The present study was performed to identify pathogenic factors of Chlamydia trachomatis, which invade the host cell membrane. We prepared monoclonal antibody against C. trachomatis and searched for pathogenic factors using this antibody, and subsequently identified the surface components of the elementary body of C. trachomatis, i.e., major outer membrane protein (MOMP), lipopolysaccharide (LPS), and two other surface exposure proteins. These proteins are believed to be important in the pathogenesis of host cell chlamydial infection. Additionally, to identify factors related to the host cell and C. trachomatis, we prepared C. trachomatis infected and non-infected McCoy cell extracts, and reacted these with anti-chlamydial LPS monoclonal antibody. We found that anti-chlamydial LPS monoclonal antibody reacted with a 116 kDa proteinaceous McCoy cell membrane component.
Abundant amount of Chiamydia trachomatis could be amplified in mammalian McCoy cells and purified using descontinuous Uroarafin gradient centrifugation. As a chemical means io increase the Chlamydia trachomatis inclusions in McCoy cells IUdR treatment was found to be more effective than the cycloheximide treatment and was recommendanble for the proliferation of Chlamydia trachomatis. Centrifugation promoted Chlamydia trachomatis adhesion to McCoy cell surface, and maximal percentage of infected cells was obtained at about 3000g. The purified Chlamydia trachomatis could be kept in SPG solution for 48 hours at +4$^{\circ}C$ but for longer storage freezing to -7$0^{\circ}C$ was necessary.
This study was performed to evaluate and compare the cytotoxic effects of five root canal sealers to several different cell lines. Five root canal sealers were AH-26, N2, Sealapex, Tubliseal, and Vitapex. Each sealers were mixed according to the manufacturer's instructions, and culture media were added to each sealers immediately after mixing (the immediate group) and after three days (the third day group) and seven days (the seventh day group) respectively. And every sealer solutions were diluted to 1:1, 1:2, 1:3 and 1:4. Three different permanent cell lines (HEp-2, McCoy, MRC-S) and human gingival fibroblasts and mononuclear cells were challenged by each sealer solution and the cytopathic effects were evaluated using MTT-ELISA, MTT-microscopy, and lactate dehydrogenase (LD) activity. The results were as follows: 1. In HEp-2 and MRC-5 cells, Vitapex was the least cytotoxic sealers. 2. AH-26 showed mild cytotoxic effects to HEp-2, gingival fibroblast and mononuclear cells. 3. N2 was the most toxic sealer to gingival fibroblast and it showed relatively strong cytotoxicity to HEp-2, McCoy and MRC-S cells. 4. Tubliseal showed strong cytotoxic effects to HEp-2, McCoy, MRC-S, and mononuclear cells. 5. Sealapex showed strong cytotoxic effect to HEp-2, McCoy, and gingival fibroblasts.
Two functions of root canal medicaments and irrigants are to reduce microorganisms and to encourge the repair of apical tissues. The biocompatibility of endodontic materials has been tested using in vitro cell culture techniques. The purpose of this study Was to evaluate and compare the cytotoxic effects of 2 root canal irrigation solutions and 4 antiseptics on HEp-2 and McCoy cells. Two irrigation solutions were sodium hypochlorite. $H_2O_2$ and 4 antiseptics were povidone, ethanol, glutaraldehyde and benzalkonium chloride. Each solutions were serially diluted to 1:1, 1:10, 1:$10^2$, 1:$10^3$, 1:$10^4$, 1:$10^5$, 1:$10^6$. And each diluted solutions were added to the cells and cytotoxic effects were measured with the absorbance of formazan formed cells by ELISA READER. The results were as follows : 1. Benzalkonium chloride was the most cytotoxic on HEp-2 cell. (P<0.05) 2. $H_2O_2$ was the most cytotoxic on McCoy cell. (P<.05) 3. Povidone and ethanol showed mild cytotoxic effect on HEp-2 and McCoy cell. (P<0.05).
