• Title/Summary/Keyword: MTT평가

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Study on the anti-inflammatory effects of Cannabis sativa L. seed oil complex (햄프(Cannabis sativa L.)씨드오일 복합물의 항염증 효과에 관한 연구)

  • Chae-Hyun Kim;Se Gie Kim;Young-Ah Jang;Yong-Jin Kwon
    • Journal of the Korean Applied Science and Technology
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    • v.41 no.2
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    • pp.251-259
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    • 2024
  • This study evaluated the potential of hemp seed oil (Cannabis sativa L. seed oil, CSO) and hemp seed oil complex (Cannabis sativa L. seed oil complex, CSOC) as an anti-inflammatory material through comparative analysis. Anti-inflammatory effects of CSO and CSOC were confirmed through lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW264.7 model. As a result of confirming the inhibition of lipid oxidation through lipoxygenase inhibitory activity, CSO was not inhibited, but COSC was inhibited by more than 70%. As a result of confirming cytotoxicity through MTT analysis, CSO did not show cytotoxicity, but CSOC showed cytotoxicity at over 200 ㎍/ml. In LPS-induced RAW264.7, the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and the production of nitric oxide (NO) were significantly inhibited by CSOC compared to CSO. Additionally, CSOC significantly inhibited the expression of cyclooxygenase (COX)-2 and the production of prostaglandin E2 (PGE2). Through this study, we confirmed that CSOC has superior anti-inflammatory effects than CSO and has the potential to be used as an anti-inflammatory material.

Antimicrobial Effect of Ethanol Extract of Dryopteris crassirhizoma Nakai on Propionibacterium acnes (관중(Dryopteris crassirhizoma Nakai) 추출물의 Propionibacterium acnes에 대한 항균 효과)

  • Yoon, Chang-Soon;Kim, Hyun-Ju;Lim, Hye-Won;Choi, Shin-Wook
    • Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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    • v.32 no.3 s.58
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    • pp.201-208
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    • 2006
  • Propionibacterium acnes have been recognized as pus-forming bacteria triggering an inflammation in acne. The present study was conducted to evaluate antimicrobial activities of Dryopteris crassirhizoma Nakai against these etiologic agents of acne vulgaris and application possibility as a cosmetic resource. D. crassirhizoma crude extract and hexane fraction was prepared and its anti-acne effect against Propionibacterium acnes was investigated with minimum inhibitory concentration (MIC) and paper disk diffusion method. The MIC of D. crassirhizoma crude extract and hexane fraction was 0.008 mg/mL and 0.001 mg/mL, respectively. This implies that D. crassirhizoma extract may be an efficient anti-acne ingredient for cosmetics, as a crude extract. The paper disk diffusion assay showed that its anti-acne effect was similar to that of triclosan. The cytotoxic effect of D. crassirhizoma extract was determined by a colorimetric MTT assay using HaCaT cell line and D. crassirhizoma extract exhibited lower cytotoxic effects. Finally, we examine the stability of D. crassirhizoma extract to temperature and pH. The D. crassirhizoma extract was very stable to high temperatures ($25{\sim}121^{\circ}C$) and to wide pH range ($pH\; 2{\sim}11$), suggesting its utilization for cosmetics.

Evaluation of Potential for Antioxidant and Anti-inflammatory Material of Schisandra chinensis and Cudrania tricuspidata of Cultivated in Sunchang-gun (순창군 재배 오미자와 꾸지뽕의 항산화 및 항염증 소재 활용 가능성 평가)

