난자와 난포세포는 gap junction channel을 통해 긴밀한 연락을 주고받음으로써 난자의 발달이나 난포의 성장에 영향을 미친다. 본 연구는 같은 크기의 난포에서 나온 난자라고 하여도 cumulus cell(난구세포)들이 붙어있는 상태가 다르다는 것을 관찰, 이렇게 난구세포와의 서로 다른 연결상태를 갖는 난자의 재질에 차이가 있을 것으로 가정하고, 난자의 competence와 이때 난자와 난구세포 사이의 cell-to-cell communication에 관여하는 gap junction protein인 connexin(CX) 37과 CX 43의 발현 정도가 어떤 상관관계가 있는지를 알아보고자 수행하였다. 생후 3주일 된 생쥐에 PMSG를 주입하고 48시간 후에 난소를 적출하여 난포를 450 $\mu\textrm{m}$ 이상(large)의 난포와 200~400 $\mu\textrm{m}$(small) 난포로 분리하여 그 난자를 얻었다. 난자에 난구세포가 compact하게 붙어있는 것은 intact로(L1, Sl), 난구세포가 어느 정도 붙어 있거나, 하나도 붙어있지 않은 것은 partial/denuded로 그룹을 나누었다(LPD. SPD). 각 그룹의 난자를 체외에서 성숙시키고, 수정시켜서 발달율을 비교하였다. 각각의 CX의 mRNA 발현을 RT-PCR과 in situ hybridization으로 비교하였다. intact와 denuded 난자의 비율은 큰 난포의 경우는 55%와45%의 비율로, 작은 난포의 경우는 30%와 70%의 비율로 난포가 작을수록 denude상태의 난자가 많이 나왔다. 어떤 경우의 난자는 체외 성숙율은 차이가 없이 모두 97%이상 성숙하였다. 그러나, 수정률에서는 차이를 보여서 intact한 난자에서 높은 수정율을 보였으며, SPD의 경우, 가장 낮은 수정ㆍ발달율을 보였다. 난자의 경우, 주로 발현되는 것은 CX 37이었으며, CX 43은 발현되지 않았다. 난구세포의 경우, CX 43이 가장 높게 발현하였고, 그 다음으로 CX 37이 관찰되었다. 본 실험 결과, 같은 발달크기의 난포라고 하더라도 그 안에 존재하는 난자의 상태는 난구세포와 얼마나 밀접한 cell-to-cell communication을 이루고 있느냐에 따라 영향을 받는다는 것을 확인하였다. 본 연구결과 다음과 같이 결론 내릴 수 있었다. 1)아직 발달이 끝나지 않은 난포에서 나온 미성숙난자라고 하여도 난구세포와 밀접한 연결을 갖는 경우 성숙난자와 거의 같은 능력을 갖고 있으며, 2) 난자와 난구세포간의 gap junctional communication은 heterotypic channel로 이루어지고, 3) 본 연구에서 관찰한 CX 43과 CX 37 두 종류만으로는 intact와 denuded의 차이점을 설명할 수 없었다.
본 연구는 생쥐 preantral follicle 의 체외성장 및 성숙에 있어서 gonadotrophins 인 FSH 와 LH 의 효과를 조사하기 위하여 실시하였으며, 그 결과는 다음과 같다. 1. FSH 첨가군들은 대조군에 비하여 유의하게 높은 생존율과 성숙율을 나타냈으며, 100$m\ell$D/$m\ell$ 의 FSH 농도가 preantral follicle 의 체외배양에 적정한 농도인 것으로 나타났다. 2. HMG 첨가군은 FSH 첨가군보다, 통계적 유의차는 인정되지 않았지만, 높은 생존율과 성숙율을 나타냈다. 3. FSH 와 LH 의 첨가비율이 100$m\ell$U/$m\ell$ 대 10$m\ell$D/$m\ell$(10:1) 에서 가장 높은 생존율과 성숙율을 나타냈다. 4. FSH 혹은 HMG 첨가시, 정상적인 oestradiol 과 progesterone 분비양상을 나타냈으며, HMG 첨가군에서 유의하게 높은 농도의 oestradiol 과 progesterone 을 분비하였다. 이상의 결과를 종합해 볼 때, gonadotrophins 은 preantral follicle 의 체외성장 및 성숙뿐만 아니라 steroidogenesis 에서 중요한 역할을 수행한다는 것을 확인할 수 있었다.
