To develop hybridomas secreting monoclonal antibodies to be used as unlimited sources of reagents indispensable for the diagnosis and treatement of leukemic malignancy, a monoclonal antibody was generated to human pre-T leukemia cells (Jurkat). Hybridomas were produced against Jurkat cell line by fusing spleen cells from hyperimmunized mice with murine plasmacytoma cells (P3$\times$63Ag8. V653). One monoclonal antibody derived from this fusion, designated DMJ-2 was reactive with T-cell lines (Jurkat, Molt-4 and RPMI-8402) and normal peripheral E-rosette forming T cells, but unreactive with B-cell lines (Daudi, Nalm-6) and non-T, non-B cell line (K562). Conclusively DMJ-2 reactive with mature and immature T-lineage lymphoid cells.
In order to define the morphological changes of the secreting cells of prothoracic gland during larva-pupal molt, ultrastructural observations were carried out using Bombyx mori L. as the experimental material. At first stage of present experiment, 4 day old 5th instar larva, the polyhedral secreting cells were centrally located in the prothoracic gland surrounded by the connective sheath. The secreting cells were attached to the neighboring cells by the prominent desmosomes, and the plasma membrane contacted with connective sheath were highly infolded. In cytoplasm, the most of the cell organelles, such as rod-like mitochondria, rough surfaced endoplasmic reticulum, ribosome were developed. As the stages advance from larva to pupa, general feature of the secreting cells were retained, but structural changes of the various cytoplasmic organelles-ribosome, rough surfaced endoplasmic reticulum, mitochondria, Golgi apparatus, lamellar body, and vesicle-were noted. In the perinuclear cytoplasm of the secreting cells at the stage of 6 day old 5th instar larva, it is peculiar that only a large amount of ribosomes were distributed and the other organelles were retreated from the juxtanuclear region. Just before and after spining cocoon, these features were more remarkable. Rough surfaced endoplasmic reticulum were gradually increased from the stage just before spining cocoon to the pharate pupa. Rod-like mitochondria with irregular cristae and the matrix showing low density were distributed throughout the cytoplasm in the secreting cells of the 4 day old 5th instar larva. Sometimes, longitudinally distended and curved mitochondria were observed. At the stage of pharate pupa, most of mitochondria were deformed. The rod-like mitochondria of the secreting cells of pupal prothoracic gland were narrower than those of 4 day old 5th instar larva, and the electron density of the mitochondrial matrix is increased in pupa. Golgi apparatus were a few in number in both stages, last instar larva and spining cocoon. In stages of the pharate pupa, the Golgi apparatus were frequently observed. Cytoplasmic vesicles were observed for the first time in the secreting cells of one day after spining cocoon, and the number and the size of cytoplasmic vesicles were distinctly increased inpharate pupa and just after pupation. In the secretory cells of the PG, it in concluded that the RER was closely related to syntheting the enzymes seem to produce the ecdysone.
Seo, Min-Jun;Lee, Jong-Hyun;Jin, Jong-Sik;Park, Jin-Han;Lee, Jun-Ho
Journal of Evidence-Based Herbal Medicine
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제2권1호
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pp.19-24
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2009
GD68 is newly developed herb complex prescription. The constituent herbs of GD68 were Massa Medicata Fermentata, Atractylodis Rhizoma Alba, Poria, Zingiberis Siccatum Rhizoma, Crataegi Fructus, Saccarum Granorum, Agastachis Herba, Taraxaci Herba, Perillae Herba, Scutellariae Radix, Astragali Radix, Ginseng Radix, Houttuyniae Herba and Halloysitum Rubrum. The aim of this study was to examine feed value of GD68 in duck. The weight gain of ducks fed with supplemental GD68 high compared to those of the control. The feed intake and mortality of ducks fed with supplemental GD68 low compared to those of the control. The moisture, crude lipid and calorie content of the ducks fed GD68 were decreased, but the crude protein content of the ducks fed GD68 was increased. And we investigated the effect of GD68 on the production of cytokines in human T-cell line, MOLT-4 cells. GD68 plus concanavalin A (Con A) increased the interferon-$\gamma$ and interleukin-2 production compared with Con A alone. These results indicate that the supplemental GD68 may improve the production, meat quality and immunity of ducks.
