• 한국수산과학회지
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• 제18권3호
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• pp.253-261
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• 1985

부산근해산 문치가자미, Limanda yokohamae를 대상으로 1983년 12월부터 1984년 11월까 주년에 걸쳐 생식소숙도지수(GSI)의 연간변화를 비롯하여 배우자형성과정 및 생식연주기를 조사하였고 아울러 난경조성에 의한 산란기간에 개체당 산란회수, 생식주기와 관련하여 간숙도지수(HSI)와 비만도변화 등을 조사함으로써 생식주기성립기구를 고찰하였다. GSI는 일장이 단일화되며 수온이 하강되는 추계에 상승하기 시작하여 연중 최저수온과 최단일인 12월에 최대치를 나타낸다. 배우자는 6월부터 생식소가 활성화되어 난원세포 및 정원세포의 활발한 분열증식이 일어나며, 10월에 성숙기에 이르고, 12월에 완숙되어 12월하순부터 1월에 걸쳐 산란기를 가진다. 산란후 2월부터 5월까지 생식소는 퇴화${\cdot}$위축된 상태로 휴지기를 갖는다. 한 산란기동안 개체들은 1회 산란을 한다. 난모세포가 난황을 활발하게 축적하기 시작하는 난황구기부터는 간으로 부터 합성된 Vitellogenin을 공급받는 것으로 간주되며, 방란${\cdot}$방정에 의한 체력소모가 큰 것으로 나타났다. 본 문치가자미는 전형적인 동계산란종으로 단일광주기와 저수온이 생식세포형성 및 난모세포의 성숙촉진에 직접 관여하며, 배란 역시 이들 환경요인과 깊은 관계가 있는 것으로 생각된다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제31권2호
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• pp.95-103
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• 2004

Objective: To compare COH characteristics and IVF outcomes among IVF-ET patients who were treated with various therapeutic modalities for ovarian endometriomas and to propose effective pre-cyclic therapeutic modalities to improve IVF-ET outcomes in the patients with ovarian endometriomas. Methods: All cases that had undergone IVF-ET after laparoscopy between January 1997 to August 2003 were reviewed. Forty-eight patients with tubal factor were assigned to Group I. Twenty seven, 22 and 38 patients diagnosed as severe pelvic adhesion with ovarian endometriomas by laparoscopy received only medical therapy (Group II), cyst aspiration (Group III), and sclerotherapy (Group IV), respectively. Laparoscopic cystectomy was performed in 20 patients (Group V). Resistance index was measured on day administering hCG. Results: As compared with Group I, in Group II resistance index increased (p<0.05) but number of oocytes, good-quality oocyte ratio (mature and intermediate oocytes/total retrieval oocytes), fertilization rate, and embryo development rate decreased (p<0.05). In Group III fertilization rate and embryo development rate decreased (p<0.05). There was no difference between Group IV and Group I in all parameters except basal FSH which increased (p<0.05). In Group V basal FSH, and resistance increased (p<0.05) and number of oocytes and good-quality oocytes ratio decreased (p<0.05). Conclusion: Sclerotherapy is an effective therapeutic option which can be done prior to IVF-ET cycles in the patients with ovarian endometriomas. Further studies on a large scale are necessary to confirm these data.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제39권3호
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• pp.107-113
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• 2012

Objective: To determine whether animal age impacts in vitro preantral follicle growth. Effects of hCG, stem cell factor (SCF), and/or insulin-like growth factor (IGF) supplementation in growth medium were also investigated. Methods: Intact preantral follicles were mechanically isolated from fresh ovaries of BDF1 mice and cultured in growth medium for 9 to 11 days. Surviving follicles with antrum formation were transferred to maturation medium for 14 to 18 hours. Follicle survival, antrum formation, and retrieval of metaphase II (MII) oocytes were compared among three age categories (4-5, 7-8, and 10-11 week-old). By using 7- to 8-week-old mice, preantral follicles were cultured in growth medium supplemented with hCG (0, 5, or 10 mIU/mL), SCF (50 ng/mL), IGF-1 (50 ng/mL), and SCF+IGF-1. Results: Seven- to eight-week-old mice showed a higher follicle survival and antrum formation and produced more MII oocytes compared to other groups. In the 7- to 8-week-old mice, supplementation of 5 mIU/mL hCG significantly enhanced the antrum formation but the percentage of MII oocytes was similar to that of the control. Supplementation of SCF+IGF-1 did not enhance follicle survival or antrum formation but the percentage of MII oocytes increased modestly (39.1%) than in the control (28.6%, p>0.05, statistically not significant). Conclusion: Seven- to eight-week-old mice showed better outcomes in growth of preantral follicles in vitro than 4- to 5- or 10- to 11-week-old mice. Supplementation of hCG enhanced antrum formation and supplementation of SCF+IGF-1 yielded more mature oocytes; hence, these should be considered in the growth of preantral follicles in vitro.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제7권2호
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• pp.113-118
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• 2003