This study was carried out to examine the influence of minimum essential medium (MEM) vitamins supplementation to in vitro maturation medium and in vitro culture medium on the development of porcine embryos. Porcine embryo development was investigated following cultivation in both in vitro maturation and culture medium with the supplementation of MEM vitamins (0, 0.1, 0.2 and 0.4%) using immature oocytes collected from the ovary of prepubertal gilts. Embryo development was observed and the total cell number in each blastocyst generated under the culture conditions was quantified following supplementation of the medium. The embryonic development rate of the blastocyst and hatched blastocyst was higher, but not significantly so, when 0.4% MEM vitamins were supplemented to the in vitro maturation medium of the porcine oocyte. Interestingly, the total number of cells in the blastocyst was significantly higher in the in vitro maturation MEM vitamins supplemented group compared to either the untreated group or the group which had MEM vitamins supplemented to both in vitro maturation and in vitro culture medium simultaneously (p<0.05). Therefore, the supplementation of 0.4% MEM vitamins to the in vitro mature medium has a beneficial effect on the embryonic development of in vitro produced blastocysts derived from the immature porcine oocytes.
Oogenesis, the gonadosomatic index (GSI), reproductive cycle and first sexual maturation of the female Neptunea (Barbitonia) arthritica cumingii have been investigated by light and electron microscope observations. In the early vitellogenic oocyte, the Golgi complex and mitochondria were involved in the formation of glycogen, lipid droplets and yolk granules. In late vitellogenic oocytes, the rough endoplasmic reticulum and multivesicular bodies were involved in the formation of proteid yolk granules in the cytoplasm. In particular, compared with the results of other gastropods, it is a different result that appearances of cortical granules at the cortical layer and microvilli on the vitelline envelope, which is associated with heterosynthetic vitellogenesis, were not observed in vitellogenic oocytes during oogenesis. A mature yolk granule was composed of three components: main body (central core), superficial layer, and the limiting menbrane, Monthly changes in the gonadosomatic index in females were studied in 2002 and 2003 were closely associated with ovarian developmental phases. Spawning occurred between May and August in 2002 and 2003 and the main spawning occurred between June and July when the seawater temperature rose to approximately 18${\sim}$23${\circ}$C. The female reproductive cycle can be classified into five successive stages: early activestage (Septmber to October), late active stage ( November to February), ripe stage (February to June), partially spawned stage (May to Aygust), and recovery stage (June to August).
The gametogenesis of the surf clam, Tresus keenae, were investigated by SEM and TEM. Both the testis and the ovary had follicle tubes surrounded by inter-tubal tissue composed of adipogranular cells that provided storage function. In the vitellogenic oocyte, lipid droplets and lipid yolk granules were found in the vacuoles formed by the Golgi apparatus. Proteid yolk granules were formed by the endoplasmic reticulum and cortical granules in the cytoplasm during vitellogenesis. The mature sperm was primitive and resembled a jar with a cover. The sperm heads were approximately $2.00-2.30 {\cal}um$. The acrosomal rod projected in front of the acrosome. In addition, four large mitochondria were in the midpiece.
Choi Youn Hee;Kim Tae Ik;Hur Young Baek;Go Chang-Soon;Chang Young Jin
Fisheries and Aquatic Sciences
/
제6권2호
/
pp.51-58
/
2003
The gonadal development and the gametogenic cycle and the fine structure of ripe germ cells of the cultured Pacific oyster, Crassostrea gigas were investigated using oysters monthly collected from the southern coast of Korea from October 2000 to September 2001. Monthly changes in the condition index were similar to that of meat weight rate and the highest value was observed in between April and May, and the lowest value in August. The external colors of the testis and the ovary were milky white and yellowish, respectively. The spawning period of the Pacific oyster was continued from May to September, with a peak in July. The gametogenic cycle could be classified into five successive stages: multiplicative stage (December to March), growing stage (March and April), mature stage (April to June), spawning stage (June to August) and resting stage (August to January). Variety of egg yolk granules, lipid granules, mitochondria, and endoplasmic reticula were observed in cytoplasm of ripe oocyte. The spermatozoon consisted of the head, middle piece and tail; including cap-shaped acrosome with domed structure, elliptical shaped nucleus, four mitochondria, two centrioles and flagellum.
