The task for chromosome analysis and diagnosis by experienced cytogenetists are being concerned as repetitive, time consuming job and expensive. For that reason, intelligent agent based on chromosome knowledge base has been established to be able to analyze chromosomes and obtain necessary advises from the knowledge base instead of human experts. That is to say, knowledge base by IF THEN production rule was implemented to a knowledge domain with normal and abnormal chromosomes, and then the inference results by knowledge base could enter the inference data into the database. Experimental data were composed of normal chromosomes of 2,736 patients 'cases and abnormal chromosomes of 259 patients' cases that have been obtained from GTG-banding metaphase peripheral blood and amniotic fluid samples. The completed intelligent agent for chromosome knowledge base provides variously morphological information by analysis of normal or abnormal chromosomes and it also has the advantage of being able to consult with user on chromosome analysis and diagnosis.
Proceedings of the Korea Inteligent Information System Society Conference
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2001.06a
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pp.215-222
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2001
The task for chromosome analysis and diagnosis by experienced cytogenetists are being concerned as repetitive, time consuming job and expensive. FOr that reason, chromosome analysis system based on knowledge base for CAI had been established to be able to analyze chromosomes and obtain necessary advises from the knowledge base instead of human experts. That s to say, knowledge base by IF THEN production rule was implemented to a knowledge domain with normal and abnormal chromosomes, and then the inference results by knowledge base could enter the inference data into the database. Experimental data were composed of normal chromosome of 2,736 patients'cases and abnormal chromosomes of 259 patients'cases that have been obtained from GTG-banding metaphase peripheral blood and amniotic fluid samples. The complete system provides variously morphological information by analysis of normal or abnormal chromosomes and it also has the advantage of being able to consult with user on chromosome analysis and diagnosis.
The ability of oocytes to undergo normal fertilization and embryo development is acquired during oocyte maturation which is transition from the germinal vesicle stage (GV), germinal vesicle breakdown (GVBD) to metaphase of meiosis II (MII). Part of this process includes redistribution of inositol 1, 4, 5-triphosphate receptor (IP3R), a predominant $Ca^{2+}$ channel on the endoplasmic reticulum membrane. Type 1 IP3R (IP3R1) is expressed in mouse oocytes dominantly. At GV stage, IP3R1 are arranged as a network throughout the cytoplasm with minute accumulation around the nucleus. At MII stage, IP3R1 diffuses to the entire cytoplasm in a more reticular manner, and obvious clusters of IP3R1 are observed at the cortex of the egg. This structural reorganization provides acquisition of $[Ca^{2+}]_i$ oscillatory activity during fertilization. In this review, general properties of IP3R1 in somatic cells and mammalian oocyte are introduced.
Purpose: Radiation-induced chromosomal damage and apoptosis were compared in human lymphocytes. Materials and Methods: Peripheral lymphocytes from 10 normal volunteers (6 males, 4 females, age range $23{\sim}41$ years) were irradiated by gamma rays from a cell irradiator. Doses of irradiation were 0 (control), 0.18, 2, 5, 10, 20 and 25 Gy. Irradiated lymphocytes were examined by metaphase analysis for chromosomal aberrations and by flow cytometry for apoptosis. Results of both studies were compared according to dose. Results: Number of dicentric and ring chromosomes (D+R) was $0.5{\pm}0.53$ at baseline, which was significantly increased after radiation according to the dose. The fraction of cells showing annexin V-fluorescein isothiocyanate uptake was $0.51{\pm}$0.39%, which increased to $3.58{\pm}1.85%$ by 2 Gy irradiation, and then decreased. The fraction of cells showing propidium iodide (PI) uptake was $0.52{\pm}0.12%$, which significantly increased according to dose (upto $15.64{\pm}5.99%$ by 20 Gy irradiation). D+R and PI uptake were well correlated (r=0.84, p<0.001). Conclusion: Radiation-induced chromosomal aberration was correlated to nuclear uptake of PI, a marker of late apoptosis.
Choi S. H.;Han M. H.;Cho S. R.;Kim H. J.;Choe C. Y.;Son D. S.;Kim Y. K.;Lee M. H.;Jeoung Y. G.;Chung Y. H.