포유동물의 성숙한 난포의 난포액 속에는 여러 종류의 단백질 분해효소가 있으며 이들은 난포의 형성과 퇴화 및 난자의 성숙과 배란 등의 다양한 변화에 중요한 역할을 하는 것으로 여겨진다. 난포액 속의 단백질 가수분해효소 중에는 serine proteinase가 비교적 잘 알려져 있으나 다른 효소 특히, caseinolytic enzyme에 대해서는 거의 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 사람의 난포액을 재료로 하여 caseinolytic enzyme의 존재 여부 및 동 효소의 특성을 알아보고자 하였다. 사람의 난포액과 혈청 그리고 사람의 제대혈을 $\alpha$-casein을 기질로 하는 zymography 방법으로 분석 한 결과 분자량 80 kDa의 매우 강한 caseinolytic activity를 지니는 효소 단백질과 분자량 78 kDa의 비교적 약한 caseinolytic activity를 갖는 단백질 등 두 개의 caseinolytic enzyme이 관찰되었다. 이 caseinase들의 특성을 알아보기 위해 phenylmethylsulfonyl fluoride(PMSF), soybean trypsin inhibitor(SBf), 1,10-phenanthroline, E-64 그리고 ethylenediamine tetraacetic acid(EDTA)를 zymouaphy의 substrate buffer에 처리한 결과 EDTA와 SBTI에 의해서 80 kDa와 78 kDa caseinase의 활성이 억제되었다 이로 미루어 80 kDa와 78 kDa caseinase는 trypsin-like enzyme인 것으로 추측된다. 한편 사람 난포액의 zymouaphy 수행시에 5 mM의 EDTA가 첨가된 substrate buffer에 CaC $l_2$, MgC $l_2$, MnC $l_2$ ZnC $l_2$를 각각 0에서 10 mM의 농도별로 처리한 결과 모두 5 mM 농도에서 가장 높은 caseinase 활성을 보였다. 금속 이온의 첨가없이 EDTA만 처리한 대조군의 경우 caseinase의 활성은 나타나지 않았다. 이로 미루어 80 kDa 및 78 kDa caseinase는 효소 활성을 위해 이가 금속 양이온을 필요로 하는 것으로 여겨진다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제24권3호
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• pp.336-343
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• 2011

The neurotrophins, required for the survival and differentiation of the nervous system, are known to be important for the development of the reproductive tissues. However, the signals initiating the growth of follicles, gamete development, and transport and the development of zygote in the reproductive system of cows remain ambiguous. The purpose of the present study was to identify the transcripts and proteins of Neurotrophin 4 (NT4) and its receptor tyrosine kinase B (TrkB) in bovine reproductive tissues. The transcripts and immunoreactivity of NT4 and TrkB proteins were detected by reverse transcription polymerase chain reaction and western blot analysis. Using immunohistochemistry, the specific immunoreactivity of NT4 and TrkB were detected in the oocytes of primordial follicles and in the growing primary follicles. The NT4 and TrkB immunoreactivity was predominantly observed in granulosa cells, cumulus granulosa cells, cumulus oocyte complexes, theca cells of mature follicles, as well as in the oviduct epithelial cells, uterine gland cell, and epithelium cells of the uterus during the follicular and luteal phases in cows. Expressions of NT4 and TrkB mRNAs were not significantly different among the ovary, oviduct, and uterus of the follicular phase. For the luteal phase, the expression of NT4 mRNA in the ovary was significantly higher than that in the oviduct and uterus, and the expression of TrkB mRNA in the oviduct was significantly higher than that in the ovary and uterus, as determined by fluorescence quantitative reverse transcription polymerase chain reaction. The expression of NT4 mRNA was significantly higher than that of TrkB mRNA in the ovary and uterus, whereas NT4 mRNA expression was lower than that of TrkB mRNA in the oviduct during the luteal phase. The present study hypothesizes that NT4 participates in the regulation of both gonads and extra-gonadal reproductive tissues in cows.