The purpose of this research was to investigate the effects of Chungjokupye-tang(CJKPT) on the anti-carcinogenic action. The cell viability of mouse spienocytes and thymocytes were enhanced by the addition of CJKPT. CJKPT were increased of splenic and thymic T lymphocytes, such as T/sub H/ cells were markedly increased by the treatment of CJKPT in vivo. CJKPT treatment induced the apoptotic cell death of Jurkat and HL60 leukemia cells. CJKPT reduced mitochondrial transmembrane potential and increased the expression of ICE, c-myc and p53 gene in Molt-4cells dose dependant manner. These results suggest that CJKPT have an anti-carcinogenic action via immunoregulatory mechanism.
Rubia cordifolia has been used to treat diseases for many years in China and India. Although the biological properties and major compounds of R. cordifolia have been extensively studied, the underlying mechanisms of its biological effects remain elusive. In terms of immunological effects, anti-inflammation effect of macrophage (Raw 264.7) simply has been reported. In this study, R. cordifolia was extracted in 70% ethanol and the extract did not affect to macrophage (Raw 264.7) pro-inflammation and T cell (Molt-4). However, in mast cell (RBL-2H3), it showed inhibition of degranulation. The inducing inhibitory effect on degranulation was related to concentration dependent variation in phosphorylation of ERK-1/2 and upregulating the JNK phosphorylation in RBL-2H3 cells. Based on these data, we concluded that R. cordifolia newly have anti-allergenic effects in RBL-2H3 and might be used as a therapeutic agent to treat or prevent allergic diseases such as asthma and atopic dermatitis.
Decursin is a major component of the root of Angelica gigas(Umbelliferae), which has been traditionally used in Korea as a tonic and to treat anemia, hemiplegia, and women's diseases. The objective of this study is to identify the anti-cancer mechanism induced by decursin on apoptosis of human leukemia and lymphoma cells. Cytotoxicity of decursin on U937, HL-60, MOLT-4, THP-1 cells showed the significant effects. First of all, $IC_{50}$ of decursin on four cell lines was 27.1, 32.4, 17.4, $15.1{\mu}M$, respectively. So $IC_{50}$ in THP-1 cells was the smallest among 4 cell lines treated with decursin($15.1{\mu}M$). In order to understand the apoptosis-mechanism by decursin, we examined the gene expression of bcl-2(anti-apoptotic), bax(pro-apoptotic) and p53(tumor suppressor)after treating the THP-1 cells with decursin(10, 50 and $100{\mu}M$). It was found bcl-2 gene was decreased dose dependently, the expression level of bax gene of THP-1 cells treated with $100{\mu}M$ of decursin was about 3 times higher than those of control, and p53 gene was increased In the same concentration($100{\mu}M$), p53 gene was increased dose dependent manner. In protein express, bcl-2 and p53 protein showed a tendency to decrease. bax was increased about 4 fold. Therefore decursin is a useful chemotherapeutic agent against leukemia.
9 종류의 종자 중 대식세포를 자극하여 NO 생성능이 높은 메밀, 민들레, 봉선화, 해바라기 4종의 종자를 선별하였다. 선별된 4종의 종자 추출물이 RAW 264.7 세포를 활성화시켜 면역을 증진시키는 효과를 알아보기 위해 RAW 264.7 세포와 T세포를 이용하여 면역 활성능 관련 지표를 조사하였다. 4종의 종자를 대식세포에 처리하였을 때 면역 활성의 지표가 되는 NO, cytokine(TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, IL-10)의 생성이 추출물을 처리하지 않은 대조군에 비해 증가되었고, Molt-4 세포에 처리하였을 때 대조군에 비해 세포가 증식되었다. 이와 같은 결과는 종자 추출물을 섭취하였을 때 외부로부터의 어떠한 자극이 있기 이전에 체내의 모든 조직에 분포하면서 1차적으로 이물질을 제거하는 대식세포를 자극하여 cytokine 등의 면역매개물질을 생성하여 인체의 비특이적 면역반응을 증가시킴으로써 항원을 공격, 제거하는 등의 작용을 통해 자연 면역반응에 있어 중요한 역할을 할 수 있을 것으로 판단된다.
