This study was carried out to examine in vitro first whether the storage proteins, which the fat bodies of last larvae from Hyphantria cunea secrete into haemolymph, can be uptaked by the fat body cells of prepupa and then how the uptaked storage proteins can be accumulated in the fat body cells, if uptaken. The fat bodies which had been isolated from last instar larvae were cultured in 1 ml of Grace's insect medium containing $50{\mu}l$ of $^{3}H$-leucine (5.0 mCi/mol, Dupont) at $28{\pm}2^{\circ}C$ for 6 hrs. After the homogenates of the cultured fat bodies were centrifuged at 10,000 rpm for 10 minutes, the proteins included in the supernatant were separated by polyacrylamide gel electrophoreses (non-SDS, 6%). The next treatment of the electrophoresed gel was followed by rinsing. A storage protein band of several bands in the rinsed gel was sliced off. With elution of sliced storage protein bands in Tris-glycine buffer, the purification of radioactive storage proteins from fat bodies was finished. After the purified radioactive storage proteins were added in Grace's insect midis containing fat bodies of the prepupae, they were cultured for the randomly following minutes given as 3, 5, 7, 10, 15, 20 and 30 and for the randomly following hours given as 1, 2, 3 and 4 respectively. The double fixations of the cultured fat bodies in aldehyde and $OsO_4$, were followed by preparation of ultrathin sections from Epon-Araldite blocks through dehydration and embedding. The electron microscope autoradiographic treatment of all prepared sections were performed by the dipping method (Kim et al., 1987). The finally prepared specimens were examined with electron microscope. The fat body cells of the prepupa could be found to uptake the storage preteins of the last instar larvae, which were included in the culture medium, mostly by formation of coated vesicles. The in vitro uptake of the storage proteins actively occurred by 30 minutes after the addition of purified storage proteins in the culture medium. After culture for 7 minutes with the storage proteins, the uptaked radioactive storage proteins labelled a number of lysosomal granules. After culture for 20 minutes with the storage proteins, the radioactive storage proteins were finally incorporated and accumulated in lipid droplets and protein granules. The frequency in the fat body cell of radiolabelled lipid droplets occurs approximately 60%, while the frequency, in which the radiolabelled protein granules occurs in a fat body cell, is approximately 40%.
열대지방에서 재배되는 18종의 콩종자의 구조적인 특성을 분류하기 위하여 그 미세구조를 주로 광학현미경으로 조사하였다. vicieae에 속하는 종실들은 많은 단일전분입자들로 구성된 자엽세포구조를 갖는 starch-rich legume이였으며, phaseoleae중에서는 benas(phaseolus), cow pea, green gram(vigna), hyacinth bean(dolicholus)이 starch-rich legume이였다. 한편 soybean(glycine), winged bean(psophocarpus)는 자엽세포가 대부분 protein body로 구성된 protein-rich legume이고 yam bean (pachyrrhizus)와 cluster bean(cyamopsis)에서는 protein body 보이는 구형물질로 이루어진 자엽세포 구조를 볼 수 있었다. 또한 green gram과 winged bean은 soybean에 비하여 두꺼운 세포벽을 갖고 있었으며 pit-pair가 관찰되었다. Lipid body는 winged bean과 soybean에서 볼 수 있었다. starch-rich legume들은 팥고물 제조과정에서 전분입자들이 파괴되지 않음으로써 특징적인 조직감을 부여하는 red bean이나 benas와 같은 phaseolus의 대체 자원으로 제시될 수 있었다.
Lee, Chan-Hee;Chae, Hyun-Sik;Lee, Seung-Hoon;Kim, Han Soon
Journal of Ecology and Environment
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제38권1호
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pp.67-74
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2015
Three strains of the green microalga Botryococcus braunii (JJS, KCM, and KJD) were isolated from different water bodies in Korea and grown as batch cultures in the laboratory. The effects of different growth media and temperatures on the growth rate were investigated, as well as the effect of temperature on the total lipid content and lipid profile. All three strains had the highest growth rates in BG-11 medium and at $25^{\circ}C$. Maximal lipid production ($gL^{-1}$) was at $30^{\circ}C$ in the JJS strain and at $25^{\circ}C$ in the KCM and KJD strains. However, all the three strains produced the greatest percent dry weight of total lipids at $15^{\circ}C$ and had the lowest percent dry weight of total lipids at $25^{\circ}C$. In general, oleic acid, linolenic acid, and behenic acid were the most common fatty acids in all three strains. However, the three strains varied considerably in their fatty acid profiles at different culture temperatures.