• 한국수산과학회지
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• 제28권3호
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• pp.338-346
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• 1995

난태생 어류인 조피볼락(Sebastes schlegeli)의 성숙과 안정적인 출산을 위한 기초 정보를 얻고자, 간중량지수의 월별 변화와 간세포의 활성이 생식소의 발달과 어떤 관계에 있는지 조사하고, 아울러 생식소 발달에 따른 간 및 근육조직내의 단백질과 총 RNA 함량변화도 조사하였다. 암컷의 HSI는 9월부터 높아지기 시작하여 2월에 최대 값(2.58)에 달한 뒤, 3월(성숙기) 부터 5월(출산기) 사이에는 낮아졌다 수컷에서는 10월(성숙기)부터 높아지기 시작하여 4월(회복기)에 최대 값(3.20)에 달했다. 암컷의 난황형성기에 간세포내 글리코겐과 지방적의 양이 점차 감소되나, 총 RNA의 함량은 증가하였다. 그러나 수컷에서는 다량의 지방적들이 소모되지 않고 성숙기에도 세포질내에 잔존하고 있었다. 생식소의 발달과 함께 간 세포질에는 잘 발달된 조면소포체 가 증가하였는데, 이 들은 단백질 합성과 난황 전구물질의 형성에 중요한 역할을 하는 것으로 간주된다. 암컷의 간과 근육조직의 단백질 및 총 RNA 함량은 1월(성장기)부터 점차 증가되기 시작하여 4월 초순(성숙기)에 최대 값을 나타낸 다음, 4월 하순(임신기)에 감소되는 경향을 보였다. 수컷에서는 초기 성숙기인 10월부터 점차 증가하여 성숙 및 교미기인 12월에 최대 값을 보인 다음, 퇴화기인 1월에 다시 감소하였다.

• Applied Microscopy
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• 제34권1호
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• pp.71-81
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• 2004

본 연구에서는 등황란인 U. unicinctus 수정란의 난할과정과 형식에 대하여 관찰된 바를 보고하였다. U unicinctus성숙란을 인공수정했을 때 난할은 핵 개방(germinal vesicle breakdown)과 제1, 2감수분열 후에 수행되었으며, 유생기 까지 난할은 등할(equal cleavage), 전할(holoblastic cleavage)이었고 난할형식은 나선형 난할(spiral cleavage)인 것으로 관찰되었다. 최초 3회의 난할이 경할$\rightarrow$경할$\rightarrow$수평할이었고, 이후 경할-수평할이 반복되는 것으로 보였다. 4세포기에 할구의 배열에서 일부 할구들이 동물극으로 융기한 것과 8세포기에서 식물극 할구 배열이 동물극 할구 배열에 대하여 사선 배열한 것 등은 나선형 난할에서만 볼 수 있는 특징이었으나 제 3차 난할인 수평할에서 등할, 전할인 것이 관찰되므로서 나선형 난할을 수행하는 Spiralian의 전형에 속하지는 않는 것으로 보였다. 4세포기 이후의 할구 배열이 사선배열, 즉 나선형인 근거를 항-$\alpha$-,-$\beta$-튜블린 처리에 의해 관찰된 유사분열 기구의 행위로서 볼 수 있었다. 4$\rightarrow$8세포기의 유사분열 기구는 동물극-식물극 축에 수직으로 발생하고 사선방향으로 선회한 후 난할하므로서 결과에서 수평할 및 할구의 사선배열이 가능한 것을 볼 수 있었다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제38권3호
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• pp.153-158
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• 2011

Objective: The aim of this study was to investigate whether anti-M$\ddot{u}$llerian hormone (AMH) levels could be predict ovarian poor/hyper response and IVF cycle outcome. Methods: Between May 2010 and January 2011, serum AMH levels were evaluated with retrospective analysis. Three hundred seventy infertile women undergoing 461 IVF cycles between the ages of 20 and 42 were studied. We defined the poor response as the number of oocytes retrieved was equal or less than 3, and the hyper response as more than 25 oocytes retrieved. Serum AMH was measured by commercial enzymelinked immunoassay. Results: The number of oocytes retrieved was more correlated with the serum AMH level (r=0.781, $p$ <0.01) than serum FSH (r=-0.412, $p$ <0.01). The cut-off value of serum AMH levels for poor response was 1.05 ng/mL (receiver operating characteristic [ROC] curves/area under the curve [AUC], $ROC_{AUC}$=0.85, sensitivity 74%, specificity 87%). Hyper response cut-off value was 3.55 ng/mL $ROC_{AUC}$=0.91, sensitivity 94%, specificity 81%). When the study group was divided according to the serum AMH levels (low: <1.05 ng/mL, middle: 1.05 ng/mL - 3.55 ng/mL, high: >3.55 ng/mL), the groups showed no statistical differences in mature oocyte rates (71.6% vs. 76.5% vs. 74.8%) or fertilization rates (76.9% vs. 76.6% vs. 73.8%), but showed significant differences in clinical pregnancy rates (21.7% vs. 24.1% vs. 40.8%, $p$=0.017). Conclusion: The serum AMH level can be used to predict the number of oocytes retrieved in patients, distinguishing poor and high responders.

