In order to clarify effects of phytohormones on the viability and the cell wall regeneration of protoplasts isolated from Nicotiana tobacum L. var. BY4, protoplasts isolated from mesophyll tissue were cultured on the Murashige-Skoog liquid media supplemented with auxin(2, 4-D, NAA, IAA) and/or cytokinin (kinetin, BAP, 2ip). Viability of protopplasts was higher in the culture medium containing auxin and cytokinin, especially in the combination of 2, 4-D and BAP. The effectual cell wall regeneration of protolasts was observed when theprotoplasts were cultrued on the medium supplemented with auxin alone, especially with IAA. Cell wall regernation started from 2-3 days after culture and was not detected at budding regions. When the protoplasts were cultured on the phytohormone-free medium, the viability of protoplasts dramatically decreased 4 days after culture.
Mesophyll protoplasts derived from young leaves of Nicotiana rustica and N. tabacum cv Burley 21 were fused with the aid of polyethylene glycol(PEG). Cytological examination of protoplasts after PEG treatment revealed 12.8 % heterokaryocytes. After 7 weeks culture, the hybrid calli showing greenish white with a compact appearance were selected in contrast to parental type calli tinged with white or green color. The somatic hybrid plants were verified by morphological, biochemical and cyclological analysis. A heterosis effect for plant vigor and height was observed but the shape of leaves and flower characteristics were intermediate between N. tabacum and N. rutstica. The isozyme banding patterns for peroxidase of somatic hybrid lines were compared with the parent species. A number of isozyme bands derived from both parental species were found in the hybrids. Somatic hybrid plants have been successfully backcrossed to the parental N. tabacum particularly with somatic hybrid plants as female parents. These hybrid plants yielded small seeds, only few which were germinable.
Photoassimilates translocate from regions of carbohydrate synthensis(source) to regions of carbohydrate utilization or storage(sink). In the source, assimilate loads into the phloem for long-distance transport. Current evidence suggests that there are twig loading mechanisms : one involves assimilate transfer via the apoplasm and then load into the phloem by carrier-mediated proton-sucrose cotransport, while the other involves movement through the continuous symplastic connections between the mesophyll cells and the phloem. Inspite of problems associated with the interpretation of experiments, the evidence for apoplastic loading remains convincing because the apoplastic loading systems explains well the observed accumulation capacity arid the selectivity of assimilate uptake by tile phloem.
This study was carried out to optimize the concentration of Ca2+ and pH of fusion medium which affected electrofusion frequency of protoplasts isolated from Nicotiana tabacum L. (cv. BY4) mesophyll cells and callus. The protoplasts were electrofused in the fusion media containing two different Ca2+ concentrations and three different pH regions. Fusion frequency was lower in the fusion medium containing only 13% mannitol as osmotic stabilizer. However, higher degree of fusion frequency (47.3%) was observed in the fusion medium containing 50mM CaCl2 at pH 10.5 than any other conditions. Cell viability was decreased by Ca2+ and high pH treatment in the fusion media, while fusion frequency was increased. It is concluded that Ca2+ is involved in electrofusion of protoplasts.
Lee, Sang Gyu;Lee, Hee Ju;Kim, Sung Kyeom;Choi, Chang Sun;Park, Sung Tae;Jang, Yoon Ah;Do, Kyung Ran
Horticultural Science & Technology
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v.33
no.6
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pp.820-828
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2015
This study was carried out to determine the effects of vernalization, temperature, and soil water deficit (SD) on mesophyll cells, growth, and yield of Chinese cabbage (Brassica campestris L). The palisade parenchyma and spongy tissues of Chinese cabbage were observed under full irrigation and two weeks of SD treatment. These cells were severely collapsed by four weeks SD treatment. The SD treatment had the greatest influence on the growth of Chinese cabbage among the tested treatment factors (vernalization, temperature, and SD), growth significantly decreased by severe drought treatment (four weeks SD treatment). In addition, the relative growth rate, unit leaf rate, leaf area ratio, specific leaf area, and leaf weight ratio were significantly affected by SD treatment; however, other individual factors and their combined treatments did not influence the analyzed growth parameters. The yield under vernalization after high temperature and full irrigation treatments was 3,056 kg/10 a, which was the greatest among all the tested treatments, while four-week SD treatment significantly reduced the yield. Head formation of Chinese cabbage was not altered under SD treatment, and vernalization treatments did not induce bolting. Our results indicated that collapsing mesophyll cells and reduced growth and yield were induced by SD treatment. Thus we suggest that optimal irrigation system should be install to avoid or overcome crippling drought conditions in the open field.
Nitrate nitrogen was absorbed dominantly among the inorganic nitrogen nutrients by tobacco plant. Transport and reduction of $NO_3-N$ in plant tissue were the important metabolism for supplying synthetic N compounds to developing tissues during growth period. Under field and environment-controlled condition tobacco plants were grown and seperated to leaf tissues at stalk positions for investigation of nitrogen transport and assimilation ability during period of rapid vegative growth. The results of studies were summarized as follows: 1. $NO_3-N$ absorbed from roots was transported as inorganic nitrogen through the vascular tissue of leaf veins as resulting from the high $NO_3-N$ ratio of the nitrogen content in leaf veins, but these ratios in mesophyll tissue of the same leaf laminae decreased remarkably in disregard of higher accumulation of nitrogen being compared to midvien. 2. Mesophyll tissue of mature leaves appeared higher value of nitrate reductase activity (NRA) comparing with other tissues, stem, leaf vien, and meristmatic tissue at emergence point with young leaves. 3. Matured leaves at lower position being reducing nitrate nitrogen vigorously observed thick laminae and kept high amount of water in them. 4. Mature leaves of young plant reduced $NO_3-N$ vigorously for supply synthetic N compounds to meristmatic tissues at growing point by the reason of narrow and few leaves at young stage, but in advancing growth period NRA of mature leaves along upper position reached to lower value. This appearence attributed to distribution of organic-N compound demanding for growth to increasing numbers of wide leaves.