  • Jeong-Ho Lee;Gyeong-Ok Jeong;Kwang-Hyeon Moon;Se-Won Lee;Seong-Hyeon Lee;Gwang-Min Lee;Yeo-Jin Yoo;Eui-Yong Lee;Hyun-Jin Tae
    • Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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    • 2020.08a
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    • pp.82-82
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    • 2020
  • 염증 (Inflammation)은 물리적인 상처나 세균감염이 되었을 때 손상된 조직을 재생하고 신체를 방어하기 위해 일어나는 선천성 면역반응으로 알려져 있다. 주로 선천면역을 담당하는 대식세포는 lipopolysaccharide, reactive oxygen species와 cytokine 등에 의해 활성화되어 tumor necrosis factor-α. interleukin-1β, interleukin-6 등 염증인자들의 생성에 관여한다. 특히, 산화질소는 superoxide 음이온과 쉽게 반응하고 peroxynitrite와 같은 독성이 강한 산화제를 생성하여 단백질 및 지질의 과산화를 유도하고 세포독성을 일으키는 것으로 보고되고 있다. 따라서 본 연구에서는 항산화 및 항염증 소재를 탐색하기 위해 오미자 (Schisandra chinensis), 꾸지뽕 (Cudrania tricuspidata)을 이용하여 항산화 활성을 평가하고자 하였으며, 세포주를 활용한 세포독성 및 항염증 활성을 확인하고자 하였다. 본 연구는 전북 순창군에서 재배된 오미자, 꾸지뽕을 열 건조(60℃) 통해 건조한 후 분말화하였다. 최적 추출 조건 선정을 위해 다양한 용매 (열수, 증류수, 주정 20, 40, 60%), 온도 (25, 40, 60, 80℃) 및 시간 (1, 2, 3, 4, 5 h) 조건에서 추출된 추출물의 총 폴리페놀 함량을 비교함으로써 최적 조건을 선정하였다. 오미자와 꾸지뽕의 DPPH 및 ABTS radical 소거 활성, 총 플라보노이드 함량을 확인하여 항산화능 및 기능성 성분 함량을 평가하였다. 또한 대식세포주인 Raw 264.7을 활용하여 MTT assay, 산화질소 생성 억제 활성을 확인하여 세포독성 및 항염증 활성을 평가하였다. 실험 결과, 오미자 및 꾸지뽕은 각각 주정 40%, 60℃ 그리고 증류수, 60℃에서 추출 시 가장 높은 총 폴리페놀 함량 (약 98.3 mg GAE/g 및 88.2 mg GAE/g)을 함유하며, DPPH 라디칼 소거 활성은 약 44.6% 및 24.4%, ABTS 라디칼 소거 활성은 약 30.3% 및 40.8%로 확인되었다. 총 플라보노이드 함량은 약 21.80 mg QE/g 및 35.68 mg QE/g으로 확인되었다. 또한 오미자 및 꾸지뽕 기능성 추출물을 100 ug/mL 처리 시 세포 독성이 나타나지 않는 것으로 확인되었으며, NO 생성량을 약 56.3% 및 21.7% 저감시켜 항염증 효능을 나타내는 것으로 확인되었다.

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The Mechanism of Proteasome Inhibitor-Induced Apoptosis in Lung Cancer Cells (폐암 세포에서 Proteasome Inhibitor에 의한 Apoptosis의 기전)

  • Kim, Cheol Hyeon;Lee, Kyoung-Hee;Lee, Choon-Taek;Kim, Young Whan;Han, Sung Koo;Shim, Young Soo;Yoo, Chul Gyu
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • v.54 no.4
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    • pp.403-414
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    • 2003
  • Background : Proteasome inhibitors can promote either cell survival or programmed cell death, depending on both the specific type and proliferative status of the cell. However, it is not well known whether inhibition of proteasome activity is related to apoptosis in lung cancer cells. In addition, the exact mechanisms responsible for apoptosis induced by proteasome inhibition are not well understood. In the present study, we have examined the effect of proteasome inhibition on lung cancer cells and tried to test the mechanisms that may be associated with the apoptosis of these cells. Methods : We examined the effect of proteasome inhibition with MG132 or PS-341 on cell survival in A549 and NCI-H157 lung cancer cells using MTT assay, and analyzed the cleavage of PARP by Western blot analysis to find evidence of apoptosis. Next, we evaluated the activation of caspase 3 by Western blot analysis and the activity of JNK by immunocomplex kinase assay. We also examined the changes in anti-apoptotic pathways like ERK and cIAP1 by Western blot analysis after inhibition of proteasome function. Results : We demonstrated that MG132 reduced cell survival by inducing apoptosis in A549 and NCI-H157 cells. Proteasome inhibition with MG132 or PS-341 was associated with activation of caspase 3 and JNK, reduced expression of activated ERK, and downregulation of cIAP1. Conclusion : Apoptosis induced by proteasome inhibition may be associated with the activation of pro-apoptotic pathways like caspase 3 and JNK and the inactivation of anti-apoptotic pathways in lung cancer cells.

