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In vitro test method for efficacy evaluation on whitening cosmetics

  • Whang, Kyu-Wang
    • 대한화장품학회지
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    • 제28권3호
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    • pp.41-62
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    • 2002
  • 여러 종류의 미백제들이 한국에서 보고되고 있으나 표준화된 유효성 protocol은 아직 확립되지 않은 실정이다. 그러므로 경제적이고 재현성있는 표준화된 유효성방법이 필요하다. 비방사선표지된 멜라닌정량법은 멜라닌형성에 대한 정량법으로 좋은 방법이 될 수 있으며 정상적인 사람의 melanocyte를 이용한 MTT assay는 세포의 proliferation을 정량하기 위한 좋은 방법에 될 수 있다.

신개발 인산칼슘계 근관 봉함재의 세포독성 및 유전독성에 관한 연구 (Cytotoxicity and Genotoxicity of Newly Developed Calcium Phosphate-based Root Canal Sealers)

  • 김희정;백승호;배광식
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제31권1호
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    • pp.36-49
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    • 2006
  • 본 연구의 목적은 기존 상용화된 근관 봉함재인 레진계 봉함재 (AH 26, AH Plus), 산화 아연 유지놀계 봉함재(Tubliseal EWT Pulp Canal Sealer EWT), 수산화 칼슘계 봉함재 (Sealapex), 기존의 인산삼칼슘계 봉함재(Sankin Apatite type I, II, III)와 새로이 개발된 인산칼슘계 근관 봉함재 (CAPSEAL I, CAPSEAL II)의 세포독성과 유전독성을 비교 평가하고자 하였다. MTT test를 통해 세포독성을 평가하였으며 미생물을 이용한 복귀돌연변이 시험 (Ames test)으로 유전독성을 평가하였다. 이 연구의 결과는 아래와 같다. 1. 즉시군이 24시간군에 비해 MTT assay에서 세포독성이 높게 나타났다 (p<0.001). 2. 즉시군에서 CAPSEAL I과 CAPSEAL II는 AH 26, AH Plus, Tubliseal EWT Pulp Canal Sealer EWT, Sealapex와 SARCS II 보다 낮은 세포독성을 보였다 (p<0.01). 3. 즉시군에서 AH 26은 TA98과 TA100에 각각 S9 fraction을 처리한 경우와 그렇지 않은 경우 모두 유전독성을 나타냈으며, AH Plus 또한 TA100에 S9 fraction을 처리한 경우와 그렇지 않은 경우 유전독성을 나타냈다. 4. 즉시군에서 Tubliseal EWT, Pulp Canal Sealer EWT Sealapex가 TA100균주에 S9 fraction을 처리하였을 때 유전독성 양성반응이 나타났으며, 그 외의 경우는 모두 음성반응을 나타냈다. 5. 24시간군에서는 SARCS II가 TA98균주에서 S9 fraction처리했을 때와 처리하지 않았을 때 모두 유전독성이 나타났고, AH 26은 TA98에 S9 fraction을 처리하였을 때 유전독성이 나타났다 그 외의 경우는 모두 음성반응을 보였다. 6. CAPSEAL I과 CAPSEAL II는 유전독성에서 모두 음성반응을 나타냈다. 7. CAPSEAL I과 CAPSEAL II 두 근관봉함재 간에는 세포독성실험과 유전독성실험에서 즉시군과 24시간군 모두에서 통계학적으로 유의할 만한 차이를 보이지 않았다.

4가지 한방 소재(행인, 호장근, 자초, 강황)의 화장품약리활성에 관한 연구 (Study on Cosmeceutical Activity of four Kinds of Korea Herb Medicine Materials)