Growth and anatomical responses of rice and barnyardgrass(Echinochloa crus-galli) to oxyfluorfen were examined under various growing conditions in a greenhouse. With foliar application at 0.08kg ai/ha 7 days after seeding or transplanting, oxyfluorfen completely reduced the shoot and root growth of barnyardgrass under all growing conditions. However, oxyfluorfen reduced the growth of direct seeded and transplanted rice by 0~64% and 0~12%, respectively. Phytotoxic effect on rice growth, with respect to plant height and shoot fresh weight, was more pronounced under water(53~63%) than under dry-condition(16~33%), and in broadcast-seeded(34~62%) than in drill-seeded rice(16~33%). Anatomical changes of epidermal and vascular bundle sheath cells of rice leaves were not induced by oxyfluorfen, but mesophyll cells were partially ruptured and total leaf thickness was reduced. Oxyfluorfen, however, constricted and ruptured mesophyll and vascular bundle sheath cells and severely reduced leaf thickness of barnyardgrass under all growing conditions examined. These anatomical changes were more severe under dry- than under water-seeded condition.
Culture condition for callus formation and plant regeneration were optimized by the selection of explants and the manipulation of hormonal combination in the culture medium. The calli induced from seed, cotyledon, hypocotyl and mesophyll segments were more vigorously proliferated under dark condition than those under continuous light condition. Hypocotyl-and cotyledon-derived calli were more regenerative as compared with those of seed and mesophyll. Callus formation from hypocotyl and cotyledonary explants was enhanced on MS medium with 1.0 mg/${\ell}$ 2, 4-D and 0.1 to 0.5 mg/${\ell}$ kinetin or BAP. The combination of 0.1 mg/${\ell}$ NAA and 2.0 to 4.0 mg/${\ell}$ kinetin was the most effective for shoot regeneration from the callus. The maximum frequency (24.0%) of shoot regeneration was obtained from the hypocotyl-derived callus transferred to MS medium supplemented with 0.1mg/${\ell}$ NAA and 4.0 mg/${\ell}$ kinetin. The capacities for callus, root and shoot formation from cotyledon and hypocotyl explants were remarkably different among cultivars of B. napus tested. The calli induced from hypocotyl produced more shoots than those from cotyledon.
Samples showing mosaic symptom of cowpea (Vigna sesquipedalis) with vein banding, chlorotic spot, vein yellow were collected from Chinju areas in Korea, Two viruses were distinguishable by stability in sap, host range, and relations with cells and tissues were examined under an electron microscope, Blackeye cowpea mosaic(BICMV) was sap-transmissible to 7 plant species in 2 families, Of the plants, only leguminous species were systemically infected. This virus was inactivated by heating at $50-65^{\circ}C$ for 10 min, by diluting at $10^{-4}-10^{-5}$, and aging at room temperature for 1-6 days. Preparations examined under the electron microscope by direct negative staining method(DN -method) always showed particles of flexuous filament bout 750nm in length and cytopasmic inclusions. Cytoplasmic inclusions and virus particles were also confirmed to present in the cytoplasm of a mesophyll cell by ultrathin sections of BICMV infected cowpea leaves. Cucumber mosaic virus (CMV) was transmitted by sap- inoculation on inoculated leaves of Chenopodium amaranticolor, C. quinoa producing local lesions, but non-inoculated upper leaves of Nicotiana glutinosa, Cucurbita pepo and Vigna sesquipedalis producting systemic mosaic symptoms. Electron microscopic examination of virus preparation by direct negative staining showed spherical particles of about 30nm in diameter. In ultrathin sections of CMV infected tissues, virus particles of crystalline array were found in the vacuole and a large number of virus particles were found in the cytoplasm and the plasmodesmata of mesophyll cells.
Samples showing yellow mosaic symptom of Lilium spp. with necrotic fleck, stunting, malformation, and colour breaking were collected from lily-growing areas in the southern part of Korea. Two viruses were distinguished under a electron microscope and their host range, serological reaction, stability in sap, type of aphid transmission, and relations with cells and tissues were examined. Broad bean wilt virus (BBWV) was transmitted by sap-inoculation to 23 plant species in 8 families and by the aphid, Myzus persicae. This virus was inactivated after 10 min at 70C, at dilution of $10^{-3}$, and after 6 days at about 20C. Electron microscopic examination of purified preparation showed that the virus is spherical particle of 28nm in diameter. The virus reacted positively with BBWV-antiserum in agar gel diffusion test. In ultrathin sections of BBWV infected tissues, large aggregates or crystalline array of virus particles and vesicular body were found in the cytoplasm, vacuole, and nucleus of mesophyll cells. Cucumber mosaic virus (CMV) was transmitted by sap-inoculation. Electron microscopic examination of its purified preparation showed spherical particles of 30nm in diameter. The virus reacted positively with CMV-Y strain-antiserum in agar gel diffusion test. In ultrathin sections of CMV infected tissues, crystalline array of virus particles were found in the vacuole and a large number 0f virus particles were found in the cytoplasm and the plasmodesmata of mesophyll cells. When each of these viruses was retransmitted to Lilium tigrinum. L. concolor, and L. auratum, BBWV induced slight symtoms and colour breaking, but CMV induced yellowing mosaic or necrotic fleck.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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