HRF는 Na,K-ATPase의 ${\alpha}$ subunit에 결합하여 이의 활성을 저해하는 것으로 알려져 있으며, PKC에 의해 Ser98 잔기가 인산화 될 수 있다는 것을 anti-HRFpS98 항체와 HRF S98A mutant를 이용한 실험으로 확인할 수 있었다. 또한 $^{86}Rb^{+}-uptake$ assay 실험에서 HRF의 serine 98 잔기의 탈인산화는 Na,K-ATPase의 활성에 약간의 영향을 미치는 것으로 미루어 PKC에 의해 인산화되는 98 serine 잔기가 Na,K-ATPase 활성 저해에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 보인다.
Cortex Mori (Moros alba L.), the root bark of mulberry tree has been used as an autiphlogistic, diuretic and expectorant in herval medicine. Recently, a few papers reported that phenolic extract of Cortex Mori had the hypotensive, hypoglycemic, antiviral and anticancer effects, and hot water extract of Cortex Mori(CM) had inhibitory effect on the degranulation and histamine release from activated mast cells. These previous studies suggest a possibility that CM has an antidotal activity against inflammation which was mediated mainly by macrophage-secreting inflammatory factors. This study was performed to evaluate the influences of CM on carrageenan-induced edema in vivo and release of inflammatory mediators such as NO, TNF and IL-1 by macrophages stimulated with LPS or $IFN-{\gamma}$ in vitro. Subcutaneous injections of carrageenan into the mouse paw rapidly induced local edema by increasing vascular permeability, but single intraperitoneal injection of CM extract at 30 minutes before carrageenan suppressed the development of edema. NO and TNF production from macrophage stimulated by LPS or $IFN-{\gamma}$ were significantly suppressed, especially TNF secretion by up to 3-4 folds. LPS stimulated IL-1 production was also inhibited, but not significantly. Cell viability assay verified that the inhibition was not due to general cell toxicity. These results suggest that reduction of NO, TNF and IL-1 production may be one of the means by which CM prevent inflammation associated diseases.
Objectives Seunggal-tang is one of the prescriptions of oriental herbal medicine, which has been applied to several allergic diseases such as atopic dermatitis. This study was planned to compare differences of anti-allergic effects based on different form of Seunggal-tang by manufacturing differently. Methods Two types herb medicine products were used; aqueous extract (SG-T, Seunggal-Tang) and powder (SG-S, Seunggal-San) which were made from the same mixed formula of Seunggal-tang. To investigate in vitro anti-allergic activities, rat basophilic leukemia (RBL-2H3) cells were treated with SG-T and SG-S for 1 hour, and then stimulated with the phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) plus calcium ionophore A23187. We examined the release of beta-hexosaminidase, as a marker of degranulation, and the releases of tumor necrosis factor (TNF)-alpha and interleukin (IL)-4, as proinflammatory cytokines. Results SG-T and SG-S didn't have effects on cell viabilities in concentrations under 2㎎/㎖. In additionto that, SG-T more inhibited releasing ${\beta}$-hexosaminidase, TNF-${\alpha}$ and IL-4 than SG-S. Conclusions These results indicate that SG-T is more effective against mast cell-mediated allergic reactions than SG-S.
This experimental research has been done to study the effects of Palmul-tang on the anti-allergic reaction. We found the several important results from the research which has been performed by two experiments toward immediately type and delayed type in order to study the effects of Palmul-tang on hypersensitivity response to mice. The results obtained from our research are as following: The survival rate of one group to which we injected only the compound 48/80 is almost 0% according to its density and timing test. In the other hand. the survival rates of the other group to which we injected both of the compound 48/80 and Palmul-tang are 20%, 0%. 40%, 10%, 20% and 50% according to 0.025, 0.05, 0.1, 0.25 0.5 and 1 (mg/g) of compound 48/80. Time dependency test also shows the 30% and 20% survival rates in 5 and 10 minutes. Palmul-tang revealed the significantly inhibitory effect on Compound 48/80 induced Mast cell degranulation. Palmul-tang showed the significantly inhibitory effect in the delayed type hypersensitivity response to picry1 chloride. Palmul-tang showed the significantly inhibitory effect in the delayed type hypersensitivity response to sheep red blood cell. Our research provides the important evidence that Palmul-tang is benificial to the prevention and treatment of allergy related aiseases.