  • 김영훈;이수미;천순주;장민정;전동하;최향자;조우아;이진태
    • 한국패션뷰티학회지
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    • 제5권4호
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    • pp.130-138
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    • 2007
  • The aim of this study was to assess the cosmeceutical activies of four kinds of Korea herb medicine extracts using in cosmetics and related industries. The cosmeceutical activities of extracts were investigated by tyrosinase inhibition, astringent, anti-bacterial and MTT assay for cell viability. In the whitening effect, PA that the highest tyrosinase inhibition activity showed 56% at 10 ppm in ethanol extract. Also water and ethanol extract of RE showed 54%, 68% at 1,000 ppm, respectively, but LE and CA showed lower effect. Astringent effect of water and ethanol extract of PA appeared over 60% at 1,000ppm concentration but other extracts showed no astringent effect. In the anti-bacterial test, water and ethanol extract of PA showed no anti-bacterial effect against all microorganisms. But water and ethanol extract of RE showed anti-bacterial effect on Staphylococcus aureus, ethanol extract of showed on Staphylococcus aureus and Propionibacterium acnes, ethanol extract of CA showed on Candida albicans. The resUlt of stability test showed that the emulsion of containing PA were very stable at various temperature and sun-light test. Viscosity and pH of emulsion did not change. From the results of human patch test to assess the safety of cosmetics containing PA there was no negative reaction on skin was found.

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광개시제에 따른 실험용 3D 프린팅 의치상 레진의 기계적 성질과 생체적합성 비교 (Comparison between mechanical properties and biocompatibility of experimental 3D printing denture resins according to photoinitiators)

  • 박다령;손주리
    • 대한치과기공학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.355-361
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    • 2020
  • Purpose: In this study, we added two kinds of photoinitiators (CQ and TPO) to prepare two kinds of denture base resins (Bis-GMA series and UDMA series) for three-dimensional (3D) printing to compare and analyze their mechanical and biological properties and to find the optimal composition. Methods: Control specimens were made using the mold made of polyvinyl siloxane of the same size. Light curing was performed twice for 20 seconds on both the upper and lower surfaces with LED (light emitting diode) light-curing unit (n=10). Experimental 3D printing dental resins were prepared, to which two photoinitiators were added. Digital light processing type 3D printer (EMBER, Autodesk, CA, USA) was used for 3D printing. The specimen size was 64 mm×10 mm×3.3 mm according to ISO 20795-1. The final specimens were tested for flexural strength and flexural modulus, and MTT test was performed. Furthermore, one-way analysis of variance was performed, and the post-test was analyzed by Duncan's test at α=0.05. Results: The flexural strength of both Bis-GMA+CQ (97.12±6.47 MPa) and UDMA+TPO (97.40±3.75 MPa) was significantly higher (p<0.05) in the experimental group. The flexural modulus in the experimental group of UDMA+TPO (2.56±0.06 GPa) was the highest (p<0.05). MTT test revealed that all the experimental groups showed more than 70% cell activity. Conclusion: The composition of UDMA+TPO showed excellent results in flexural strength, flexural modulus, and biocompatibility.

세복수초(Adonis multiflora) 추출물의 항암 활성 (Anticancer Effects of the Extracts of Adonis multiflora)

  • 한효상
    • 한국자원식물학회지
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    • 제28권5호
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    • pp.561-567
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    • 2015
  • 본 연구에서는 세복수초 추출물에 대한 항암활성을 평가하고자 간암세포주인 SK-Hep1 세포주에서 MTT를 통한 세포독성을 평가하고 자가포식(autophagy) 형성정도를 확인하였다. 또한, 종양형성능 측정(Xenograft assay)를 통하여 세복수초 추출물에 대한 항암활성평가를 수행하였다. 그 결과 in vivo및 in vitro에서 모두 항암활성이 뛰어나게 나타났으며, 세복수초 추출물의 항암작용은 자가포식(autophagy)을 증가시키는 것으로 나타났다. 세복수초 추출물은 in vitro및 in vivo에서 모두 LC3의 발현을 농도의존적으로 증가시켜며 p62의 발현을 억제시키는 것으로 확인되었으며, 따라서 세복수초 추출물은 자가포식(autophagy) 활성을 증가시켜 암세포의 세포사멸을 유도하는 것으로 판단되어 간암치료제 개발 및 간암치료제와의 병용요법 등 새로운 작용기전의 항암신약개발 소재로서의 가능성이 있음을 제시한다.

