A lipopeptide extract of Bacillus amyloliquefaciens BACY1 (BLE) was found to induce cell death in human oral squamous cell carcinoma (OSCC) cell lines, SCC4 and SCC25, in this study. The results of MTT assay showed that BLE inhibited OSCC cell proliferation in a dose-dependent manner. BLE was also effective in increasing the sub-G1 phases. Furthermore, when membrane damage in SCC4 cells treated with BLE was monitored by LDH assay, release of LDH was significantly increased. The protein and mRNA levels of pro-apoptotic Bax, and caspase-3 were up-regulated by BLE. Taken together, these results suggest that BLE induces apoptosis and then inhibits the cell proliferation of human OSCC cells.
본 연구는 유황오리로부터 항종양 효과를 나타내는 물질을 용매추출과 각종 chromatography를 사용하여 분리 및 정제하였다. HPLC를 사용하여 정제한 항종양활성 성분의 수율은 유황오리 1Kg당 10mg이었다. HPLC를 이용하여 정제한 항종양활성 물질을 Clonogenic assay로 측정한 결과 $200{\mu}g/m{\ell}$의 농도에서 HEp-2, KB 및 SW-156에서 각각 26%, 28%및 30%의 생존율을 나타내어 항종양 효과가 나타났다. MTT assay에서는 $100{\mu}g/m{\ell}$의 농도는 Farrow, HEp-2 및 KB에 대해서 각각 56%, 58% 및 56%의 세포증식 억제 효과를 나타내었다. bovine normal kidney cell line인 MDBK는 $500{\mu}g/m{\ell}$, $200{\mu}g/m{\ell}$, $100{\mu}g/m{\ell}$에서 각각 48%, 34%, 28%로 증식억제 효과가 나타나 정상세포에 대한 세포독성은 강하지 않은 것으로 판단되어진다.
Novel phosphorylated derivatives of ribavirin 5-16 were synthesized by the reaction of 4-nitrophenyl phosphorodichloridate with various amino acid esters in the presence of triethylamine in dry tetrahydrofuran through the intermediates 3. On further reaction of 3 with ribavirin in THF and pyridine in the presence of TEA afforded the title compounds 5-16. Their structures were characterized by IR, $^1H$, $^{13}C$, $^{31}P$ NMR and mass spectral analyses. All the title compounds were found to exhibit potent in vitro anticancer activity against MCF-7 breast cancer cell lines.
The needles of L. kaempferi was extracted with 95% ethanol and successively partitioned with n-hexane, $CH_2Cl_2$ and EtOAc. Repeated column chromatography on the EtOAc and $H_2O$ soluble fractions gave three flavan-3-ols, one flavone glycoside, six flavonol glycosides and one lignan derivative. Their structures were elucidated on the basis of chemical and spectroscopic evidences. The antioxidant activities of the isolated compounds were evaluated by DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical scavenging method. Flavan compounds indicated good antioxidative potentials compared with BHT (butylated hydroxytoluene) and ${\alpha}$-tocopherol as controls. In the anti-inflammatory test on most of the isolated compounds, NO (nitric oxide) assay against the RAW 264.7 (Mouse Macrophage) showed similar inhibitory potentials to NO production of the control. The cytotoxicity was determined by MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay and most of the isolated compounds indicated no toxicity in various concentration.
Taklysodoksan(TSS) was a drug used in the treatment of carbuncle and cellulitis in oriental medicine. The purpose of this Study is to investigate the anti-cancer effect of TSS, the proliferation of immunocytes and nitric oxide(NO) production from peritoneal macrophages of mice. This Study estimated the proliferation of Ll210 cell lines, mouse thymocytes and splenocytes and NO production from peritoneal macrophages in vitro and vivo. The proliferation of cells was tested using a colorimetric tetrazoliun assay(MTT assay). From the in vitro and vivo Study of TSS treatment, it did not effect the proliferation of L1210 cells. It also did not have any positive prodution of NO in peritoneal macrophages. This results suggest that TSS treatment in WanBingHuiChun(萬病回春) did not have significant anti-cancer effect and immuno-action comparing with TSS treatment of WaiKeZhengZhong(外科正宗).
To investigate the effect on the antimicrobial activity against S.aureus ATCC 6538, E.coli KCTC 1039 and cell toxic level against transformed mouse fibroblast L929 in formula added with various concentrations of UVB blockers commonly used in cosmetic products, these experiments were carried out by preservative efficacy testing methods and in vitro cytotoxicity methods. The results obtained were as follow ; 1) Octyl Dimethyl PABA had a broad antibacterial spectrum against the Gram (+) and the Gram(-) bacteria at 5.84 % concentration, but not Octyl Methoxycinnamate. 2) Antibacterial activity was decreased in a combined UVB blocker system of squalane base. Especially, Octyl Dimethyl PABA was inactivated by Octyl Methoxycinnamate at 5.84% concentration to a large extents , but not 4-Methylbenzylidene Camphor. 3) Within in vitro cytotoxicity by use of mouse fibroblast L929 on UV-B blockers, NR assay was more excellent than MTT assay on quantitative
Bacterial components and their derivatives have been reported to mediate various immunomodulating activities and to activate immune cells including macrophage. In this study, the secretory and cellular macrophage response to teichoicated fragments (TFs) from pneumococcal cell wall subcomponent were examined. Tumoricidal activity was measured by MTT assay and secretory molecules were assessed by biological assay. After stimulation of macrophages with various doses of TFs for 18hrs, secretion of TNF-$\alpha$, nitrite and $H_2O$$_2$ were significantly increased as compared to medium-treated control. In addition, tumorcidal activity of TFs-treated macrophages was enhanced, whereas production of IL-1 and IL-6, and phagocytic activity were not induced. These data suggest that TFs is a potent inducer of macrophage secretory and cellular activities.