Journal of Embryo Transfer
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v.20
no.3
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pp.303-309
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2005
This study was conducted to examine the effects of OA on metaphase of meiosis II and the mitochondrial activity of cytoplasm in bovine cumulus oocytes complexes(COCs) during in vitro maturation. Hanwoo COCs were collected from the slaughterhouse cow ovaries and matured in TCM199 supplemented with $0.1\%$ PVA, 0.2 uM, 2 uM, 20 uM OA for the maturation rate of OA concentration. For the maturation effects between OA and cycloheximide(CX), COCs were matured in TCM199 with 25 ug/mL CX, 25 ug/mL CX (6 hrs culture) plus 2 uM OA or 2 uM OA only at a atmosphere $5\%\;CO_2,\;95\%$ air $39^{\circ}C$ for 6, 12, 24 hrs. To evaluate the nuclear types of matured COCs, cumulus cells were removedby $0.5\%$ hyaluronidase sol. and oocytes were fixed in 1:3 acetic acid ethyl alcohol for 30 sec. and then stained with $0.1\%$ basic Fuchsin sol. For the detection of fluoriscent intensity (FI) of matures oocytes, cumulus cells were removed same as performed above and were stained with 20 nM mite tracker for 20 min. at $39^{\circ}C$. Mitochondrial activity of FI in matured oocytes was imaged by laser conforcal microscopy (Fluoview, Olympus, Japan) and were measured scanned face on 5 um from median to endpoint of oocytes. Statical analysis of nuclear types observed the three replicates was carried out with ANOVA and Fisher's protected least significant difference test using the STATVIEW program. FI of matures oocytes was compared the multiples of the least intensity among the measured oocytes. Maturing in TCM199 supplemented with $0.1\%$ PVA, 0.2 uM, 2 uM, 20 uM OA, metaphase B were showed 72.0, 50.0, 70.0, $68.8\%$, respectively and there were different significant(p<0.05). In the case of treatment with OA and CX, metaphase were $73.8\%,\;8.2\%,\;45.5\%,\;73.7\%$ in $0.1\%$ PVA-TCM199, 25 ug/mL CX, 25 ug/mL CX plus OA or 2uM OA only, respeclively. FI was revealed the increasing tendency during the process of maturation. Whereas FI in CX was decreased about 3 times compared to the other treatments of 6 hrs maturation. We conclude that OA regulates bovine COCs maturation and induces the mitochondrial activity during the process of maturation.
The objective of this study was carried out to examine the polar body extrusion of in vitro matured porcine follicular oocytes as a non-invasive marker of oocyte quality to know the developmental competence in advance. The porcine oocytes matured for 48 hours were examined the polar body extrusion and some parts were stained. The examined oocytes were matured for additional $16{\sim}18$ hours and activated with 7% ethanol and cultured in $5{\mu}g/ml$ cytochalasin B for 5 hours for diploid formation. The treated oocytes were washed and cultured for 7 days. The polar body extrusion and degeneration rates were varied with $9.9{\sim}52.4%$ and $21.4{\sim}61.8%$ by repetition. The polar body extruded oocytes were shown the polar body chromosome and metaphase II plate by staining. However the non-extruded oocytes were shown expanded nucleus with 39.1%, premature chromosome condensation with 19.6%, metaphase I plate with 10.9 %, metaphase II with 13%, condensed chromatin with 6.5%, and absent nuclear material with 8.7%. The oocytes that were not examined for the polar body extrusion were cleaved 45.0%, and developed to blastocyst stage with 11.3%. In examined oocytes for polar body extrusion,. the polar body extruded oocytes were cleaved 94.2% and developed with 42.5%. This result suggests that discarding of the degenerating oocytes and oocytes that not extruded polar body will be effective for experiments of culturing effect in porcine embryos and embryo biotechnology.