Effect of Verapamil on Cellular Uptake of Tc-99m MIBI and Tetrofosmin on Several Cancer Cells (수종의 암세포에서 Verapamil이 Tc-99m MIBI와 Tetrofosmin의 섭취에 미치는 영향)

  • Kim, Dae-Hyun;Yoo, Jung-Ah;Suh, Myung-Rang;Bae, Jin-Ho;Jeong, Shin-Young;Ahn, Byeong-Cheol;Lee, Kyu-Bo;Lee, Jae-Tae
    • The Korean Journal of Nuclear Medicine
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    • v.38 no.1
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    • pp.85-98
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    • 2004
  • Purpose: Cellular uptake of $^{99}mTc$-sestamibi (MIBI) and $^{99}mTc$-tetrofosmin (TF) is low in cancer cells expressing multidrug resistance(MDR) by p-glycoprotein(Pgp) or multidrug related protein(MRP). Verapamil is known to increase cellular uptake of MIBI in MDR cancer cells, but is recently reported to have different effects on tracer uptake in certain cancer cells. This study was prepared to evaluate effects of verapamil on cellular uptake of MIBI and TF in several cancer cells. Materials and Methods: Celluar uptakes of Tc-99m MIBI and TF were measured in erythroleukermia K562 cell, breast cancer MCF7 cell, and human ovarian cancer SK-OV-3 cells, and data were compared with those of doxorubicin-resistant K562(Ad) cells. RT-PCR and Western blot analysis were used for the detection of mdr1 mRNA and Pgp expression, and to observe changes in isotypes of PKC enzyme. Effects of verapamil on MIBI and TF uptake were evaluated at different concentrations upto $200{\mu}M\;at\;1{\times}10^6\;cells/ml\;at\;37^{\circ}C$. Radioactivity in supernatant and pellet was measured with gamma counter to calculate cellular uptake ratio. Toxicity of verapamil was measured with MTT assay. Results: Cellular uptakes of MIBI and TF were increased by time in four cancer cells studied. Co-incubation with verapamil resulted in an increase in uptake of MIBI and TF in K562(Adr) cell at a concentration of $100{\mu}M$ and the maximal increase at $50{\mu}M$ was 10-times to baseline. In contrast, uptakes of MIBI and TF in K562, MCF7, SK-OV3 cells were decreased with verapamil treatment at a concentration over $1{\mu}M$. With a concentration of $200{\mu}M$ verapamil, MIBI and TF uptakes un K562 cells were decreased to 1.5 % and 2.7% of those without verapamil, respectively. Cellular uptakes of MIBI and TF in MCF7 and SK-OV-3 cells were not changed with $10{\mu}M$, but were also decreased with verapamil higher than $10{\mu}M$, resulting 40% and 5% of baseline at $50{\mu}M$. MTT assay of four cells revealed that K562, MCF7, SK-OV3 were not damaged with verapamil at $200{\mu}M$. Conclusion: Although verapamil increases uptake of MIBI and TF in MDR cancer cells, cellular uptakes were further decreased with verapamil in certain cancer cells, which is not related to cytotoxicity of drug. These results suggest that cellular uptakes of both tracers might differ among different cells, and interpretation of changes in tracer uptake with verapamil in vitro should be different when different cell lines are used.