Shinsuwuisaeng-Tang was a drug that treated carbuncle and cellulitis. So, the purpose of this Study was to investigate effect of Shinsuwuisaeng-Tang on the anti-cancer and nitric oxide(NO) production of peritoneal macrophages. We used Shinsuwuisaeng-Tang extract(SWT) with freeze-dried, 8wks-old male mice. and cancer cell lines(L1210, sarcoma-180) for this Study. The proliferation of cells was tested using a colorimetric tetrazoliun assay(MTT assay). The results of this Study were obtained as follow; SWT was showed cytotoxicity on the L1210 and sacoma-180(S-180) cell lines, SWT inhibited significantly proliferation of L1210 cells in L1210 cells transplanted mice, SWT accelerated NO production of peritoneal macrophages in L1210 cells transplanted mice. And SWT inhibited significantly tumor weight, increased significantly body weight and mean survival days in S-180 cells transplanted mice. This results suggest that SWT has anti-cancer by producing NO of peritoneal macrophages.
연구배경: 정상세포는 보호되고 종양세포에 독성을 보인다고 알려진 TNF유전자족으로 새로이 확인된 TRAIL이 폐암세포에서 보이는 아포프토시스 효과를 확인하고, 아포프토시스로부터 세포를 보호하는 전사인자 $NF-{\kappa}B$가 TRAIL에 의하여 활성화 되는 정도를 평가하여 MG132의 $NF-{\kappa}B$활성억제가 TRAIL 유도성 아포프토시스를 감작시키는지를 확인하기 위하여 본 연구를 시행하였다. 방법: A549(wt p53) 및 NCI-H1299(null p53) 폐암세포주를 사용하였다. 세포독성 검사는 MTT assay를 이용하였고 아포프토시스는 Annexin V assay와 FACS 분석을 이용하였다. $NF-{\kappa}B$ 전사활성은 luciferase reporter gene assay를 이용하였고 $I{\kappa}B{\alpha}$ 분해는 western blot을 이용하였으며, TRAIL에 의해 활성화된 $NF-{\kappa}B$와 DNA 결합은 electromobility shift assay와 anti-p65 antibody를 이용한 supershift assay로 확인하였다. 결과: 1) TRAIL 100 ng/ml 농도에서 wild-type p53인 A549 폐암세포는 34.4%, p53 null인 NCI-H1299 폐암세포는 26.4%의 세포사를 관찰하였다. 2) Luciferase reporter gene assay로서 TRAIL에 의한 $NF-{\kappa}B$의 활성이 A549 $IgG{\kappa}B-luc$세포에서 2.45배 증가하고 NCI-H1299 $IgG{\kappa}B-luc$세포에서는 1.47배 증가함을 관찰하여 TRAIL에 의하여 $NF-{\kappa}B$가 활성화됨을 확인하였다. 3) MG132의 전처치로 TRAIL에 의한 $NF-{\kappa}B$의 활성이 A549 세포와 NCI-H1299 세포에서 각각 기저수준의 0.24, 0.21배로 강력히 억제되었다. 4) TRAIL단독으로 30% 전후의 세포독성이 MG132 전처치 후 TRAIL을 투여하면 두 세포주 모두에서 80% 이상의 세포독성이 관찰되어 MG132가 TRAIL유도성 아포프토시스에 감작효과가 있음을 확인하였다. 결론: 이상의 결과로 TRAIL에 상대적인 내성을 보이는 폐암세포주에서 MG132가 $NF-{\kappa}B$ 활성억제로서 TRAIL유도성 아포프토시스를 강화시키는 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 따라서 본 연구는 향후 폐암치료에 있어서 TRAIL유도성 아포프토시스가 이용될 수 있는 가능성을 확인한 기초자료가 된다고 생각된다.
Objectives : The present study was designed to investigate effects of mixed extract from korean medicinal herbs (MIX) on oxidation/reduction reaction-related and aging-related enzyme in vitro. Methods : We performed MTT assay, collagenase inhibition assay, elastase inhibition assay, tyrosinase inhibition assay, DPPH free radical scavenging assay, SOD-like activity and xanthine oxidase inhibition assay. Results : Recently, many studies have reported that elastin is also involved in inhibiting or repairing wrinkle formation, although collagen is a major factor in the skin wrinkle formation. The MIX showed 97% inhibition of collagenase activity, and 64% inhibition of elastase activity at 1 mg/ml concentration of MIX, next only to positive control, which indicate good efficacy for anti-wrinkle ingredient. Also it's treatment showed 34% inhibition of tyrosinase activity, to relate whitening effect, at the same dose of MIX. Antioxidant activities were determined by DPPH radical scavenging, xanthine oxidase (XO) inhibiting activity and SOD-like activity. Also these scavenging, XO-inhibiting and SOD-like activities were measured in 91%, 80%, and 63% inhibition, respectively, at a treated dose of 1 mg/ml, compare to control. Conclusions : These results suggest that possibility of mixed korean medicinal herbs as a functional ingredient for anti-wrinkle and whitening, anti-oxidation and anti-aging cosmetic formula.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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