Park, Young-Doo;Kim, Hyun-Uk;Park, Beom-Seok;Jin, Yong-Moon
Horticultural Science & Technology
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v.18
no.3
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pp.342-347
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2000
The objectives of this study were to investigate the genetic and phenotypic features of male sterile transformants by pollen-specific expression of diphtheria toxin gene and to find out inheritance patterns of transgene to the next generation. When backcrossed (BC) progenies were tested for expression of kanamycin resistance ($Km^R$), 9 lines out of 13 lines, except 4 lines ($BC_{1}5-13,\;BC_{1}5-23,\;BC_{1}5-28,\;BC_{1}5-32$), showed the ratio of $Km^R$ to kanamycin sensitive ($Km^S$), from 1:30 to all $Km^S$. As a result, they were much lower than Mendelian segregation of a dominant gene. To determine whether male sterility is a heritable and stable trait, 5 male sterile plants ($BC_{1}5-13,\;BC_{1}5-14,\;BC_{1}5-23,\;BC_{1}5-32,\;BC_{1}5-33$ lines) which had different transgene copy numbers were backcrossed as female parents with pollens from wild type. To confirm the existence of the DTx-A gene in the genome of the progenies, PCR was conducted using specific primers of the DTx-A coding region. A PCR band of 428 bp was obtained from each generation, which is the predicted size of the DTx-A gene fragment. Trangenes were inherited to the next $BC_4T_0$ progenies and showed male sterility, however, based on the copy numbers of DTx-A gene male sterile plants did not show predicted ratio. When male sterile plants were backcrossed with fertile plants, fruit capsule sizes and seed settings were relatively reduced from those of selfing wild type plants. The fruit sizes and seed settings were reduced in proportion to the increase in the copy number of DTx-A gene.
Chung, Mi-Young;Chung, Jae-Dong;Jee, Sun-Ok;Tuyl J. M. Van;Lim, Ki-Byung
Journal of Plant Biotechnology
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v.31
no.2
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pp.103-108
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2004
This study was carried out to develop the efficient methods for the subsequent progeny of intersectional hybrid between Oriental and Asiatic lily hybrids. The pollen fertility and germination ability of 3 different allotetraploids (OAOA) after somatic chromosome doubling was ranged from 0 to 80 percent on artificial pollen germination medium. The number of BC$_1$ progeny using allotetraploid of F$_1$ OA-hybrid as male and female parent was different. The efficiency of BC$_1$ progeny production was increased when F$_1$OA-hybrids was used as male rather than as female parent. And in back crosses of F$_1$ OA-hybrids with the Asiatic and Oriental hybrids, Asiatic hybrids showed higher efficiency on BC$_1$ progeny production. The ploidy level between 2x or 4x Asiatic hybrid and allotetraploid F$_1$ OA-hybrid was determined and showed higher progeny production in 2x-4x crosses rather than 4x-4x.
To analyze the linkage relationships among molecular markers recently reported to be linked to onion (Allium cepa L.) Ms, a restorer-of-fertility locus, in onion (Allium cepa L.), three single nucleotide polymorphism markers were converted into cleaved amplified polymorphic sequence (CAPS) markers based on onion transcriptome sequences and the rice genome database. Analysis of the recombinants selected from 4,273 segregating plants using CAPS and other linked markers demonstrated the jnurf13 and jnurf610 markers to perfectly co-segregate with the Ms locus. In contrast to jnurf13, the jnurf610 marker was not in perfect linkage disequilibrium with the Ms locus in diverse breeding lines. Thus, the jnurf13 marker and the marker for identification of cytoplasm types were utilized to enhance the efficiency of onion breeding through four applications. First, 89 maintainer lines containing the normal cytoplasm and homozygous recessive Ms genotypes were successfully identified from 100 breeding lines. Second, these two molecular markers were used to analyze the main sources of male-fertile contaminants frequently found in the male-sterile parental lines during F1 hybrid seed production. The majority of the contaminants contained heterozygous Ms genotypes, indicating that pollen grains harboring the dominant Ms genotype may have been introduced during propagation of the maintainer lines. Therefore, the genetic purity of the two maintainer lines was analyzed in the third application, and the results showed that both maintainer lines contained 13-21% off-types. Finally, the two markers were used to increase the seed yield potentials of two open-pollinated varieties containing sterile cytoplasms by removing the plants harboring homozygous recessive and heterozygous Ms genotypes.
