Molecular imprinting has now been established as a technique which allows the creation of tailor-made binding sites for many classes of compounds. MIPs were prepared by covalent and non-covalent chemical bonding systems, by interactions between functional monomer and template. The shape of MIP is divided to particle and membrane. MIP membranes can be prepared by surface imprinting, in-situ polymerization, wet phase inversion and the dry phase inversion method. MIPs have been mainly used for analytical separation and biosensor systems to separate and detect chiral compounds and materials with similar structures. However the application of MIP by the chemical industries is still in its infancy stages. This review summarizes the preparative characteristics and applications of MIP with respect to chiral separations and biosensors.
Nystatin, a polyene antifungal antibiotic, is a cholesterol sequestering agent. The antifungal agent alters composition of the plasma membrane of eukaryotic cells, whereas its effects on cells are poorly investigated. In the current study, we investigated the question of whether nystatin was able to induce expression of macrophage inflammatory protein-1 (MIP-1). THP-1 cells rarely express MIP-$1{\alpha}$ and MIP-$1{\beta}$, however, upon exposure to nystatin, significantly elevated expression of MIP-$1{\alpha}$ and MIP-$1{\beta}$ was observed in a dose-dependent fashion at the messenger and protein levels. Cellular factors activated by nystatin as well as involved in nystatin-induced expression of MIP-1 proteins were identified in order to understand the molecular mechanisms of action of the anti-fungal agent. Treatment with nystatin resulted in enhanced phosphorylation of Akt, ERK, p38 MAPK, and JNK. Abrogation or significant attenuation of nystatin-induced expression of MIP-$1{\alpha}$ and MIP-$1{\beta}$ was observed by treatment with Akt inhibitor IV, LY294002, and SP6001250. Inhibition of ERK or p38MAPK using U0126 and SB202190 did not lead to attenuation of MIP-1 expression. In addition, inhibitors of protein kinase C, such as GF109203X and Ro-318220, also attenuated expression of MIP-1. These results indicate that nystatin is able to activate multiple cellular kinases and, among them, Akt and JNK play primary roles in nystatin-induced expression of MIP-1 proteins.
Bacterial surface display systems have been developed for various applications in biotechnology and industry. Particularly, the discovery and design of anchoring motifs is highly important for the successful display of a target protein or peptide on the surface of bacteria. In this study, an efficient display system on Escherichia coli was developed using novel anchoring motifs designed from the E. coli mipA gene. Using the C-terminal fusion system of an industrial enzyme, Pseudomonas fluorescens lipase, six possible fusion sites, V140, V176, K179, V226, V232, and K234, which were truncated from the C-terminal end of the mipA gene (MV140, MV176, MV179, MV226, MV232, and MV234) were examined. The whole-cell lipase activities showed that MV140 was the best among the six anchoring motifs. Furthermore, the lipase activity obtained using MV140 as the anchoring motif was approximately 20-fold higher than that of the previous anchoring motifs FadL and OprF but slightly higher than that of YiaTR232. Western blotting and confocal microscopy further confirmed the localization of the fusion lipase displayed on the E. coli surface using the truncated MV140. Additionally the MV140 motif could be used for successfully displaying another industrial enzyme, α-amylase from Bacillus subtilis. These results showed that the fusion proteins using the MV140 motif had notably high enzyme activities and did not exert any adverse effects on either cell growth or outer membrane integrity. Thus, this study shows that MipA can be used as a novel anchoring motif for more efficient bacterial surface display in the biotechnological and industrial fields.
Biomimetic terpene sensors which have high sensitivity and stability have been fabricated using moleculary imprinted polymer (MIP) technology. Since it is impossible to make a resistive type sensor due to the high resistance of MIP, we improved the sensor by adding conductive polymers. We investigated the sensitivity of resistive type sensors with nano particles depending on the amount of conductive polymers. The MIP membrane contained the methacrylic acid as functional monomer and ethylene glycol dimethacrylate as cross linker, which formed specific cavities originated by the target terpene molecules. The mixture of MIP and the conductive polymer was coated on the patterns of interdigit electrodes on the alumina substrate. The fabricated sensors showed their highest specific sensitivities exposed to 500 ppm target gases : limonene 0.055 at 40% of amount of conductive polymers and geraniol $5.84{\times}10^{-4}$ at 20% of amount of conductive polymers. In conclusion, we found that the terpene sensors are affected by the target molecules, functional monomers and the conductive polymers.
The tomato ripening associated membrane protein (TRAMP) (Fray et al., 1994) is a member of the major intrinsic protein (MIP) family, defined as channels facilitating the passage of water and small solutes through membranes. During normal fruit ripening the TRAMP mRNA levels were increased whereas the expression levels of TRAMP in low ethylene ACO1-sense suppressed lines, Nr and rin fruits, were lower than at the breaker stage of wild type fruit. TRAMP mRNA is inhibited by $LaCl_3$, which is an inhibitor of $Ca^{2+}$-stimulated responses, treatment but drought condition did not affect TRAMP expression. The levels of TRAMP mRNA transcripts were substantially higher in the dark treated seedlings and fruits. These suggest that TRAMP function as a water channel may be doubted because of several reasons; no water content was changed during ripening in wild type, antisense and overexpression lines, TRAMP expression under light condition was lower than dark condition and TRAMP expression was not changed in drought condition. Co-suppression plant, 3588 was one of sense suppression lines, which contain CaMV 35S promoter and sense pNY507 cDNA, produced small antisense RNA, approximately 21-25 nucleotides in length, mediated post-transcriptional gene silencing. Therefore, TRAMP expression was inhibited by small antisense and multiple copies might induce gene silencing without any production of double strand RNA. Total seven selected volatile productions, isobutylthiazole, 6-methyl-5-hepten-2-one, hexanal, hexenal methylbutanal, hexenol, and methylbutanol, were highly reduced in sense line whereas total volatile production was increased in TRAMP antisense line. These results suggested TRAMP might change volatile related compounds.