Studies on Skin Whitening Effects of Resorcinol Dipentyl Ether (레조시놀다이펜틸에터의 피부 미백 효능 평가)

  • Cha, Young Kwon;Cho, Hyun Dae;Cho, Wan Goo;Byun, Sang Yo
    • Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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    • v.43 no.2
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    • pp.115-124
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    • 2017
  • The objective of this study was to investigate skin whitening effect of Resorcinol dipentyl ether [1,3-di(pentyloxyl)benzene] by in vitro experiments. Resorcinol dipentyl ether was prepared by alkylation of resorcinol with 1-bromopentane. The reaction products were confirmed by NMR, MS and other analytical equipments. In order to evaluate the skin safety of resorcinol dipentyl ether, the cytotoxicity of the cells constituting the skin (keratinocyte, melanocyte, fibroblast) was analyzed and similar cell viability was observed in all cell lines as compared with the control group. Inhibition of extracellular melanin synthesis effect of resorcinol dipentyl ether was approximately 65.75% at $20{\mu}g/mL$ and inhibition of intracellular melanin synthesis effect of resorcinol dipentyl ether was approximately 53.89% at $20{\mu}g/mL$. The real-time PCR and western blot analysis of mRNA expression and protein expression of tyrosinase, TRP-1, and TRP-2 related to melanogenesis revealed that melanin inhibitory effect of resorcinol dipentyl ether was inhibited from the transcription stage respectively. Finally, this study suggested applicability of Resorcinol dipentyl ether [1,3-di(pentyloxyl)benzene] as a whitening functional cosmetic new material.

The Experimental Study on anti-inflammatory Effect of ChengpyeHwadamTang (청폐화담탕(淸肺化痰湯)의 항염작용(抗炎作用)에 대한 실험적(實驗的) 연구(硏究))

  • Kwak, Sang-Ho;Shin, Sun-Mi;Kim, Soo-Min;Kim, Eui-Il;Lee, Jung-Eun;Yoo, Dong-Youl
    • The Journal of Korean Obstetrics and Gynecology
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    • v.20 no.1
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    • pp.144-160
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    • 2007
  • 목 적 : 이 연구는 천식, 기관지염, 폐렴, 결핵, 산후감모 등의 호흡기 질환에 사용되는 청폐화담탕(淸肺化痰湯)의 항염작용(抗炎作用)의 효과에 대해 알아보기 위해 시행되었다. 방 법 : 청폐화담탕(淸肺化痰湯)의 항염작용(抗炎作用)의 효과를 평가하기 위해 세포독성에 미치는 영향, NO, TNF-${\alpha}$, IL-l${\beta}$, IL-6 생성량에 미치는 영항, TNF-${\alpha}$, IL-l${\beta}$, IL-6 유전자 발현에 미치는 영향, iNOS, 염증cytokine 유전자 및 단백질 발현에 미치는 영향, PGE$_2$ 합성에 미치는 영향 및 NF-${\kappa}$B 활성에 미치는 영향에 대한 실험평가를 하였다. 결 과 : 청폐화담탕(淸肺化痰湯)은 MTT 분석을 통한 RAW 264.7 세포주의 생존력 평가에서 세포독성이 없었고, LPS로 유도된 RAW 264.7 세포주에서 NO 생성량을 농도 의존적으로 억제하였다. 청폐화담탕(淸肺化痰湯)은 400 g/ml 농도에서 LPS로 유도된 RAW 264.7 세포주에 대해 TNF-${\alpha}$, IL-1${\beta}$, IL-6 생성량을 각각 41.86${\pm}$2.26 %, 61.11${\pm}$2.54 %, 55.33${\pm}$3.65 % 억제하였으며 TNF-${\alpha}$, IL-1${\beta}$ 및 IL-6 유전자 발현을 농도 의존적으로 억제하였고, LPS로 유도된 RAW 264.7 세포주에서 iNOS와 COX-2 유전자 및 단백질 발현은 농도 의존적으로 억제하였다. 또한 그 농도에 따라 PGE$_2$ 생성량이 현저하게 억제하였고, LPS로 유도된 NF-${\kappa}$B 전사활성을 농도 의존적으로 억제함으로써 iNOS와 염증Cytokine 유전자 발현을 하향조절 하였다. 결 론 : 이상의 실험을 통해 청폐화담탕(淸肺化痰湯)은 LPS로 유도된 macrophage에서 NO와 염증Cytokine 생성량을 억제하였고 murine macrophage에서 NF-${\kappa}$B 활성을 억제함으로써 iNOS와 염증Cytokine 유전자 발현을 하향조절 하였다. 이러한 청폐화담탕(淸肺化痰湯)의 항염작용으로 천식, 기관지염, 폐렴, 결핵, 산후감모 등의 호흡기 질환에 응용할 수 있으리라 사료된다.

