Protein phosphatase 2A was obtained from a cytosolic fraction of bovine brain homogenate. The phosphatase activity using phosphorylated histone Hl as substrate was suppressed in the presence of liposomes composed of dipalmitoylphosphatidylcholine(DPPC) or the mixture of phosphatidylserine and DPPC. The binding of protein phosphatase to liposome was indicated by the facts that the phosphatase activity of the supernatant of protein phosphatase/multilayer vesicle mixture was decreased with increasing amount of liposome, and that [$^{125}I$]-labeled protein phosphatase was coeluted with liposome. However, the affinity of the protein for phospholipid membrane was not so high. On the other hand, okadaic acid and liposome reduced the phosphatase activity synergistically, which means that okadaic acid binds neither to lipid membrane nor to the membrane-associated phosphatase, The inhibitory effect of liposome was, therefore, ascribed to association of the protein phosphatase 2A with the lipid bilayer membrane.
This study determined hepatic microsomal lipid peroxide values glucose 6-phosphatase NA-DPH-cytochrome P450 reductase and cytosolic glutathione S-transferase activites to examine the effects of methyl group deficiency on hepatic lipid peroxidation in rats treated with diethylni-trosamine(DEN) and 2-acetylamionfluorene(AAF) Weanling sprague Dawley male rats were fed the diet with methyl group supplemented or deficient. Two weeks after feeding rate were injected with a single of 200mg/kg body weight DEN intraperitoneally and after four weeks 0.02% AAF containing diets were fed for two weeks. Animals were sacrificed at 6th week. Microsomal lipid peroxide values were tended to increase in methyl group deficiency(MD). Especially in case of carcinogen tratments lipid peroxide values were increased significantly in MD. Microsomal glucose 6-phophatase activities were decreased by MD and carcinogens and in MD with carcinogen group (MD+C) the enzyme activites were the lowest Glucose 6-phosphatase activities were negatively correlated with lipid peroxidation. Microsomal NADPH-cytochrome P450 reductase activities were the highest in MD+C and correlated positively with lipid peroxidation. Cytosolic glutathione S-transferase activities were the highest in MD+C Methyl group deficiency induces lipid peroxidation especially in case of being exposed to carcinogens. Therefore the results suggest that lipid peroxidation may be one of the meachanisms of carcinogensis by methyl group deficiency.
This study examines the effects of choline deficiency and 2-acetylaminofluorene(2-AAF) on the lipid peroxide values, glucose 6-phosphatase(G6Pase) and glutathione S-transferase (GST) activities in rats fed different dietary fats. Weanling Sprague Dawley male rats fed the diets containing 15% beef tallow or 15% corn oil with vitamin fortification mixture or choline free vitamin mixture for 10 weeks. At 3th and 5th week, 2-AAF was injected twice each week intraperitoneally. Total 2-AAF injection was four times. 2-AAF and choline deficiency increased lipid peroxidation in corn oil groups, so the role of 2-AAF and choline deficiency in lipid peroxidation was more important in corn oil groups than beef tallow groups. G6Pase activities tended to be decreased by 2-AAF in choline deficient groups, and in corn oil groups, the enzyme activities were decreased significantly in all subgroups compaired to beef tallow groups. GST activities were increased by 2-AAF in beef tallow groups and choline deficiency in corn oil groups, and might defence against carcinogen metabolism and lipid peroxidation.
This study was done to investigate effects of ${\gamma}$-irradiated pork feeding on the formation of glutathione S-transferase placental form positive (GST-P$^{+}$) foci, lipid peroxidation, cytochrome P450 system and microsomal glucose 6-phosphatase activity in diethylnitrosamine (DEN)-initiated rat hepatocarcinogenesis. Weaning Sprague-Dawley male rats were fed the diet containing ${\gamma}$-irradiated ground pork at the dose of 0, 3, 10, 30 kGy as a 20% of protein source for 8 weeks. One week after feeding, rats were intraperitoneally injected twice with a dose of DEN (50 mg/kg BW). As a promote.,0.05%phenobarbital was fed in drinking water from one week after DEN treatment until the end of experiment. At the end of 8th week, rats were sacrificed and hepatic GST-P$^{+}$ foci, microsomal malondialdehyde (MDA) and conjugated diene contents were determined. In addition, cytochrome P450 content and the activities of NADPH cytochrome P450 reductase and glucose 6-phosphatase were also measured. There was no significant effect by gamma irradiation on microsomal MDA content, conjugated diene, cytochrome P450 content and activities of NADPH cytochrome P450 reductase and glucose 6-phosphatase. However with DEN treatment, microsomal MDA content showed a increasing tendency. Cytochrome P450 content was also significantly increased while microsomal glucose 6-phophatase activity was significantly decreased with DEN treatment. However the activity of NADPH cytochrome P450 reductase was not affected. An interesting finding in this study was that the number and area of hepatic GST-P$^{+}$ foci of rats fed gamma irradiated pork were tended to be decreased by high dose of irradiation, but were not significantly different. These results might imply that the consumption of low dose of gamma irradiated pork does not affect the formation of hepatic GST-P$^{+}$ foci and lipid peroxide and membrane stability.ability.