협심증과 급성 심근 경색증 등 관상동맥 질환이 급증함에 따라 병원 밖이나 응급실 중환자실 심도자 검사실 등에서 급성 심장 쇼크에 빠지거나 심장마비가 발생하는 경우가 많이 발생하고 있다. 이러한 심혈관 질환에는 정류성 체외생명보조장치가 널리 사용되고 있으나 이러한 장치는 그 무게와 크기로 인해 응급상황에 대처할 수 있는 능력이 작고, 막형 산화기의 전단에 인가되는 압력이 크며, 시스템 구성상 혈액이 공기에 노출된다. 박동성 혈류를 공급하기 위하여 단일 구동펌프를 이용한 시도가 있었으나 회로내의 순간 압력 상승 등으로 인한 여러 가지 단점들이 발생한다. 이러한 기존의 체외생명보조장치의 단점을 극복하고자 한국형 인공심장의 원리를 이용한 이중 박동식 혈액펌프를 개발하였다. 이 시스템의 구동원리는 막형산화기를 중심으로 전.후에 혈액펌프를 위치하여 혈액펌프를 Actuator가 한번씩 짜주는 것이다. 이런 방법으로 구동할 경우 막형산화기 후단에 있는 펌프가 음압을 동시에 일으킴으로, 막형산화기에 인가되는 큰 양압을 줄인다는 가정 하에 시스템을 개발한 것이다. 생체외 실험을 통하여 각 부분의 압력을 측정하고, 총 12건의 동물실험을 통하여 그 장점을 검증하였다
Background and Objectives: Sinusitis, referring to an inflammatory disease that occurs on the mucus membrane inside the sinus, is one of the most common diseases in the otorhinolaryngology area. In oriental clinic, Sunbanghwalmyungeum (SHE) has been used as a primary prescription to treat inflammatory diseases and intumescence and to treat sinusitis. The aim of this study was to investigate the anti-inflammatory and anti-allergic effects of SHE on acute sinusitis induced mice. Materials and Methods: BALB/c mice were divided into three groups: the normal group, the group inoculated with S. pneumoniae which caused them allergic rhinitis (control group), and the group treated with the SHE extract after it was treated the same as the control group (sample group). We investigated the inhibition of Th 2 cell differentiation by SHE and the suppression of NF-${\kappa}B$ activation. Results: NF-${\kappa}B$ activation was suppressed, and iNOS & COX-2 production were inhibited by SHE in acute sinusitis. IL-4 and STAT 6 also appeared to be suppressed. The number of eosinophils in the sample group noticeably decreased when compared to the control group. In the general morphologic change, the increase of damaged respiratory ciliated epithelium & eosinophil's infiltration were decreased in the sample group. Goblet cells were maintained in the sample group. MIP-2 and HSP-70 decreased in the sample group. Apocrine secretion decreased in the sample group. Conclusion: The results suggest that SHE is significantly effective in the treatment of inflammation caused by acute sinusitis through the suppression of NF-${\kappa}B$ activation and the inhibition of Th 2 cell differentiation.
Md Atikur Rahman;Sang-Hoon Lee;Yowook Song;Hyung Soo Park;Jae Hoon Woo;Bo Ram Choi;Ki-Won Lee
한국초지조사료학회지
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제43권3호
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pp.168-176
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2023
Silicon (Si) has the potential to improve plant growth and stress tolerance. The study aimed to explore Si-involving plant responses and molecular characterization of different Si-responsive genes in alfalfa. In this study, the exogenous supplementation of Si enhanced plant growth, and biomass yield. Si-acquisition in alfalfa root and shoot was higher in Si-supplemented compared to silicon deficient (-Si) plants, implying Si-acquisition has beneficial on alfalfa plants. As a consequence, the quantum efficiency of photosystem II (Fv/Fm) was significantly increased in silicon-sufficient (+Si) plants. The quantitative gene expression analysis exhibited a significant upregulation of the Lsi1, Lsi2, Lsi3, NIP5;1, and NIP6;1 genes in alfalfa roots, while BOR1, BOR4, NIP2, and NIP3 showed no significant variation in their expression. The MEME results further noticed the association of four motifs related to the major intrinsic protein (MIP). The interaction analysis revealed that NIP5;1 and Lsi1 showed a shared gene network with NIP2, BOR1, and BOR4, and Lsi2, Lsi3 and NIP3-1, respectively. These results suggest that members of the major intrinsic proteins (MIPs) family especially Lsi1, Lsi2, Lsi3, NIP5;1, and NIP6;1 genes helped to pass water and other neutral solutes through the cell membrane and those played significant roles in Si uptake and transport in plants. Together, these insights might be useful for alfalfa breeding and genome editing approaches for alfalfa improvement.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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