Radiation protection by post-irradiation injection of the ginseng extract in mice was studied. Male ICR mice, 7 weeks old, were orally injected with ginseng extrat(100mg/kg) for 10 days, and with physiologocal saline as the control. Immediately after final injection, mice were whole body irradiated with 5.08Gy(Cs-137 ${\gamma}$-ray, central dose rate : 654Gy/h) which induced Bone marrow death. At 24h after irradiation, micronucleus test and metaphase analysis in bone-marrow were carried, blood cell were counted and the survival rate were carried for 30 days after the irradiation. Stimulated recovery by the extract was observed in thrombocyte count, but that phenomenom was not showed in the erythrocyte and leucocyte counts. The 30-day survival ratio was 5% and 65% for the control and experimental group. Frequencies of micronuclei per 1000 polychromatic erythrocytes were 79.5${\pm}$1.5 in experimental group, 185.9${\pm}$35.8 in control. And Abnormal chromosomes per 50 metaphases were 112 in experimental group and 143 in control.
These experiments were conducted to investigate the optimal maturation stage for cryopreservation of porcine oocyte when the oocytes were frozen-thawed and/or exposed in cryoprotect ant at immature, maturing and mature stages. The results of this research are as follows ; 1. When the oocytes matured for 0, 24 and 44h were exposed in media containing cryoprotectants or without in vitro, the rates of cultured oocytes developed to metaphase II were 44.0, 45.0, 50.3 or 55.0%, respectively. 2. When the oocytes matured for 0, 24 and 44h were exposed in media containing cryoprotectants or without in vitro, the cleavage rates of cultured oocytes were 18.6, 19.7, 47.6 or 50.9%, respectively. 3. When the oocytes matured for 0, 24 and 44h were frozen and thawed using vitrification or not in vitro, the rates of cultured oocytes developed to metaphase II were 4.3, 7.1, 46.7 or 62.4%, respectively. 4. When the oocytes matured for 0, 24 and 44h were frozen and thawed using vitrification or not in vitro, the cleavage rates of cultured oocytes were 2.5, 2.4, 10.2 or 49.6%, respectively.
The effects of varying concentrations and durations of ethalfluralin (N-ethyl-N-(2-methyl-2-propenyl)-2, 6-dinitro-4-(trifluoromethyl) bezenmine) treated on oat(Avena sativa L.) cell division, cell enlargement, protein synthesis and histology were studied. After 6hr treatment, all concentrations(1${\times}$10^{-6}M to $1{\times}10^{-3}$) of ethalfluralin arrested completely metaphase in the cell division study. The oat coleoptile inhibition of straight-growth test were used to determine the influence of ethalfluralin on coleoptile growth. A range of all concentrations($1{\times}10^{-8}$M to $1{\times}10^{-3}$M) treatment did affect cell enlagement significantly. The $1{\times}10^{-6}$M to $1{\times}10^{-3}$ M concentrations reduced approximately over 50% cell enlargement. Protein incorporation study showed that all concentrations($1{\times}10^{-6}$M to $1{\times}10^{-3}$M) were not affected in protein synthesis. To investigate histological effects, the oats were treated for 24hr with $1{\times}10^{-7}$M. The longitudinal section cells, in the treated oat root tips were appeared to be enlarged and also showed lacking cytoplasm, multinucleate or abnormal cells compare with untreated roots.
The research of fused oocytes was conducted to investigate the in vitro mejotic maturation of immature oocytes (GV oocytes) fused with oocytes in germinal vesicle breakdown (GVBD oocytes) in the presence of dbcAMP which is known as one of the strong inhibitors to GVBD. The immature oocytes fused together as well as those fused with GVBD oocytes proceeded to GVBD in 3 hr culture in plain medium. But in the medium containing dbcAMP (100$\mu$g/ml), the immature oocytes fused together did not show any GVBD and thus the fusion itself could not affect the inhibitory activity of dbcAMP. However, all of the immature oocytes fused with GVBD oocytes underwent GVBD in 3 hr culture despite of the presence of dbcAMP. When the culture was extended to 20 hr, nearly all of the immature oocytes fused together were still arrested at the GV stage in the presence of dbcAMP. But most of the fused oocytes which had shown GVBD during 3 hr culture developed to metaphase II stage extruding one or two polar bodies regardless of the presence of dbcAMP. In this experiment, it was found that two sets of the metaphase chromosomes were somewhat concomitant with a pair of the polar bodies in the fused egg. Upon the results of the present studies, it is assumed that there may be a maturation promoting factor(s) in the cytoplasm of the GVBD occytes, and this factor(s) possibly nullifies the function of dbcAMP.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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