보중익기탕이 즉시형 및 지연형 알레르기에 대한 면역 반응에 미치는 영향을 알아보고자 항 알레르기에 대한 실험을 즉시형과 지연형으로 구분하여 시행하여 다음과 같은 결론을 얻었다 Compound 48/80 유발 아나필락시스 반응에 미치는 영향은 농도별 실험에서 보중익기탕 투여군은 생존율이 비순차적이었으나 생존율이 증가하였다. 또한 시간의존적 실험에서 보중익기탕 투여군은 다소의 생존율 변화를 보였으며, Compound 48/80 유발 비만세포 탈 과립 율의 측정을 통하여 대조군에 비해 보중익기탕 투여군은 현저하게 유의한 (p<0.005) 감소효과가 인정되었다. Picryl chloride에 의한 접촉성 피부염증 반응에 미치는 효과에 관한 실험과 면양적혈구에 의한 지연형 족부종 반응에 미치는 효과에 관한 실험에서 대조군에 비하여 보중익기탕 투여군은 유의한 억제효과가 인정되었다. 이러한 실험결과에서 보중익기탕이 즉시형 및 지연형 알레르기반응에 있어 모두 효과를 발휘하는 것으로 나타났으며 보중익기탕의 항 알레르기 효과를 질병의 치료에 응용할 수 있을 것으로 생각된다. 또한 향후 지속적인 실험과 연구를 통해 임상적 치료와 활용에 발전이 있을 것이라 사료된다.
Some flavonoids have spasmolytic activities in various smooth muscles, but structure-activity relationships on their spasmolytic activity and its mechanism are unclear. In this study, effects of flavones (flavone and apigenin) and flavonols (quercetin and rutin) on the rat ileal smooth muscle contraction were studied in vitro and in vitro. In the electric stimulation-induced contraction, all of four flavonoids inhibited concentration-dependently the rat ileal smooth muscle contraction induced by electric stimulation (10 mV, 0.1 cps, 0.1 msec duration), IC$_{50}$ of quercetin, apigenin, flavone and rutin were 0.98${\times}$10$^{-5}$, 1.20${\times}$10$^{-5}$, 1.55${\times}$10$^{-5}$ and 1.85${\times}$10$^{-5}$ M, respectively. Flavonoids at a concentration of 2${\times}$10$^{-5}$ M also significantly inhibited the anaphylactic contraction and decreased concentration-dependently the mast cell degranulation by anaphylactic reaction, IC$_{50}$ of quercetin, apigenin, flavone and rutin were 4.0${\times}$10$^{-5}$, 7.5${\times}$10$^{-5}$, 8.0${\times}$10$^{-5}$ and 9.5${\times}$10$^{-5}$ M, respectively. These results indicated that flavones and flavonols inhibited the rat ileal smooth muscle contraction induced by electric stimulation because of their antagonism against acetylcholine and have spasmolytic activities on anaphylactic contraction which may be due to their mast cell-stabilizing activities. Furthermore, double bond of C$_{2,3}$ in benzene ring of flavonoids may be important in the their antispasmodic activities on the rat ileal smooth muscle contraction induced by electric stimulation and anaphylactic reaction.
목적 : 방사선조사 후 발생하는 폐손상을 형태학적 측면에서 평가하고 captopril의 방사선조사 후 폐손상의 경감효과가 있는지를 확인하고 captopril의 방사선에 의한 폐손상의 영향에서 TNF-${\alpha}$와 TGF-${\beta}$의 변화을 알아보고자 하였다. 재료 및 방법 : Sprague-Dawley 종 수컷 흰쥐 30마리를 골라 방사선조사만 한 군, 방사선조사 후 captopril을 투여한 군으로 나누어 실험하였다. 방사선조사는 10 Gy, 20 Gy, 30 Gy를 우측 폐에 조사하였다. 방사선 단독 조사군은 방사선조사 후 각각 12 시간, 11주 후에 도살하고 방사선조사 후 captopril을 투여한 군(captopril 500 mg/L를 증류수에 타서 먹임)은 11주(fibrotic period) 후에 도살하여 광학현미경과 전자현미경으로 관찰하였다. 결과 : 방사선조사 후 12 시간내의 실험군의 폐는 부분적으로 폐실질의 허탈과 경화가 방사선조사량이 많아질수록 그 정도와 범위가 증가하였다. 방사선조사 후 11주에는 방사선 단독 조사군에서 폐섬유화의 정도와 범위가 방사선조사량이 많아질수록 증가하였고 captopril을 함께 사용한 군에서 방사선조사 단독군에 비해 폐섬유화의 경감효과가 현저하였다. 방사선 단독군에서는 방사선량이 많아질수록 비만세포의 수는 급격히 증가하였으며 Captoprll을 사용한 군이 사용하지 않은 군과 비교하여 비만세포 수의 증가 정도는 현저히 낮았고 교원질 침착의 정도도 현저히 감소되었다. TNF-${\alpha}$, TGF-${\beta}$는 방사선조사 직후(12 시간) 군에서는 방사선량이 증가함에 따라 그 발현이 증가하였으나 방사선조사 후 11주군에서는 TGF-${\beta}$는 방사선량이 많아짐에 따라 그 발현이 증가하였으며 captopril 투여군에서는 그 발현이 다소 감소하였다. Captopril을 사용한 군에서는 교원질의 양은 증가하였으나 방사선 단독군에 비해 교원질의 양이 적었고 혈관주위 비후의 정도와, 모세혈관의 변화정도, mast Cell의 수와 탈과립, 섬유모세포의 수도 적었다. 결론 : 방사선조사후 방사선 폐렴에서 captopril 영향은 방사선에 의한 비만세포의 출현을 억제시키고 교원질의 침착을 감소시킴으로써 방사선에 의한 섬유화를 예방할 것으로 생각된다. TNF-${\alpha}$와 TGF-${\beta}$의 발현은 방사선조사 후 초기에 증가하며 TGF-${\beta}$는 방사선조사 후 만성기에 방사선량이 많아질수록 발현이 증가하는 것으로 판단되었다. 본 연구 결과는 Captopril이 방사선조사 후 발생하는 폐손상을 감소시키는 기전을 밝히는 향후 연구에 중요한 자료가 될 것으로 생각된다.