MTT법을 이용한 사람 골육종과 상피암 세포주들에 대한 항암제 감수성 검사 (CHEMOSENSITIVITY TEST OF HUMAN OSTEOSARCOMA AND EPIDERMOID CARCINOMAS USING MTT ASSAY)

  • 박승오;신효근;김오환
    • Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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    • 제13권4호
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    • pp.391-404
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    • 1991
  • Three anticncer agents which are different in time or dosage dependence as well as in phase specificity, namely mitomycin and adriamycin from natural products, and widely different cancer cell lines_Four epidermoid carcinomas originated from larynx, cervix, skin and gut were used toghether with one osteosarcoma as the target cell of single and combined administration of anticancer drugs. Semiautomated tetrazolium dye assay(MTT) appears to offer an attractive option for chemosensitivity of head and neck cancers since it is a simple, valid and inexpensive method of assessing chemosensitivity for large samples in a short time. The results obtained form this study were as follows. 1. Good correlations were obtained with the results of the MTT test and those of $^3H$ thymidine uptake assay. 2. $LD_{50}$ values of HIST and St.Ca. which showed relatively high doubling time on adriamycin were $30{\mu}g/ml$ and $15{\mu}g/ml$ while those of HeLa, Hep-2 and KHOS/NP were $2.1{\mu}g/ml$, $4.8{\mu}g/ml$, and $6.8{\mu}g/ml$ respectively. 3. The $LD_{50}$ value of 5-FU on five cancer cells were very high ranging from 15mg/ml to almost indefinite number, which means 5-FU is very resistant to epidermoid carcinomas or osteosarcoma examined in this study. 4. Mitomycin was relatively effective showing 80% cancer killing effect on HeLa, 70% on St. Ca. and 50% on Hep-2 at the high concentrations used. 5. Adriamycin was the most effective showing 90% cancer cell killing effect on KHOS/NP, 98% on HeLa, 80% both on Hep-2 and St. Ca. The least susceptible cancer cells toward adriamycin was HIST having only 55% cell killing effect at the high cincentration. 6. Combined therapy of adriamycin and 5-FU was more effective than single administration in all the cases examined. Most effective synergism was observed on St. Ca. at the low concentration, showing 21 times higher than each single administration.

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다섯 가지 해조류 에탄올 추출물의 항돌연변이 활성 및 암세포 성장억제 효과 (Antimutagenic and Cytotoxic Effects of Ethanol Extracts from Five Kinds of Seaweeds)

