Fillets of mackerel (Scomber japonicus) and flounder (Xystrias grigorjewi) which, are representatives in red fleshed fish and white fleshed fish, respectively, were freeze-dried and stored in tightly sealed containers which were controlled to different relative humidity at $25^{\circ}C$. The changes of lipids were examined periodically by measuring the peroxide value (POV), the thiobarbituric acid (TBA) and the acid value (AV). And the fatty acid composition of lipids was investigated by gas-liquid chromatography (GLC). The results obtained are summarized as foollows: From the changes of POV and TBA value during storage, the oxidation of lipids was distinct at the lower relative humidities, $0\%\;and\;23\%$, while inhibited at the higher relative humidities, $52\%\;and\;81\%$. The changes in acid value during storage were more prominent at the hifger relative himidites than at the lower relative humidities. The content of $C_{16:0},\;C_{18:0}\;and\;C_{22:6}$ acids in the fatty acid composition of total lipids was abundant in both fleshed fishes. The content of $C_{18:1}$ acid in the nonpolar lipid and that of $C_{16:0}$ acid in the polar lipid were higher than other fatty acids. In the fatty acid composition of total lipids during storage, polyenoic acids decreased with storage period at $0\%\;and\;23\%$ relative humidities, while the fatty acid composition didn't show a great change at $52\%\;and\;81\%$ relative humidities. In the non-polar lipid, polyenoic acids coherently decreased under all the conditions of relative humidities but the saturated acids and the monoenoic acids increased. In the polar lipid, polyenoic acids decreased at $0\%\;and\;23\%$ relative humidities, while the saturated acids and monoenoic acids decreased at $52\%\;and\;81\%$ relative humidities. On the other hand, the oxidation of lipids was more significant in mackerel than in the flounder, and the changes of fatty acid composition were shown a similar pattern.
The characteristics of the three alkaline proteinases, Enz. A, B and C, from the pyloric caeca of mackerel have been investigated. The optimum condition for the activity of the Enz. A, B and C was pH 9.4, 9.8 and 9.8 at $45^{\circ}C$ for $2\%$ casein solution, and was pH 9.2 10.2 and 9.8 at $45^{\circ}C$ for $5\%$ hemoglobin denatured by urea, respectively. Enz. A, B and C by heat treatment at $50^{\circ}C$ for 5 min were inactivated 90, 33 and $37\%$, respectively, over the original activity. The reaction rate of the three alkaline proteinases was constant to the reaction time to 40 min in the reaction condition of $2{\mu}g/ml$ of enzyme concentration and $2\%$ casein solution. The reaction rate equation and Km value against casein substrate determined by the method of Lineweaver and Burk were: Enz. A, Y=3.6X and $Km=5.0{\times}10^{-3}\%$; Enz. B, Y=6.0X and $Km=1.0{\times}10^{-3}\%$; Enz. C, Y=4.2X and $Km=3.6{\times}10^{-3}\%$. The three alkaline proteinases were inactivated by $Ag^+$ and $Hg^{2+}$, but activated by $Mn^{2+},\;Sn^{2+}\;and\;Pb^{2+}$, Enz. B and C were remarkably inhibited by the soybean trypsin inhibitor. Molecular weight of Enz. A, B and C determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and Sephadex G-100 gel filtration was in the range of $27,500{\pm}2,500,\;20,500{\pm}1,500\;and\;15,250{\pm}250$, respectively.
Kim, Sun-Mee;Cho, Min-Kyung;Yu, Hak-Sun;Cha, Hee-Jae;Ock, Mee-Sun
Journal of Life Science
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v.19
no.9
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pp.1328-1332
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2009
Anisakidosis is caused by anisakid nematodes (family Anisakidae) larvae which can cause not only direct tissue damage but also a severe allergic response related to excretory-secretion products. Lots of different species of anisakid larvae, including Anisakis simplex, Contracaecum, Goezia, Pseudoterranova, and Hysterothylacium, cause the anisakidosis. But it is difficult to diagnosis the species of larvae since the morphologies of larval anisakid nematodes are almost indistinguishable. In order to diagnosis the differential infections of larval anisakid nematodes, polymerase chain reaction - restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) of 18S rDNA - was conducted. Three major species of anisakid larvae including A. simplex, C.ontracaecum spp, and Goezia spp. were collected from mackerel (Scomber japonicus), mullet (Mugil cephalus), founder (Paralichthys olivaceus), eel (Astroconger myriaster) and red sea bream (Pagrus major). PCR amplified 18S rDNA from each species of anisakid larvae was digested with eight restriction enzymes including Taq I, Hinf I, Hha I, Alu I, Dde I, Hae III, Sau96 I, and Sau3A I. The original sizes of PCR amplified 18S rDNA were 2.0Kb in both anisakid larvaes and Goezia. Restrction enzymes including Hinf 1, Alu 1, Hha I, Dde 1 and Hae III cut differently and distinguished the A. simplex and Contracaecum type C'. However, Contracaecum type A showed two different restriction enzyme cutting patterns by Taq 1, Hinf I, Alu 1, and Dde 1. One of the patterns was the same as those of A. simplex, Contracaecum type C' and Goezia and the other was unique. These results suggest that PCR-RFLP pattern by Hinf 1, Alu 1, Hae I, Dde 1 and Hae III can be applied to differential diagnosis of human infection with A. simplex and Contracaecum type C'. Contracaecum type A needs further study of classification by morphological characteristics and genetic analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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