Effects of ${\alpha}$-tocopherol and perilla oil on the toxicity of polychlorinated biphenyls (PCB) in male rat were studied. Rats were fed ad libitum for 6 weeks with the animal diet which contains PCB 30 ppm and 100 ppm. Perilla oil (0.5 g/kg body weight) and ${\alpha}$-tocopherol (30 mg/kg body weight) were administered intraperitoneally twice a week for 6 weeks. Rats fed with PCB showed enlargement of liver and spleen, increase in aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, sereum lipid and cytochrome P 450 and decrease in body weight and glutathione. When perilla oil was administered to rats fed with PCB increase in aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, serum lipid and cytochrome P45O and decrease in body weight and glutathione were significantly augmented, compared to rats fed with PCB alone. This means that perilla oil potentiates the toxicity of PCB. On the other hand when ${\alpha}$-tocopherol was administered to rats fed with PCB increase in aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, serum lipid and cytochrome P45O and decrease in body weight and glutathione were signigicantly reduced, compared to rats fed with PCB alone. This means that u-tocopherol reduces the toxicity of PCB. From the above results, it may be concluded that PCB is metabolized by microsomal mixed function oxidase and the metabolite causes the toxicity and microsomal glutathione plays a role of protection on the toxicity of PCB.
The concentration of amino acids, total nitrogen, trehalose, lipids and the activities of respiratory, acid$\cdot$alkaline phosphatase, glutamic oxalozcetic transaminase and glutamic pyruvic transaminase during larval stage in Pine leaf gall midge, Thecodiplosis janensis Uchi. et Inouye were measured using Paper chromatographic method, micro-Kjeldahl method, Thin layer chromatographic method, Warburg's manometric method, Bessey-Lowry method and Reitman-Frankel method, respectively. Healthy specimens )yore chosen as samples of each larval stages; alrva in gall and larva in soil. Amino acids present in the alcoholic extracts were alanine, glutamic acid, glycine, histidine, methionine, proline, threonine, tryptophan and valine. The total nitrogen concentration reached to 31.348mg/g during the larva in gall and the larval stage in soil of the value was decreased to 29.027mg/g. The hemolymph sugar, trehalose value for larva in soil was about two times of the value for larva in gall. Total lipid, phospholipid,monoacylglycerol, triacylglycerol, sterol, free fatty acid and ester cholesterol were identified at larval stages in gall and soil. Triacylglycerol concentration reached high level in contrast with other lipid contents during larvae in gall and larva in soil. Free fatty acid, sterol except decreased lipids during larval stage in soil. Endogenous respiration, succinate of respiratory activities decreased at larval stage in soil compare with larva in gall. The activities of acid phosphatase decreased larval stage in soil but the activities of alkaline phosphatase increased remarkably. The activities of glutamic oxaloacetic transaminase and glutamic pyruvic transaminase reached high level of the larva in gall.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.28
no.3
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pp.638-645
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1999
This study was done to investigate effects of ${\gamma}$ irradiated beef feeding on the formation of gluta thione S transferase placental form positive(GST P+) foci, lipid peroxidation, cytochrome P450 system and microsomal glucose 6 phosphate activity in diethylnitrosamine(DEN) initiated rat hepatocarci nogenesis. Weaning Sprague Dawley male rats were fed the diet containing ${\gamma}$ irradiatied ground beef at the dose of 0, 3, 5kGy as a 20% of protein source for 8 weeks. One week after feeding, rats were intraperitoneally injected twice with a dose of DEN(50mg/kg BW). As a promoter, 0.05% phenobarbital was fed in drinking water from one week after DEN treatment until the end of experiment. At the end of 8th week, rats were sacrificed and hepatic GST P+ foci, microsomal malondialdehyde(MDA) and conjugated diene contents were determined. In addition, cytochrome P450 content and the activities of NADPH cytochrome P450 reductase and glucose 6 phosphatase were also measured. There was no significant effect by gamma irradiation on microsomal MDA content, conjugated diene, cytochrome P450 content and activities of NADPH cytochrome P450 reductase and glucose 6 phosphatase. However with DEN treatment, microsomal MDA content and conjugated diene contents were significantly changed. Cytochrome P450 content was also significantly increased while microsomal glucose 6 phophatase activity was significantly decreased with DEN treatment. However activity of NADPH cytochrome P450 reductase was not affected. An interesting finding in this study was that the number and area of hepatic GST P+ foci of the rats fed gamma irradiated beef were significantly(p<0.05) lower than those of the control. Such a lowering effect on GST P+ foci formation was highest at the dose of 3kGy than others. Overall results suggest that the consumption of low dose of gamma irradiated beef does not affect the formation of lipid peroxide, cytochrome P450 system and membrane stability.
