The studies on the potentiality of biomonitoring heavy metal pollution in coastal region of industrial complex were performed to investigate the heavy metal accumulation and induction of metal-binding protein (MBP) as detoxification process using Rumex maritimus. Bioconcentration in organs and MBP in root of R. maritimus was investigated for the research of the tolerance of heavy metals. The bioconcentration of cadmium and zinc in organs showed 3.6-8.0 times in root higher than in shoot, so it was found that heavy metal accumulated selectively in root. MBP increased absorbance in 254 nm and decreased in 280 nm, because it was composed of high cystein content and low aromatic acids, so absorbance had large difference between 254 nm and 280 nm. The existence of MBP in the 10-20 fraction was ascertained with anion exchange chromatography and it was identified that concentration of heavy metal increased according as an exposure concentration of medium increased in QAE Sephadex A-25 elution profile. These results suggested that MBP could play a role in biomarker determining the bioconcentration of plant. This study demonstrated a possibility that removal ability of heavy metal of R. maritimus resulted from detoxification process and MBP could be utilized as a biomarker of heavy metal pollution.
향상된 인디고이드 생산능력을 갖는 코리네박테리움 유래의 변이 플라빈-함유 모노옥시게나제(cFMO)를 개발하기 위하여, cFMO 효소의 상동성모델을 이용하여 말토오스-결합단백질(MBP)과 융합된 4가지 변이체(F170Y, A210G, A210S, T326S)를 제작하고 그 생화학적 특징을 밝혔다. 정제된 MBP-T326S는 최적 활성을 위하여 야생형보다 고농도의 FAD ($100{\mu}M$)를 요구하며, $100{\mu}M$의 FAD 첨가조건에서 $k_{cat}/K_m$이 3.8배 증가되었다. 인돌 옥시게나제 활성은 야생형의 63-77%를 나타냈다. MBP-T326S는 기질이 존재하지 않을 경우 쓸모없는 NADPH 산화효소 활성이 매우 낮은 수준을 보여주었다(21-24%). T326S이외의 변이 단백질들은 야생형에 비하여 $K_m$은 비슷하며 $k_{cat}/K_m$은 증가하였다. MBP-F170Y와 -A210S 변이단백질은 인돌 옥시게나제 활성이 각각 3.1배, 2.9배 증가하였다. 2.5 g/l의 트립토판을 함유한 LB배지에서 인디고이드 생산을 시험했을 때, 야생형 cFMO를 함유한 대장균은 684 mg/l의 인디고와 104 mg/l의 인디루빈을 생산한 반면, T326S를 함유한 세포는 1,040 mg/l의 인디고와 112 mg/l의 인디루빈을 생산하였다. 이전의 결과인 Methylophaga 유래의 FMO를 발현하는 대장균에서 가장 높은 수준인 920 mg/l의 인디고를 생산한 것과 비교하면, 본 연구결과는 인디고 생산이 13% 높은 수준이였다. 상동성 모델링에 기반한 cFMO의 단백질공학은 인디고이드 생산균을 개발하는데 보다 더 논리적인 전략을 제시하였다.
In recent years, experimental evidence have been suggested that melatonin has either contractive or relaxing effects on the vascular smooth muscle in vitro. But the effect of melatonin on the cardiovascular system in vivo had been emphasized about the hypotensive effect. In this work, we found not only hypotensive effect but also hypertensive effect of melatonin in rats and attempted to determine the mechanism of these effects elicited by melatonin. Regadless of concentration, melatonin(0.002~5 mg/kg) produced increase in mean blood pressure (MBP) in 36% (54/150 cases) and decrease in mean blood pressure in 64%(96/150 cases). As a whole melatonin caused an increase or a decrease in MBP without compensatory decrease or increase in heart rate. The melatonin-induced hypertension was abolished by the pretreatment of phenoxybenzamine, a ${\alpha}$-adrenoceptor antagoninst. The melatonin-induced hypotension was abolished by the pretreatment of propranolol, a ${\beta}$-adrenoceptor antagonist, ODQ, a NO-sensitive guanylate cyclase inhibitor, or nifedipine, a L-type $Ca^{2+}$ channel blocker, but not by bilateral cervical vagotomy. The results indicate that melatonin-induced hypertension may be related to ${\alpha}$-adrenoceptor stimulation and melatonin-indued hypotension may be related to ${\beta}$-adrenoceptor stimulation, inhibition of $Ca^{2+}$ channel and/or activation of guanylate cyclase.
An, Chang-Nam;Shin, Kwang-Soon;Yun, Hyo-In;Park, Jong-Il;Cha, Shin-Woo;Shin, Hyeong-Soon;Kim, Chul-Joong
Toxicological Research
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제13권4호
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pp.353-357
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1997
The possibility of the allergic encephalomyelitis caused by the combined vaccine (KGCC95VI) for the prophylaxis against Japanese encephalitis and Hantaan virus infection, recently developed by Korea Green Cross Corporation, was investigated in the Hartley guinea pigs. The KGCC-95VI was administered to the guinea pigs subcutaneously to sensitize the animals three times at one month intervals. There were no clinical signs or gross pathological findings. There were no abnormal histopathological findings at cerebrums, cerebellums, brain stems and the spinal cords. The concentration of myelin basic protein was 1.10 ng/dose quantified by ELISA, which met the guide4ine of below 2 ng/ml/dose recommended by American Society of Health -System Pharmacists(AHPS) Drug Information. Accordingly, the KGCC-95VI is considered not to induce any allergic immune responses which may lead to the experimental allergic encephalomyelitis.