The sexual maturation and spawning time of female ocean sunfish Mola mola in Korean waters were studied by observing the gonads histologically. Specimens were purchased in a fish market in October 2013 and May, June, and October 2014. Nine females (total length 100-250 cm, gonad weight 31-3,470 g) and one male (total length 131 cm, gonad weight 60 g) were studied. Histologically, the ovaries became active in May and spawning began in July and continued until October. In July, mature oocytes and yolk globule stage oocytes were observed; parts of the gonad showed traces of spawning, while others had degenerated and absorbed any oocytes. By October, many oocytes had degenerated and been absorbed. Therefore, the approximate spawning period of ocean sunfish is from July to October based on histological changes in the gonads. The asynchronous oocyte development suggests that the ocean sunfish is a multiple spawner, as reported previously. The catch distribution data suggest that the waters around Jeju Island are a sunfish spawning area.
The aim of this study was to report a successful pregnancy using completely immotile frozen-thawed spermatozoa selected by laser. A single laser shot was used to detect the presence of viable immotile spermatozoa in fresh and frozen-thawed testicular spermatozoa. The viability rate was 55.8% after the laser detection, and cryopreservation was carried out immediately. The thawing test was performed on the day of oocyte pick-up, and no motile sperm were observed after extending the culture for another 4 hours, while a survival rate of 39.8% was detected using the laser. In all, five mature oocytes were injected, resulting in four cases of normal fertilization (80%) on day 1. Further, two high-quality day 3 embryos were transferred, which resulted in a singleton pregnancy. Our study demonstrates that completely immotile spermatozoa are worth cryopreserving for further intracytoplasmic sperm injection, which provides a new insight into male fertility preservation in cases of completely immotile spermatozoa.
This study investigated the effect of different photoperiods (14L: 10D, 12L:12D and 10L:14D) on the gonadal development and GtH mRNA expression in the pituitary of damselfish. The results showed that gonadosomatic index (GSI) was significantly lower in shot photoperiod (10L:14D), in comparison with other photoperiodic group during the spawning season. After 60 days treatment, histological analysis of gonad tissue showed that the gonad of 10L:14D and 12L: 12D treatment groups were resting phase with spermatogonia and perinucleolus stage oocytes but the gonad of 14L:10D treatment group was still ripe phase with spermatozoa and mature stage oocyte. The $FSH{\beta}$ and $LH{\beta}$ mRNA expression in pituitary drastically decreased shot photoperiod treatment from July (spawning period). These results suggest that photoperiod is considered to be the most effective environmental factor in controlling the reproductive cycle of damselfish.
The present study was conducted to examine the generation of reactive oxygen species (ROS) during micromanipulation procedures in bovine somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos. Bovine enucleated oocytes were electrofused with donor cells, activated by a combination of Ca-ionophore and 6-dimethylaminopurine culture. Oocytes and embryos were stained in dichlorodihydrofluorescein diacetate or 3'-(p-hydroxyphenyl) fluorescein dye and the $H_2O_2$ or $^.OH$ radical levels were measured. $In$$vitro$ fertilization (IVF) was performed for controls. The samples were examined with a fluorescent microscope, and fluorescence intensity was analyzed in each oocyte and embryo. The $H_2O_2$ and $^.OH$ radical levels of reconstituted oocytes were increased during manipulation (37.2~49.7 and 51.0~55.2 pixels, respectively) as compared to those of mature oocytes ($p$<0.05). During early $In$$vitro$ culture, the ROS levels of SCNT embryos were significantly higher than those of IVF embryos ($p$<0.05). These results suggest that the cellular stress during micromanipulation procedures can generate the ROS in bovine SCNT embryos.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.