를 마리당 2.6 × 106 cells을 복강주사하고, FKC를 초음파처리한 것을 2.4 × 106 cells/㎖로 14.9 cm (26.8 g)의 넙치에 2주 간격으로 두 번 면역하였다. 면역한 넙치의 항체는 충체의 운동성둔화 (immobilization)와 응집 (agglutination)을 유발하였다. 면역한 그룹은 면역하지 않은 그룹보다 높은 ELISA항체가를 나타내었다. 또한, 복강주사로 면역한 넙치에서 유의적으로 높은 phagocytic ratio, phagocytic index와 주화활성을 나타내었다. FKC의 면역방어효과를 검증하기 위하여 8.6 cm (6.3 g)의 넙치에 마리당 1.43 × 105 cells을 복강주사면역하고 2.2 ×105 cells/㎖의 농도로 침지면역했다. 2주 간격으로 두 번 면역하고 2.0 × 104과 2.0 × 103 cells/㎖ 농도로 침지 공격 감염시킨 후 폐사율을 관찰하였다. 감염시킨 3주 후 폐사율은 복강주사구에서 감소하였고 침지면역구는 폐사가 지연되었다. 위의 결과로부터 M. avidus의 불활화백신을 넙치에 면역하면 충에 대한 특이면역이 증강되며 증강된 면역반응이 방어력을 제공했을 것으로 생각되었다.

• 한국어병학회지
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• 제26권2호
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• pp.65-75
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• 2013

실험실에서 온도 별로 스쿠티카충을 배양한 데이터(Table 1)를 사용 스쿠티카충 개체군의 변화율(1.2)과 성장 방정식(1.3)을 in vitro 조건에서 구했다. 이 모델에서는 스쿠티카충의 증가모델 식은 로지스틱 증가함수로 두 가지 온도에서의 스쿠티카충의 증가율 매개변수를 구하였고, 기생충으로 인한 숙주인 넙치에 치명적일 수 있는 기생충의 임계밀도를 구하였다. 또 다른 데이터는 같은 온도에서 스쿠티카충 수를 다양하게 넙치의 복강에 주사하는 그룹과 동일한 스쿠티카충 수를 복강에 주사한 후 온도를 다르게 한 두 그룹의 스쿠티카충의 감염으로 폐사한 실험데이터(Table 2)에 근거하여 넙치의 감염에서 폐사가 되는 시스템 식(1.5)을 세웠다. 정리에서는 감염된 넙치와 폐사된 넙치의 미분방정식계는 감염넙치와 폐사 넙치와의 평형점을 찾고 그 평형점에 대한 안정성과 불안정성을 설명하였다. 각 온도에서의 매개변수를 사용하면 방정식 (1.6)은 시간에 대해 넙치의 누적 폐사량을 알 수 있는 방정식이다. 이 논문에서는 다양한 초기값 $P_0$값에 따른 넙치의 폐사를 중심으로 보았으므로 온도와 $P_0$가 동시에 넙치폐사에 어떠한 관계를 갖는 연구를 하기에는 제약을 갖고 있다. 이 연구의 제한점에서 언급했듯 실험을 여러 번 시행한 것이 아니기 때문에 단지 근사적인 값으로 이해를 해야 한다. 또한 넙치의 면역력을 알 수 있다면 기생충으로부터 저항력을 연구하는데 오차를 좀 더 줄인 근사치를 구할 수 있을 것을 기대할 수 있을 것이다.

• 한국어병학회지
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• 제35권1호
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• pp.113-120
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• 2022

Scuticociliatosis caused by Miamiensis avidus is a very important parasitic disease in olive flounder farming industry. The aim of this study was to determine effect of combined treatment with blue LED (light-emitting diode) illumination and formalin on olive flounder (Paralichthys olivaceus) infected with M. avidus. Different intensity of 405 nm LED (20, 40, and 60 μmol·m^-2·s^-1) was illuminated on 2.2×10⁴ cells/well of M. avidus in a 24 well microplate for 24 h. Also, 2.4×10⁴ cells/well of M. avidus were exposed to varying combinations of 60 μmol·m^-2·s^-1 of 405 nm LED and serial 10-fold dilutions of formalin (from 10 to 100 ppm) for 15, 30, 45, and 60 min. Surviving M. avidus were counted using a hemocytometer. For in vivo test, flounder acclimatized at 11-12 practical salinity unit (psu) were challenged with 2×10⁶ cells/ml of M. avidus by immersion method for 1 h. Then, fish were moved and divided into four groups; "F" group, treated with formalin at 50 ppm; "L" group, treated with 60 μmol·m^-2·s^-1 of 405 nm LED; "C" group, treated with combination of the two methods; and the control group. After treatment for 30 min, fish were transferred to new tanks (salinity = 11-12 psu) and observed for 3 weeks. As a result, illumination of 405 nm LED at 60 μmol·m^-2·s^-1 killed 100% of M. avidus after 12 h, while 67% and 90% of the scuticociliate died at 20 and 40 μmol·m^-2·s^-1, respectively, after 24 h exposure. One hundred percent of M. avidus was killed at 90, 80, 80 and 70 ppm after exposure to formalin for 15, 30, 45 and 60 min, respectively. However, combined method (e.g., 60 μmol·m^-2·s^-1 of 405 nm-LED plus 50 ppm formalin) killed the parasite within 30 min. From in vivo test, similarly, survival rates of fish challenged with M. avidus were 100%, 43%, 29% and 0% in the C, F, L, and control groups, respectively. Results obtained in this study demonstrates that the combined treatment method has clear synergistic effect on scuticociliatosis in fish.