The fat bodies of cabbage worm (Pieris rapae) and silk worm (Bomyx mori) during metamorphosis was comparatively studied by electron microscope. 1. Cell oranelles: Golgi apparatus were not observed in both species. It is observed that RER of cabbage worms initiate to degenerate in prepupa stage with complete degeneration at adult stage, while that of silk worms shows similar degenerative pattern. However, mitochondria of cabbage worms are transformed into autophagic vacuole from prepupa stage until adult stage whereas those of silk worm shows a decrease in number in prepupa stage but maintains a certain level until adult stage. 2. Storage substance in cell: Lipid droplets in cabbage worms were observed to increase in numbers during larval stage but afterward decrease in number with an enlargement in size. However immediately after their pupal stage, they almost disappear. On the contrary lipid droplets in silk worms show rather increase in number until adult stage. Protein storage granules in bothspecies were arised from autophagic vacuoles(lysosome) . Fat cells of cabbage worm in adult stage turn out to be residual bodies which last until final stage, but those of silk worm rapidly decrease. Glycogen particles in both species reach maximum at last larval instar and thee gradually decrease thereafter. 3. Fat body sheath: The average width of fat body sheath was measured to be $0.2{\mu}m$ and $0.6{\mu}m$ and surface of fat cells adjacent to fat body sheath in silk worm is heavily infolded.
Plant seed oil-bodies or oleosomes ate the repository of the neutral lipid stored in seeds. These organelles in many oilseeds may comprise half of the total cellular volume. Oleosomes are surrounded by a half-unit membrane of phospholipid into which are embedded proteins called oleosins. Oleosins are present at high density on the oil-body surface and after storage proteins comprise the most abundant proteins in oilseeds. Oleosins are specifically targeted and anchored to oil-bodies after co-translation on the ER. It has been shown that the amino-acid sequences responsible for this unique targeting reside primarily in the central hydrophobic tore of the oleosin polypeptide. In addition, a signal-like sequence is found near the junction of the hydrophobic domain and ann N-terminal hydrophilic / amphipathic domain. This "signal" which is uncleaved is also essential for correct targeting. Oil-bodies and their associated oleosins may be recovered by floatation centrifugation of aqueous seed extracts. This simple partitioning step results in a dramatic enrichment for oleosins in the oil-body fraction. In the light of these properties, we reasoned that it would be feasible to create fusion proteins on oil-bodies comprising oleosins and an additional valuable protein of pharmaceutical or industrial interest. It was further postulated that if these proteins were displayed on the outer surface of oil-bodies, it would be possible to release them from the purified oil-bodies using chemical or proteolytic cleavage. This could result in a simple means of recovering high-value protein from seeds at a significant (i.e. commercial) scale. This procedure has been successfully reduced to practice for a wide variety of proteins of therapeutic, industrial and food no. The utillity of the method will be discussed using a blood anticoagulant, hirudin, and industrial enzymes as key examples.
Fungicide-resistant Alternaria alternata impede the practical control of the Alternaria diseases in crop fields. This study aimed to investigate cytological fungicide resistance mechanisms of A. alternata against dicarboximide fungicide iprodione. A. alternata isolated from cactus brown spot was cultured on potato-dextrose agar (PDA) with or without iprodione, and the fungal cultures with different growth characteristics from no, initial and full growth were observed by light and electron microscopy. Mycelia began to grow from one day after incubation (DAI) and continued to be in full growth (control-growth, Con-G) on PDA without fungicide, while on PDA with iprodione, no fungal growth (iprodione-no growth, Ipr-N) occurred for the first 3 DAI, but once the initial growth (iprodione-initial growth, Ipr-I) began at 4-5 DAI, the colonies grew and expanded continuously to be in full growth (iprodione-growth, Ipr-G), suggesting Ipr-I may be a turning moment of the morphogenetic changes resisting fungicidal toxicity. Con-G formed multicellular conidia with cell walls and septa and intact dense cytoplasm. In Ipr-N, fungal sporulation was inhibited by forming mostly undeveloped unicellular conidia with degraded and necrotic cytoplasm. However, in Ipr-I, conspicuous cellular changes occurred during sporulation by forming multicellular conidia with double layered (thickened) cell walls and accumulation of proliferated lipid bodies in the conidial cytoplasm, which may inhibit the penetration of the fungicide into conidial cells, reducing fungicide-associated toxicity, and may be utilized as energy and nutritional sources, respectively, for the further fungal growth to form mature colonies as in Ipr-G that formed multicellular conidia with cell walls and intact cytoplasm with lipid bodies as in Con-G.