  • 김성애;김진;우미경;곽충실;이미숙
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제34권4호
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    • pp.451-459
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    • 2005
  • 한국과 일본을 비롯한 극동아시아 지역에서 널리 사용되고 항암효과가 있는 것으로 알려진 톳, 다시마, 미역, 파래, 김을 대상으로 각 해조류 에탄을 추출물을 Ames test를 이용하여 돌연변이 유발 억제능을 검색하고, MTT assay를 이용하여 HeLa cell, MCF-7 cell과 SNU-638 cell에 대한 암세포 성장억제 효과를 비교한 결과는 다음과 같다. 5종의 해조류 에탄올 추출물의 2-anthramine에 대한 간접작용 돌연변이능 억제효과를 S. Typhimurium TA 98에서 측정한 결과, 톳$(100\%)$, 다시마$(94.2\%)$가 3.5 mg/plate에서, 파래 $(68.5\%)$가 4.5 mg/plate에서 효과적인 돌연변이 억제능을 나타냈고, S. Typhimurium TA 100에서는 파래$(100\%)$, 톳$(100\%)$, 다시마$(94.1\%)$가 각각 1.5 mg/plate, 2.5 mg/plate, 4.5 mg/plate의 농도에서 최대 돌연변이 억제 효과를 보였다. 반면 미역과 김은 간접작용 돌연변이 억제 효과가 없는 것으로 나타났다. 직접 작용 항돌연변이능을 S. Typhimurium TA 98로 측정한 결과, 톳, 미역과 파래 모두 4.5 mg/plate의 농도에서 각각 $83\%,\;73\%,\;73\%$의 저해율을 보여 2-nitro-flouorene의 돌연변이능에 대한 저해율이 비교적 높은 것으로 나타났다. 또한 S. Typhimurium TA 100에서 sodium azide의 돌연변이능에 대한 저해효과가 가장 큰 해조류는 톳, 다시마와 파래로 세 가지 해조류 모두 3.5 mg/plate의 농도에서 $100\%$ 저해율을 보였다. 반면, S. Typhimurium TA 98에서 미역과 김은 4.5 mg/plate의 농도에서 각각 $73\%,\;50%$ 정도의 저해율을 나타냈고, S. Typhimurium TA 100에서는 $0\%$ 저해율을 보여 직접작용돌연변이에 대한 저해 능력이 적은 것으로 나타났다. MTT assay를 이용하여 HeLa cell과 MCF-7 cell, SNU-638 cell에 대한 암세포 성장억제 효과를 관찰한 결과, 5종 해조류의 에탄을 추출물 모두 암세포 증식을 억제하였다. HeLa cell의 성장을 $90\%$ 이상 저해한 해조류는 톳, 다시마, 미역, 파래였고, 그 효과를 건조무게로 비교하면 파래, 미역, 다시마, 톳의 순이었다. 김은 $56\%$ 저해율을 나타냈다. MCF-7 cell에 대한 세포 성장억제 효과 역시 $90\%$ 이상 저해율을 나타낸 해조류는 파래, 미역, 다시마, 톳의 순이었고, 김은 $50\%$의 저해율을 나타냈다. SNU-638 cell에 대한 세포 성장억제 정도는 HeLa cell이나 MCF-7 cell에 대한 세포성장 억제 효과보다는 다소 낮았다. 저해율이 $70\%$ 이상인 해조류는 파래, 미역, 다시마, 톳이었고, 김은 $68\%$로 나타나 해조류 간에 차이는 적었다. 이상에서 Ames test와 MTT assay를 통해 해조류 에탄올 추출물의 항돌연변이 효과와 암세포 성장억제 효과를 검색한 결과, 톳, 파래와 다시마는 항돌연변이 효과 및 암세포 성장억제 효과가 우수한 것으로 나타났고, 암세포에 대한 항암 효과는 각 시료마다 정도의 차이는 있으나 5종의 해조류 모두 암세포 증식을 억제하는 것으로 나타났다. 이 결과는 해조류가 개발 가능한 고부가가치의 기능성식품 소재임을 확인한 것으로서, 이를 위해서는 갈조류, 녹조류, 홍조류 등의 해조류에 함유된 암예방 또는 항암작용을 가진 새로운 생리활성물질을 탐색할 필요가 있다.

Benzimidazole계 살균제의 세포독성 평가 (Risk assessment on cytotoxicity for benzimidazole fungicides)

  • 이제봉;성필남;정미혜;신진섭;강규영
    • 농약과학회지
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    • 제7권3호
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    • pp.198-206
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    • 2003
  • Benzimidazole계 살균제의 세포독성을 평가하기 위하여 CHL(chinese hamster lung) 세포를 이용한 Giemsa stain assay, Lactic dehydrogenase(LDH) activity, MTT assay, DNA synthesis inhibition test 및 Sulforhodamin B(SRB) assay를 수행하여 benzimidazole 계 살균제에 대한 약제별 세포독성을 평가하고 위해도 평가를 위한 자료로 사용하고자 하였다. 시험결과 LDH 활성은 carbendazim 4.0, 16.0 및 $32.0{\mu}g/mL$을 24 시간 처리하였을 때 음성대조군에 비해 농도별로 세포독성이 각각 2.16, 2.94 및 2.64배 강하게 나타났다. DNA 합성시험에서는 carbendazim $2.0{\mu}g/mL$ 농도에서 약 45% DNA 합성을 저해하였으며, Giemsa assay와 MTT assay에서도 세포와 mitochondria에 독성을 일으키는 것으로 나타났다. Giemsa assay의 $IC_{50}$은 thiophanate-methyl, benomyl, carbendazim 및 양성대조 약제인 captafol에서 각각 >125, 1.2, 30.0 및 $0.3{\mu}g/mL$ 이었고, MTT assay의 $IC_{50}$은 thiophanate-methyl, benomyl, carbendazim 및 captafol에서 각각 >125, 18.7, 20.4 및 $2.6{\mu}g/mL$이었다. 그리고 세포 증식에 대한 영향을 조사하기 위하여 수행된 SRB assay 의 $IP_{50}$(반수세포증 식억제농도)에서도 thiophanate-methyl, carbendazim, benomyl 및 captafol이 각각 17.4, 5.3, 1.5, 및 $0.5{\mu}g/mL$으로 관찰되었다. 이상의 결과는 급성독성이 낮은 benzimidazole계 살균제가 유전독성 등 특수독성이 강하게 나타나는 원인일 것으로 판단되었다.