The effects of ginseng saponins, gypsophila saponin, sodium dodecyl sulfate(SDS), and Triton X-100 on membrane $K^+-dependent$ phosphatase activity which is lipid dependent and represents dephosphorylation step of the complete Na+, $K^+-ATPase$ reaction were investigated in this study to elucidate whether the effects of ginseng saponins are due to the detergent action, using sarcolemma enriched preparation isolated from dog ventricle. $Na^+$, $K^+-ATPase$ and $K^+-dependent$ phosphatase activities of cardiac sarcolemma were about $143\;{\mu}mol$ Pi/mg protein/hr and $34\;{\mu}mol$ p-nitrophenol/mg protein/hr, respectively. While ginseng saponins (triol>total>diol) inhibited $K^+-dependent$ phosphatase activity, gypsophila saponin, and low dose of SDS($0.4\;{\mu}g/{\mu}g$ protein), and Triton X-100 ($0.6\;{\mu}g/{\mu}g$ protein) increased the enzyme activity, indicating disruptive effect of detergents on membrane barriers. The activating effect of low doses of Triton X-100 on membrane $K^+-dependent$ phosphatase appeared at concentration decreasing light scattering. However, the inhibitory effect of ginseng saponin appeared before a decrease in light scattering. These results suggest that low concentrations of ginseng saponins inhibit the membrane $K^+-dependent$ phosphatase by interacting directly with enzyme before membrane disruption.
Panax ginseng occupies an important role in the folk medicine of China, Korea and Japan. The present study was undertaken to determine the radioprotective efficacy of ginseng root extract in the liver of Swiss albino mice. The animals were divided into 4 groups. Group I-Only vehicle was administered. Group II-The animals received 10 mg/kg body weight ginseng root extract i.p. for 4 consecutive days. Group III-Animals were irradiated with 8Gy gamma radiation at the dose rate of 1.69 Gy/min at the distance of 80 ems. Group IV-Animals were given by ginseng root extract (10 mg/kg body weight) continuously for 4 days and on 4th day they were irradiated with 8 Gy gamma radiation after 30 min. The animals from above groups were autopsied on 1,3,7,14 and 30 days. Biochemical estimations of phosphatases (acid & alkaline), LDH (lactate dehydrogenase), LPO (lipid peroxidation) and GSH (reduced glutathione) in liver and SGOT (serum glutamate oxaloacetate transaminase), SGPT (serum glutamate pyruvate transaminase) and alkaline phosphatase in serum were done. In ginseng treated group acid phosphatase (ACP), alkaline phosphatase (ALP), LPO and LDH in liver and SGOT, SGPT and alkaline phosphatase in serum did not show any significant alteration. However, a significant increase in GSH content in liver was recorded. In irradiated group there was a significant increase in ACP, ALP and LPO content in liver and SGOT & SGPT in serum was noted. Whereas, a significant decrease was recorded in GSH and LDH activity in liver and alkaline phosphatase activity in serum. Pretreatment of ginseng with radiation significantly alters the biochemical parameters in liver and serum. A significant decline in ACP, ALP activity and LPO content in liver and SGOT and SGPT activity in serum was observed. However, a significant increase in GSH content and LDH activity in liver and ALP activity in serum was estimated. The present study suggests that pretreatment of ginseng before irradiation significantly protects the liver and maintains the enzyme activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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