• 한국발생생물학회:학술대회논문집
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• 한국발생생물학회 2003년도 제3회 국제심포지움 및 학술대회
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• pp.81-81
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• 2003

DNA methylation is a covalent modification of DNA that can modulate gene expression and is now recognized as a major component of the epigenome. During evolution, the dinucleotide CpG has been progressively eliminated from the genome of higher eukaryotes and is present at only 5% to 10% of its predicted frequency. Approxymately 80% of the remaining CpG sites contain methylated cytosines in most vertebrates and they are distributed in a pattern that is unique in each tissue and is inversely correlated with gene expression. The pattern of methylation is faithfully maintained during cell division by the enzyme Dnmt1, the maintenance DNA methyltransferase, which catalyzes the transfer of a methyl group from S-adenosyl-methionine to the 5'-position of the cytosine ring. We have been identified bovine Dnmt1 cDNA full-length recently (AY173048) Little is known on the functions of Dnmt1 in bovine preimplantation embryos. Thus, we analyzed the specific pattern of Dnmt1 in in vitro derived/nuclear transfer bovine and in vivo derived mouse embryos to monitor the epigenetic reprogramming process. We investigated these process by using indirect immunofluresence with an antibody to Dnmt1. According to other studies, Dnmt1 accumulates in nuclei of early growing oocytes but is sequestered in the cytoplasm of mature oocytes. In 2-cell and 4-cell embryos, Dnmt1 is cytoplasmic, but at the 8-cell stage, it is present only in the nucleus. By the blastocyst stage, Dnmt1o is again found only in the cytoplasm. Thus, nuclear localization of Dnmt1o in preimplantation embryos is limited to the 8-cell stages After implantation, Dnmt1 is localized in the nucleus in mouse. However, we have found different patterns of Dnmt1 nuclear localization. Though we used the common antibody, immune-localization data revealed that Dnmt1 antibody have been detected at the nucleus in 1-cell to blastocyst embryos. Therefore, maybe we think that the functions of Dnmt1 between bovine and mice are different. In order to Identify the mechanisms that regulate DNA methylation in bovine preimplantation embryo, we have plans on using bovine oocyte and somatic specific Dnmt1 antibodies.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제36권1호
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• pp.63-70
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• 2009

목 적: 본 연구는 전향적 무작위 배정법 연구로 40세 이상의 불임여성의 자연주기에서 소량의 재조합난포자극호르몬을 이용한 최소자극법의 효과를 성선자극호르몬분비호르몬길항제 다회투여법과 비교 분석하고자 한다. 연구방법: 불임크리닉을 방문하였던 환자들 중 나이가 40세 이상인 75명 환자들을 대상으로 시행하였다. 연구군은 최소자극법으로 37명, 대조군은 성선자극호르몬분비호르몬길항제 다회투여법으로 38명의 환자들로 구성되었으며 모두 체외수정시술을 시행 받았다. 주기 취소율, 난포자극호르몬 종 사용량과 일수, 성숙난자의 수, 이식된 배아의 수, 배아이식 주기당 임신율, 착상율 등을 비교하였으며, 통계학적인 방법은 평균값의 비교를 위하여 Student's t-test를 이용하였고 분율의 비교를 위하여 ${\chi}^2$ 검정, Fisher's exact test를 사용하였으며, p값이 0.05 미만인 경우에 통계학적으로 유의하다고 판정하였다. 결 과: 두 군간의 대상 환자들의 기본적인 특성은 차이가 없었다. rhFSH의 투여기간과 총용량에서 연구군의 경우 4.5${\pm}$1.2일, 632.2${\pm}$123.7 IU로 대조군에서의 11.3${\pm}$2.7일, 3124.6${\pm}$452.1 IU에 비하여 통계학적으로 유의하게 낮은 값을 보였고, 주기 취소율은 연구군에서 16.2%, 대조군에서 5.3%로 통계적으로 유의성은 없었다. 회수된 난자의 수, 성숙한 제 2감수분열 중기 상태의 난자의 수 및 수정된 난자의 수, 양질의 배아수, 배아이식된 배아의 수에 있어서 대조군에 비해서 연구군에서 통계적으로 유의하게 낮았다. 배란유도를 시작한 주기당 임상적 임신율과 배아이식 주기당 임상적임신율은 연구군의 경우 각각 10.8%와 13.4%로 대조군에서 13.2%와 13.9%에 비하여 다소 낮긴 하였으나 통계학적으로 유의성은 없었다. 착상율, 자연유산율에서는 두 군간의 차이가 없었다. 결 론: 40세 이상의 고령 여성에서 체외수정술을 시행하고자 할 때 배란유도의 방법으로 GnRH antagonist와 성선자극호르몬을 이용한 최소자극법은 성선자극호르몬분비호르몬길항제 다회투여법과 비교하여 임신율이 감소하지 않으며 비용면에서 효율적이고 효과적인 방법이다.