머위(Petasites japonicus) 잎에서 알레르기성 천식 억제 효능이 있는 bakkenolide B의 최적 추출공정을 반응표면 분석법을 이용하여 결정하였다. Box-Behnken design에 따라 설정한 추출온도(80, 100, $120^{\circ}C$), 추출시간(30, 45, 60 min) 및 추출용매의 pH (5, 7, 9)를 독립변수로 하고, 추출물의 특성 즉, bakkenolide B의 함량과 항알러지의 측정지표인 비만세포의 탈과립반응 억제효과를 종속변수로 하여 분석을 실시하였다. Bakkenolide B의 추출함량은 추출온도, 시간, pH의 유의적인 영향을 받았으며, 추출온도 $127.1^{\circ}C$, 시간 46.6분, 추출용매의 pH 7.7에서 최대치 121.6 ${\mu}g/g$이 예측되었다. 비만세포의 탈과립반응 억제효과의 회귀분석 결과는 유의성이 인정되지 않았고 낮은 상관계수를 보였다.
목적 : 본 연구에서는 정향 에탄올 추출물이 RBL-2H3 세포 매개 알레르기 반응에 대해 미치는 영향과 그 작용기전에 대해 연구했다. 방법 : 정향 에탄올 추출물의 RBL-2H3 세포에 대한 독성 여부는 MTT 분석을 통해 평가했다. 정향 에탄올 추출물의 항알러지 작용은 효소결합면역 분석방법(ELISA)을 이용해 ${\beta}$-Hexosaminidase과 Histamine의 분비량을 측정하여 평가하였다. 정향 에탄올 추출물의 작용기전에 대해서는 유사 분열물질-활성화단백질인산화효소(mitogen-activated protein kinase, MAPK)를 western blot 법을 이용하여 측정함으로써 평가하였다. 결과 : 정향의 에탄올 추출물은 RBL-2H3 세포에 대해 독성을 나타내지 않는 농도에서 RBL-2H3 세포의 탈과립과 히스타민 분비를 유의하게 억제하였으며, p38 MAPK의 활성을 차단하였다. 결론 : 본 연구의 결과 정향의 에탄올 추출물은 비만세포에서 유래된 알러지 반응을 억제하는 효과가 있으며, 또한 그 작용기전은 p38 MAPK 인산화와 연계되어 있을 것으로 사료된다.
Objectives: This study investigated the administration of Jeungmiyijin-tang (JYT) to rats with reflux esophagitis (RE) induced by pylorus and forestomach ligation operations. Methods: Twenty laboratory rats were divided into three groups with 5~7 rats in each group. The control group consisted of rats with no inflammation (CON). The RE group had rats with gastroesophageal reflux elicited by pylorus and forestomach ligation operations. The JYT group had rats that were orally administered Jeungmiyijin-tang (1.5 ml/day/300 g) once a day for 14 days before reflux esophagitis was induced by the pylorus and forestomach ligation operations. Six hours after the operations, the rats were sacrificed, morphological changes were observed, and histological examinations were done in the stomach and esophagus lesion areas. If apoptosis was observed, the apoptotic cells in the esophagus lesion areas were counted. Results: The morphological and histochemical changes consisted of various injuries from hemorrhagic erosion in the RE group, while there were significantly fewer in the JYT group. The RE group marked increases of gastric mucosa erosion and infiltration of inflammatory cells in the submucosa, as well as cell division in the epithelial layer, the proliferation and degranulation of mast cells, and increases in the IL-$1{\beta}$, TNF-${\alpha}$, and MMP-9 expressions in the esophagus of the rats. The JYT group was inhibited above expression compared with the RE group. Apoptosis was statistically significantly decreased in the JYT group compared with the RE group. Conclusions: According to the above results, it appears that Jeungmiyijin-tang inhibits the expression of pro-inflammatory cytokines (TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, and MMP-9) and apoptosis in the esophagus mucosa, thereby preventing esophageal mucosal damage from esophageal reflux.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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