Tempting to further understand the molecular mechanism of pharmacological action of ethanol, we evaluated effects of phosphatidylethanol (PET) on inositol 1,4,5-triphosphate (IP3) level and protein kinase C (PKC) activity in cultured NG108-15 cells. PET increased intracellular concentration of IP$_3$. PET incorporation into membranes of NG108-15 cells had no effect on the phosphorylation of the PKC-specific substrate MBP$\_$4-14/, thus indicates that PET does not affect PKC activity in this system.
Journal of Advanced Marine Engineering and Technology
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제39권1호
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pp.63-67
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2015
백색 발광 다이오드는 조명과 통신이 동시에 가능하여 많은 주목을 받고 있다. 본 논문에서는 고출력 백색 LED와 저가형 광 다이오드, 프레넬 렌즈로 구성된 가시광 통신의 특성을 연구하였다. LED 구동회로는 고전력 MOSFET과 MOSFET 전용 구동칩을 사용하여 LED가 고속으로 온오프 되게 스위칭 하였다. 사용한 LED의 대역폭은 8 MHz로 측정되었다. 그러나 실내 조명환경을 고려한 500 lx 조도 하에서 통신 속도는 PIN 광 다이오드인 SFH213의 낮은 스펙트럼 감도와 낮은 신호전력으로 인해 1 Mbps까지만 가능하였다. 시스템 대역폭을 확장하기 위하여 프레넬 렌즈를 적용한 경우 수신단의 PIN 광 다이오드에 LED의 집광된 광 전력이 입사되도록 하여 LED의 대역폭까지 변조될 수 있었다. 프레넬 렌즈에 의한 신호대 잡음비는 40 dB 이상 향상되었다.
Dialkylated phthalates have been commonly used as plasticizers and a variety of applications. Phthalate diesters have been shown to be developmental and reproductive toxicants. It is very difficult to exactly estimate the dose of dialkylated phthalates taken up by the general population because of environmental contamination. Urinary metabolites of phthalates enabled to estimate internal exposure. The objective of this study was quantitative determination of phthalate metabolites by LC/MS/MS with on-line cleanup method to analyze phthalate metabolites in Korean children's urine. We employed LC/MS/MS with on-line enrichment and column-switching techniques for this biological monitoring. Metabolites determined were 4 primary metabolites; MEHP, MnBP, MiBP, MEP and 2 secondary metabolites of DEHP; 5-OH-MEHP), 5-oxo-MEHP. We analyzed children's urine from 30 boys and 30 girls. The method detection limit of phthalate metabolites were 0.03 ng/mL for MEP, 1.05 ng/mL for MBP, 0.22 ng/mL for MEHP, 0.15 ng/mL for 5-OHMEHP and 0.16 ng/mL for 5-oxo-MEHP, respectively. Switching Column LC/MS/MS was proven to be a useful tool to determine metabolites of phthalate diesters in human urine. The correlation among phthalate metabolites was very high and statistically significant, except MEP. The children's age (months) was negatively correlated to the concentration of phthalate metabolites. The geometric mean concentration of phthalate metabolites (mg/g creatinine) in children's urine were 25.5 for MEP, 130.3 for MnBP, 56.8 for MiBP, 19.5 for MEHP, 85.6 for 5-OH-MEHP and 83.1 for 5-oxo-MEHP, respectively. Levels of estimated daily intake of parent phthalate compounds (${\mu}g$/kg bw/day) were 0.8 for DEP, 5.0 for DnBP, 1.9 for DiBP and $8.9{\sim}14.2$ for DEHP, respectively. Estimated daily intake for DEP and DiBP were lower than those of other studies but the value for DEHP was higher than that of other study.
Protein phosphorylation is one of the major mechanisms by which eukaryotic cells transduce extracellular signals into intracellular responses. Calcium/calmodulin ($Ca^{2+}/CaM$)-dependent protein phosphorylation has been implicated in various cellular processes, yet little is known about $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinases (CaMKs) in plants. From an Arabidopsis expression library screen using a horseradish peroxidase-conjugated soybean calmodulin isoform (SCaM-1) as a probe, we isolated a full-length cDNA clone that encodes AtCK (Arabidopsis thaliana calcium/calmodulin-dependent protein kinase). The predicted structure of AtCK contains a serine/threonine protein kinase catalytic domain followed by a putative calmodulin-binding domain and a putative $Ca^{2+}$-binding domain. Recombinant AtCK was expressed in E. coli and bound to calmodulin in a $Ca^{2+}$-dependent manner. The ability of CaM to bind to AtCK was confirmed by gel mobility shift and competition assays. AtCK exhibited its highest levels of autophosphorylation in the presence of 3 mM $Mn^{2+}$. The phosphorylation of myelin basic protein (MBP) by AtCK was enhanced when AtCK was under the control of calcium-bound CaM, as previously observed for other $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinases. In contrast to maize and tobacco CCaMKs (calcium and $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinase), increasing the concentration of calmodulin to more than $3{\mu}M$ suppressed the phosphorylation activity of AtCK. Taken together our results indicate that AtCK is a novel Arabidopsis $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinase which is presumably involved in CaM-mediated signaling.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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