Sodium methyl arsenate has been evaluated as a male sterilizing agent for the system of producing hybrid rice seeds. The compound was the most effective at the concentration of 0.02%. When applied as a foliar spray to four rice varieties at 15 days before heading, sodium methyl arsenate has produced 99% male sterility. But the most effective time for application of the compound was 5 days before heading because of its phytotoxic effects. Effective application volume of the compound solution has depended on the growth of the plants treated. Varietal difference on the activity of the compound has been detected.
In order to find out effects of the generative power of silk worm moth which have been brought up in the high temperature accommodation at their pupa stage. For this specific study, 9 different kinds of male silk worms have been selected as specimen. All those specimen were brought up in the normal temperature at their larvae stage and after the pupation period they have been accommodated in the condition of high temperature for a certain length in accordance with the study programme. Afterwards, those mlae specimen were copulated with Suwon jam 103${\times}$104 which were all brought up in normal conditions. This study was carried out to find the copulation function as well as the ratio of unfertilized eggs(male sterility test). Results of study have been revealed as follows: 1) Although some differences were observed, male pura which have been brought up in the condition of high temperature shown the low rate of unfertilized eggs rather than those were brought up in the normal conpition. 2) In this group the eclosion(emergency) has been found to be poor rather, than those specimen brought up in normal conditions. 3) The copulation function of Moran, Daedong, J124 and C108 specimen were found to be poor than those of Suwon jam. 4) Fertility rate of Moran, Daedong, J124 and C108 was found to be around 65%. This figure is rather lower than what we normally expect. 5) Unfertilized egg ratio of Moran, Daedong and C108 were found to be around 20% if they were brought up in the condition of high temperature for one day from the time of pupation: 40% at 2 days, and 70% at 3 days duration. More than 3 days treatment has shown no progress in the unfertilized egg ratio. 6) One day's treatment for the pupa at the later stage has shown the unfertilized egg ratio of about 10%; 20% at 2 day's treatment, 35% at 3 day's treatment, 40-60% at 4 day's treatment, more than 60% at 5 day's treatment, and the 70% of fertilized egg ratio was only observed when the treatment days come to 7 days. It was understood that the unfertilized egg ratio was high at the antepupa stage rather than that of post-pupa stage. 7) According to the result of observation the sperm in copulatory pouch and seminal receptacle out of the normal female silk worm which have been copulated with the male brought up in the condition of high temperature at their moth stage. The reproduction system found in the control zone has been found to be normal and the sperm is amountful and active in motion while the sperm found in the treatment to be limited in amount and slow in motion. The observation was made within 5 hours from the copulation. 8) According to the result of observation of sperm of seminal receptacles of the female silkworm moth, and according to that observation of sperm in the seminal receptacle in female silkworm moth, the amount of sperm and mobility in the female moth brought up in high temperature were poor comparing that were brought up in normal temperature zone. Some of them are even found to be no trace of such. 9) Appearance and mosle of the copulatory organ of the male silkworm moth was found to be no anatomical change. 10) Testis of the later pupa stage which was brought up in the high temperature was found to be almost net developed to anucleate sperm and they are degenerated at stage of between maturation division and sperm abnormal stage. Mean time at control zone, the formation of anucleate sperm was already observed.
Background: Anticancer agents induce a variety of adverse effects when administered to cancer patients. Busulfan is a known antileukemia agent. When administered for treatment of leukemia in young patients, busulfan could cause damage to the male reproductive system as one of its adverse effects, resulting in sterility. Methods: We investigated the effects of Korean Red Ginseng extract (KRGE) on busulfan-induced damage and/or dysfunction of the male reproductive system. Results: We found that administration of busulfan to mice: decreased testis weight; caused testicular histological damage; reduced the total number of sperm, sperm motility, serum testosterone concentration; and eventually, litter size. Preadministration of KRGE partially attenuated various busulfan-induced damages to the male reproductive system. These results indicate that KRGE has a protective effect against busulfan-induced damage to the male reproduction system. Conclusion: The present study shows a possibility that KRGE could be applied as a useful agent to prevent or protect the male reproductive system from the adverse side effects induced by administration of anticancer agents such as busulfan.