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Evaluation of Biological Activity in Pepper (Capsicum annuum L.) Breeding Lines (육성계통에 따른 고추의 생리활성 평가)

  • Jung, Mi-Ri;Hwang, Young;Kim, Hae-Young;Cho, Myeong-Cheoul;Hwang, In-Guk;Yoo, Seon-Mi;Jeong, Heon-Sang;Lee, Jun-Soo
    • Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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    • v.40 no.5
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    • pp.642-648
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    • 2011
  • The purpose of this study was to determine the capsaicinoid and antioxidant compounds and to evaluate the biological activity of 40 different pepper (Capsicum annuum L.) breeding lines. Capsaicinoid and ascorbic acid content were measured with HPLC. Total polyphenolic and flavonoid contents and antioxidant activity were measured with spectrophotometric methods. The antiproliferative qualities of the samples against human breast tumor cells (MCF7) were assessed with a MTT assay. The nitric oxide content in the culture media was measured to evaluate the anti-inflammatory qualities of the samples using Raw264.7 macrophages. The capsaicinoid, ascorbic acid, polyphenolic and flavonoid content of the 40 pepper breeding lines were 0.1~204.2 mg/100 g (dry weight basis, DWB), 279.1~1695.5 mg/g (DWB), 2.6~10.2 mg/g (DWB), and 1.4~5.7 mg/g (DWB), respectively. The highest antioxidant, antiproliferative, and anti-inflammatory qualities were found in breeding line numbers 2500, 3201, and 3232, respectively. This study provides basic information useful to plant breeders and biotechnologists who are planning to breed pepper genotypes with high phytochemical content.

A Study on Aronia czarna Bioconversion of Metabolic Compounds by Salted Fish Host Fermenting Bacteria and Its Enhancement During Fermentation (아로니아 기능성 증대를 위한 전통 젓갈 유래 유용발효미생물 활용 생물전환 방안 연구)

  • Lim, Jeong-Muk;Choi, Ui-Lim;Moon, Kwang-Hyun;Kim, Dae-Geun;Ok, Jeong-Kyung;Lee, Jeong-Ho;Oh, Byung-Taek
    • Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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    • 2018.04a
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    • pp.69-69
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    • 2018
  • 아로니아(Aronia czarna)는 anthocyanin, polyphenol, flavonoid, cathechine, chlorogenic acid와 같은 생리활성물질이 풍부하게 존재하며 항산화, 항암, 항균, 피부건강개선, 노화방지 등 다양한 생리활성에 대한 효능이 있는 것으로 알려져 있어 건강 및 기능성식품, 화장품 등의 원료 소재로 각광받고 있다. 생물전환(Bioconversion)은 미생물 또는 효소의 생물학적 촉매 반응을 활용하여 기존 소재의 성분을 변환시키는 기술이다, 최근 생물전환을 활용한 천연소재의 생리활성 물질 기능성, 생체이용률, 안전성을 증대시키기 위한 방안으로 많은 연구가 진행되고 있으며 식품, 의약품, 화장품 등 다양한 분야에서 활성화 되고 있다. 본 연구는 젓갈로부터 분리한 균주를 유전학적 특성을 확인하기 위하여 16S rDNA 염기서열을 분석한 뒤 그중 유산균을 발효공정에 활용하였다. 전북 순창에서 수확된 아로니아 분말과 발효공정을 수행하였으며 아로니아 최적 추출조건 선정, 발효공정 전 후 추출물의 기능성 평가를 진행하기 위하여 DPPH radical scavenging activity, Total polyphenol 함량을 확인하여 항산화 효능 및 유효성분 함량을 평가하였다. 또한 대식세포인 Raw 264.7을 사용하여 MTT assay, Nitric oxide (NO) 생성 억제 효능을 확인하여 세포독성 및 항염증 활성을 평가하였다. 실험결과, 젓갈류 발효물로부터 16종의 다양한 균주를 확보하였으며, 그중 L. rhamnosus, L. plantarum, P. pentosaceus 균을 발효 공정에 활용하여 유용 균주를 선정 결과 P. pentosaceus 종 유산균 처리군에서 무처리군 대비 DPPH radical 소거능 및 polyphenol 함량이 증가됨을 확인하였다. 발효공정 후 항산화 활성은 무처리군 대비 약 119%, polyphenol의 함량은 무처리군 대비 약 119%로 증가됨을 확인되었다. 또한 Raw 264.7 세포실험 결과 발효공정 후 독성활성이 감소되는 경향을 확인되었으며, 항염증 활성이 월등히 증가됨을 확인하였다.