The studies were conducted to investigate the combined effects of Tonics and Mitomycin C(MMC). The effects of Tonics and MMC on the proliferation of Molt-4 cells, human leukemic cell line, and activation of human lymphocytes were estimated by MTT colorimetric assays. Selected medicines among 9 kinds of Tonics by results of MTT assays were treated with MMC in mice. The Tonics itself enhanced the proliferation of Molt-4, but the anti-proliferative effect of MMC was not intercalated by the combined treatment of Tonic and MMC. Inhibitory action of MMC was augmented by Sa Kun Ja Tang(SKT). This result was due to the inhibition of DNA synthesis. Among 9 kinds of Tonics, Sip Jean Dae Bo Tang(SDT), Saeng Maek San(SMS) and Kwi Bi Tang(KBT) did not inhibit the action of MMC, but activated lymphocytes. When the mice were treated by MMC, the number of leukocytes was decreased significantly at the 1st day, but recovered at the 7th day. In the groups of MMC treated with SDT or KBT, the number of leukocytes was increased significantly than the group of MMC treated only at the 3rd day. Combined treatment of the Tonics(SDT, SMS) and MMC retained the body weight of mice at the level of normal mice. SDT, SMS and KBT did not change the number of plaque forming cells(PFC), but MMC treated group decreased the number of PFC. The combined treatment of MMC and SDT increased the number of PFC significantly than the MMC treated group. SDT, SMS and KBT did not influence the proliferation of T cells, but MMC treated group decreased the proliferation of T cells. The combined treatment of MMC and those tonics increased the T cell proliferation significantly than the MMC treated group. In conclusion, the results presented in this paper suggest that SDT, SMS and KBT can recover the side effects of MMC, such as weight loss, leukopenia and immunosuppresion, without any intercalating the anti-proliferative action of MMC in vivo.
The purpose of this research was to investigate the immunoregulatory effect and the leukemia cell apoptosis of EtOH extract of OGAPI(OGP). The proliferation of cultured splenocytes, thymocytes and mesenteric lymph node cells were enhanced by the addition of OGP. Splenic and thymic T lymphocytes, especially TH and Tc cells were significantly increased in OGP-administered mice. OGP markedly increased the production of γ-interferon in mice serum and accelerated the phagocytic activity in peritoneal macrophages. OGP treatment enhanced the apoptosis of L1210 mouse leukemia and Jurkat, Molt4 human leukemia cells, and increased the expression of apoptosis-related ICE, c-myc, p53 gene in Jurkat cell. These results suggest that OGP have an immunoregulatory action and anti-cancer activity.
The purpose of this research was to investigate cytotoxicity of DangkwiYonghoe-Hwan(DYH) and the constitutive crude drugs on several cancer cell-lines, thymocytes, splenocytes and 3T3 cells. The DYH consists of Coptidis Rhizoma, Scutellariae Radix, Phellodendri Cortex, Gardeniae Fructus, Gentianae scabrae Radix, Indigo pulverata Levis, Aloe, Rhei Rhizoma, Moschus, Saussureae Radix and Angelicae Gigantis Radix. The cytotoxicity was determined by MTT method. The DYH inhibited the proliferation of MOLT-4, K562, HL-60, Jurkat, L1210, P815, S180 and Yac-1, thymocyte, splenocyte and 3T3 cells. The cytotoxicity of Coptidis Rhizoma on the cancer cell-lines was the most potent in the constitutive crude drugs. The proliferation of cancer cell-lines was partly inhibition and partly increase by the treatment of Scutellariae Radix, Gardeniae Fructus, Gentianae scabrae Radix, Indigo pulverata Levis, Aloe, Rhei Rhizoma, Moschus and Angelicae Gigantis Radix. Phellodendri Cortex and Saussureae Radix had a poor cytotoxicity on cancer cell-lines. Coptidis Rhizoma and Phellodendri Cortex inhibited the proliferation of thymocyte, splenocyte and 3T3 cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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