Verrucous carcinoma is a distinctive, extremely well-differentiated, slow-growing variant of the squamous cell carcinoma. Verrucous carcinoma of the oral cavity is relatively rare. McCoy reported about 49 verrucous carcinomas of the oral cavity. McCoy reported that the most common site of occurrence was the buccal mucosa, followed by the mandibular alveolar ridge and gingiva, and that The majority of the patients were between the ages of 50 and 80 years. Although most other series of oral verrucous carcinoma show a male predominence, our case occurred in female. The role of radiation therapy in treatment of oral verrucous carcinoma is controversial, and adequate surgical excision appears to be the treatment of choice. In this paper a case of verrucous carcinoma of the buccal mucosa and a review of the literature is presented.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.21
no.2
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pp.261-270
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1986
A total of 339 urethral, vaginal swab and eye discharge materials from the out-patients in the hospitals of Seoul area was microbiologically collected for the detection of Chlamydia trachomatis infection during May through August, 1985. McCoy cell culture system (MCC) and enzyme-likned immunosorbent assay (EIA) methods were employed in this study as the tools for the detection of C. trachomatis, and the detectabilities of two methods were compared. The results obtained in this study are summarized as follows: 1. The positive rate of C. trachomatis in 339 swab specimens was 18.6%, and the rate in females (20.1%) was much higher than that in males (7.1%). 2. The positive rate of C. trachomatis infection the prostitutes was the highest (24.2%), and the rate in the eye discharge specimens obtained from the new barns was 12.8%. 3. The positive rates of C. trachmoatis infection detected in the specimens from the patients with vaginitis and leucorrhea, with infertility, with cystitis and with nongonococcal urethritis were 17.2%, 21.9%. 18.0% and 7.1%, respectively. 4. The positive rate of C. trachomatis infection in 20-25 age group was 30.5%. This rate was the highest among the other age groups. 5. The positive rate of C. trachomatis infection in the randomly screened 89 swab specimens by EIA (30.3%) was much higher than the rate detected by MCC (18.6%). 6. The positive rate of C. trachomatis infection in females detected by EIA was also much higher than in males, and the 20-25 age group showed the highest positive rate as compared to the other age groups. 7. Sensitivity and specificity of EIA for the detection on C. trachomatis were 100% and 88.6%, respectively, in case that MCC was regarded as perfect method. In summarizing the above results, it is known that considerable cases with genital diseases and with eye discharges were associated with C. trachomatis, and that EIA method is recommendable for the detection of C. trachomatis especially in the specimens swabed from the genital tracts.
The effect of ginsenosides (GS) on germ cell proliferation was evaluated with a chicken ovarian germ-somatic cell coculture model and the mechanism involving protein kinase C (PKC) pathway was investigated. Ovarian cells were cultured in serum-free McCoy's 5A medium and challenged with GS alone or in combinations with PKC activator (phorbol 12-myristate 13-acetate, PMA) or inhibitor ($H_7$) for 48 h. The number of germ cells was counted and the proliferating cells were identified by immunocytochemistry of proliferating cell nuclear antigen (PCNA). Results showed that GS significantly increased germ cell proliferation and this stimulating effect was further increased by PMA, but inhibited by H7, in a dose-dependent manner. Moreover, GS-elevated PCNA expression and the PCNA -labeling index of germ cells displayed similar changes with the increased numbers of germ cells. These results indicated that GS stimulated proliferation of ovarian germ cells with involvement of the PKC-mediated system.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.21
no.3
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pp.393-397
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1986
Chlamydia trachomatis is one of the most common cause in non-gonococcal urethritis. There are several diagnostic methods for Chlamydia trachomatis; culture method using McCoy cell, enzyme immunoassay and direct immunofluorescence staining etc. We have studied a sensitivities of culture, chlamydiazyme and direct immunofluorescence staining(DIF). 85 male patients previously conformed to non-gonococcal urethritis have been selected in this study. Three samples were concurrently collected in the same patient. First sample was used to inoculation in McCoy cell, 2'nd sample was used to Chlamydiazyme test and 3'rd sample was used to direct immunofluorescence staining method. The results are following. 1. All culture, Chlamydiazyme and DIF positive cases are 15/85(17.7%). 2. Culture and Chlamydiazyme positive but DIF negative cases absent. 3. Culture and DIF positive, but Chlamydiazyme negative cases are 2/85(2.4%). 4. Chlamydiazyme and DIF positive, but culture negative cases are 9/85(10.6%). 5. Culture positive, but Chlamydiazyme and DIF negative cases are 6/85(7.1%). 6. Chlamydiazyme positive, but culture and DIF negative cases are 7/85(8.2%). 7. DIF positive, but culture and Chlamydiazyme negative cases are 3/85(3.5%). 8. All culture, Chlamydiazyme and DIF negative cases are 43/85(50.1%). In summarized, anyone positive cases of culture, Chlamydiazymc and DIF are 42/85(49.9%).
Chen, A Qin;Xu, Zi Rong;Yu, Song Dong;Yang, Zhi Gang
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.23
no.3
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pp.326-332
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2010
Daidzein, a natural isoflavonoid phytoestrogen, structurally resembles estradiol (E2) and possesses estrogenic activity. This study was designed to test the hypothesis that daidzein may mimic the effects of E2 on ovine follicle development by regulation of the mRNA expression of bone morphogenetic protein receptor genes and thereby influence the reproductive system. Granulosa cells were cultured in serum-free McCoy's 5A medium with and without supplementation of daidzein. Results showed that daidzein (10-100 ng/ml) significantly increased the proliferation of ovine granulosa cells (p<0.05), but inhibited the growth of granulosa cells at a dose of 1,000 ng/ml (p<0.01). Daidzein inhibited progesterone production in a dose dependent manner; however, it did not affect estradiol production by granulosa cells. We also investigated the effects of daidzein on BMPRII, BMPRIB and ALK-5 mRNA expression in ovine granulosa cells by quantitative real-time PCR. Treatment of granulosa cells with daidzein increased significantly expression of these genes at 10-100 ng/ml. Thus, these data suggested that a low concentration of daidzein (10-100 ng/ml) had a direct stimulatory effect on ovine granulosa cells while a high concentration was toxic.
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