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A Bioconversion Study on the Zanthoxylum schinfolium by Fermenting Bacteria and Their Functional Enhancement (유용 발효미생물 활용 생물전환 공정을 활용한 산초열매의 기능성 증대 방안 연구)

  • Lim, Jeong-Muk;Lee, Se-Won;Lee, Seong-Hyeon;Lee, Jeong-Ho;Oh, Byung-Taek
    • Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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    • 2018.04a
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    • pp.64-64
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    • 2018
  • 생물전환(Bioconversion)은 천연소재의 기능성을 증대시키기 위한 방안으로 많은 연구가 진행되고 있으며 다양한 산업에서도 활용되고 있어 유용미생물을 기반 차세대 기술로 각광받고 있다. 이러한 기술의 도입은 식품은 물론 의약품 및 화장품 산업에서도 활발히 사용되고 있으며, 특히 최근 기능성 제품에 대한 소비가 급증함에 따라 그 중요성이 높아지고 있다. 산초(Zanthoxylum schinfolium)는 limonene, citronellal, phellandrene 등의 다양한 유효물질을 함유하고 있으며 유효성분들로부터 유래되는 항산화 활성과 항암활성, 항균활성 등의 효능을 지니는 것으로 보고된바 있다. 본 연구의 생물전환 공정에 사용된 유산균들은 전통 발효식품으로 알려진 다양한 젓갈류로부터 분리하였으며, 16S rDNA 염기서열 분석을 통해 유전학적 특성을 확인하였다. 또한 확보된 유산균들을 사용하여 산초(전북 진안군) 분말의 발효공정을 수행하였으며, 산초의 최적 추출조건을 선정하고 추출물을 제조하여 생물전환 공정 전 후 활성의 변화추이를 관찰하였다. 추출물의 활성평가는 항산화 효능 및 유효성분 함량을 평가하기 위하여 DPPH radical scavenging activity와 total polyphenol 함량을 평가하고 세포주를 활용해 MTT assay, Nitric oxide(NO) 생성억제 효능을 확인하여 세포독성 및 항염증 활성을 확인하였다. 실험결과, 생물전환 공정에 사용할 유용 미생물을 확보하기 위한 실험을 통해 다양한 젓갈류에서 다양한 미생물을 확보할 수 있었으며 약 16종의 유산균을 분리하였다. 분리된 미생물을 사용하여 산초 분말의 생물전환 공정을 실시한 결과, 5종의 유용미생물 처리에서 무처리 대비 DPPH radical 소거능 및 polyphenol 함량이 유의적으로 증가됨을 확인할 수 있었다. 그 중 가장 높은 활성을 나타내는 균주를 16S rDNA 염기서열 분석을 통해 확인한 결과 Weissella confusa D1로 확인되었다. 선별 균주를 활용한 생물전환 공정 후 항산화 활성은 대조군 대비 약 120%의 활성을 나타냈으며, polyphenol의 함량은 약 126%로 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 더 나아가 생물전환 공정 후 산초추출물의 세포독성은 처리전과 비교하여 월등히 감소하는 경향을 확인할 수 있었으며, 항염효능 또한 증가하는 경향을 나타내는 것이 확인되었다.

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