척수 손상 쥐에 실시한 특정 과제 운동이 운동 행동에 미치는 영향 (Effects of Specific Exercises on Motor Function Recovery In Rats With Experimental Spinal Cord Injury)

  • 전경희
    • 한국전문물리치료학회지
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    • 제18권1호
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    • pp.93-103
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    • 2011
  • This study was implemented to verify the feasibility of motor function recovery and the appropriate period for therapy. The research began with spinal laminectomy of 40 white rats of Sprague-Dawley breed and induced them spinal crush injury. Following results were obtained by using the modified Tarlov test (MTT), Basso, Beattle, Bresnahan locomotor rating scale (EBB scale) and modified inclined plate test (MIPT). First, the measurement using the MTT confirm that the most severe aggravation and degeneration of functions are observed two days after induced injury, and no sign of neuromotor function recovery. Second, better scores were achieved by open-ground movement group on BBB locomotor rating scale test, and weight-bearing on inclined plate group show better performance on MIPT. Third, both BBB and MIPT scale manifested the peak of motor function recovery during 16th day after the injury and turn into gradual recovery gradient during 16th to 24th. Fourth, the control group showed functional recovery, however, the level of recovery was less significant when compared with group open-ground movement group and weight-bearing on inclined plate group. Hence, it was clearly manifested that the lumbar region of the spinal cord had shown the best performance when its functions were measured after the execution of specific physical training; therefore it indicated the possibility of learning specific task even in damaged lumbar regions. Thus it is expected to come out with better and more effective functional recovery if concentrated physical therapy was applied starting 4 days after the injury till 16 days, which is the period of the most active recovery.

불소 지속방출 및 생체적합성을 가진 불소 바니쉬의 개발 (Development of fluoride varnish with sustained fluoride release and biocompatibility)

  • 신경수;김아진;오승한;배지명
    • 대한치과재료학회지
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    • 제44권1호
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    • pp.21-31
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    • 2017
  • The purpose of this study was to fabricate a biocompatible fluoride varnish with sustained fluoride release, and to compare it with commercial fluoride varnishes. For the experimental fluoride varnish, bis-GMA (BG) or two types of rosin (KR-610: K0, KR-612: K2) were used as bases. Either ethyl acetate or ethanol was added as solvent and 5 wt% NaF was used. 5 mg of experimental F- varnishes and 2 commercial products, Cavity shield (CS) and Flor-opal (FO), were applied on a labial surface of bovine teeth ($10mm{\times}7mm$). The amount of fluoride release was measured at 1 hr, 2 hrs, 3 hrs, 4 hrs, 8 hrs, 12 hrs, 1 day, 3 days, 5 days, 10 days, 15 days, 20 days and 30 days. MTT test was done with diluted F- varnishes using ethanol. Statistical analysis was done with one-way ANOVA and Duncan multiple range test (${\alpha}=0.05$). BG showed the highest fluoride release at 1 hr (P<0.05), while that of K0 was highest at 2 hrs (P<0.05). From 1 day to 5 days, experimental fluoride varnishes showed higher fluoride release than the commercial products (P<0.05), and there were no significant differences after 5 days (P>0.05). For MTT test, K0 and FO showed higher cell viability than other experimental groups (P<0.05), with no significant differences with K2 (P>0.05). Considering the sustained fluoride release and cell viability of the experimental rosin-based fluoride varnishes compared with commercial products, it will be appropriate for clinical application.