New types of cytoplasmic male sterility in Brassica species would be very useful for the production of F$_1$, hybrid seeds. Leaves and stems of rapid cycling stock of B.juncea (CrGC4-3) containing Anand CMS were used as experimental materials for plant regeneration from protoplast culture. Very high plant regeneration rate (85%) was found in the Kao & Michayluk medium supplemented with 2 mg/L zeatin, 0.5 mg/L BAP, and 1 mg/L NAA when only leaf, not stem, segments were cultured. Protoplasts were isolated from leaves using mixtures of enzymes (1% Cellulycin, 0.5% Macerozyme) in 0.4 M mannitol and 50 mM $CaCl_2$.$2H_2$O. Mcrocalli induced from protoplasts were transferred to the shoot regeneration medium containing 2 mg/L BAP, 2 mg/L zeatin, and 0.5 mg/L NAA. After 60 days of initial protoplast culture, regenerated plantlets were obtained, acclimatized, transplanted into the pots, and grown up to the flowering stage.
Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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2003.10a
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pp.40-40
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2003
DNA content of the sperm of tetraploid mud loach (Misgurnus mizolepis) males and the ploidy status of progenies generated by crossing tetraploid males with diploid females are described. Reproductive performance of the induced adult tetraploid males ranged from sterility to fertility. Of 48 tetraploid males tested, 12 were sterile but the other 36 produced functional sperm. Of these 36, 26 produced haploid sperm, which on fertilizing the haploid eggs, generated diploid progenies. Seven tetraploid males were mosaics in their sperm, as indicated by the production of diploid, aneuploid and/or triploid offspring. Only 3 males produced diploid sperm rendering the production of all-triploid progenies. The DNA content of sperm of a tested tetraploid male was consistent throughout the 3 progeny tests, i.e. the haploid sperm-producing 4n males persisted to produce the haploid sperm only likewise the diploid sperm producing4n males consistently produced the diploid sperm only, when progeny testing was extended to 3 successive but alternate years. Hence, a careful and direct examination of the DNA profile of sperm from tetraploid males is a pre-requisite for reproductive containment of genetically modified fish.
hFSH is a glycoprotein secreted from anterior pituitary and consists of ${\alpha}$ and ${\beta}$ subunits. Because of its major biological functions including sperm formation in the male and for follicular growth, FSH is used to cure woman's sterility. In this study we tried to produce recombinant hFSH in vitro using a retrovirus expression vector. Two major components of the vector we constructed are: ( i ) a DNA fragment containing ${\alpha}$ and ${\beta}$ genes fused by a DNA sequence coding carboxyl terminal peptide (CTP) of human chorionic gonadotropin, (ii) a DNA fragment corresponding woodchuck hepatitis virus posttranscriptional regulatory element (WPRE). Evaluation of expression profile of the recombinant FSH using reverse transcription PCR and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Among three cell lines tested, HeLa cells were the best for hFSH expression (5,395 mIU/ml), then followed by chicken embryonic fibroblast (CEF) cells and Chinese hamster ovary (CHO) cells in the order of hFSH production. In addition to the amount, the FSH produced from HeLa cells was highest in terms of biological activity which was determined by measuring cAMP.
New winter wheat winter barley hybrids were produced (Mv9 kr1 Igri, Mv9 kr1 Osnova, Asakazekomugi Manas). The wheat-barley hybrids showed entire male sterility and were multiplied in tissue culture. Chromosome configurations were studied with GISH in meiosis in the Mv9 krl x Igri hybrid and in its progenies multiplied in vitro. Chromosome pairing between wheat and barley has been observed in some cells in the hybrids multiplied in vitro. Backcross plants with 43 and 44 chromosomes were selected with the aim of developing new wheat-barley addition lines. Wheat-barley translocations were demonstrated with GISH in backcross progenies originating from in vitro regenerated wheat (Triticum aestivum L. cv. Chinese Spring) x barley (Hordeum vulgare L. cv. Betzes) hybrids. Five different translocations were observed. Sequential N-banding and GISH analyses were performed to further identify the translocations. The N-banding pattern of the Robertsonian translocation suggests that this chromosome consists of the short arm of barley chromosome 4H translocated to the long arm of 2B of wheat. Plants with four different homozygous translocations were selected from the following BC2F3 generation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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