This study was conducted to know the quality of chou made with flour pastes which were stored at different conditions of quick freezing, slow freezing, cold and room temperature. Also, this study included investigation of the chou properties such as expansion, sensory evaluation, degree of gelatinization, and physical and structural properties of paste were observed. There were not significant differences m diameter, height, volume, appearance, hollow formation, and sensory evaluation between the chou made with the paste stored at freezing condition and chou directly baked after pasting. Quick and slow freezing storages did not significantly affect the properties of chou, and the same results were obtained among the chou made with pastes thawed at room temperature and in microwave ovenrange. The chou of pastes stored at room temperature and in microwave ovenrange. The chou of pastes stored at room temperature and stored in refrigerator showed lowed expansion and value of sensory evaluation than those of frozen pastes. The paste stored at room temperature had the lowest hardness and viscosity compared with the other storage conditions. According to the observation of light microscope. the lipid bodies of the paste of freezing storage smaller those of the room temperature and refrigerator storage. The expantion of chou made with paste stored at room temperature was greatly decreased due to the high coalescence of lipid bodies, and also the paste components such as lipid, starch granule gluten at room temperature had inferior dispersion condition. The general tendency of the degree of gelatinization of chou were low in all treatments of paste. The values were 23.5%~46.0% in freezing, 77.3% in room temperature, 68.7% in directly baked after pasting, and 61.0% in cold storage, respectively. The formation and the taste of chou made with frozen paste were similar to those of chou directly baked pasting.
We investigated diet supplementation with shiitake mushroom fruiting bodies on biochemical and histological changes in hypercholesterolemic rats. Six-wk old female Sprague-Dawley albino rats were divided into three groups of 10 rats each. A diet containing 5% Lentinus edodes fruiting bodies given to hypercholesterolemic rats reduced plasma total cholesterol, triglyceride, low-density lipoprotein (LDL), total lipid, phospholipids, and the LDL/high-density lipoprotein ratio by 34.33, 53.21, 75.00, 34.66, 25.73, and 71.43%, respectively. Feeding mushroom also significantly reduced body weight in hypercholesterolemic rats. However, it had no detrimental effects on plasma albumin, total bilirubin, direct bilirubin, creatinine, blood urea nitrogen, uric acid, glucose, total protein, calcium, sodium, potassium, chloride, inorganic phosphate, magnesium, or enzyme profiles. Feeding mushroom increased total lipid and cholesterol excretion in feces. The plasma lipoprotein fraction, separated by agarose gel electrophoresis, indicated that L. edodes significantly reduced plasma ${\beta}$ and pre-${\beta}$-lipoprotein but increased ${\alpha}$-lipoprotein. A histological study of hepatic cells by conventional hematoxylin-eosin and oil red-O staining showed normal findings for mushroom-fed hypercholesterolemic rats. These results suggest that shiitake mushrooms could be recommended as a natural cholesterol lowering substance in the diet.
The glyoxysomal nature of microbodies was determined in Botryosphaeria dothidea hyphae based on morphology and in situ enzyme characteristics by transmission electron microscopy and cytochemistry. Bound by a single membrane, microbodies had a homogeneous matrix and varied in size ranging from 200 to 400 m in diameter. Microbodies had crystalline inclusion(s) which consisted of parallel arrays of fine tubules in their matrices. Microbodies and lipid globules were frequently placed in close association with each other, forming microbody-lipid globule complexes in hyphae. The cytochemical activities of catalase and malate synthase were localized in matrices of microbodies, showing intense electron-density of the organelle. In addition, the immunogold labeling detected the presence of catalase in multivesicular bodies and hyphal cell walls as well as in matrices and crystalline inclusions of microbodies, supporting the enzyme secretion through cell walls. Meanwhile, isocitrate Iyase was localized only in matrices of microbodies. These results suggest that microbodies, particularly complexed with lipid globules, in the fungal hyphae are functionally defined as glyoxysomes, where glyoxysomal enzymes are biochemically active for the glyoxylate cycle to be a metabolic pathway in gluconeogenesis. (Mycology and Fugus Diseases)
지질성 종자(해바라기, 피마자, 잣나무)와 전분성 종자(완두, 옥수수)를 대상으로 배유와 자엽세포내의 저장지질의 형성, 분포 및 구조적 변화 등과 지질가수분해효소의 활성부위 및 세포내 분포양상 등을 세포화학적 방법을 이용하여 조사하였다. 채종후의 지질 및 전분성 종자의 배유와 저장성 자엽세포에는 구형의 단백과립과 지질소구인 스페로솜, 전분과립 등의 저장물질이 널리 분포하였으며 세포내소기관은 드물게 관찰되었다. 활면소포체에서 형성되어 방출된 소포들과 스페로솜의 초기 단계로 여겨지는, 전자밀도가 낮은 막성의 과립들은 염색상이 스페로솜의 그것과 동일하였다. 조면소포체에서 방출된 전자밀도가 높은 과립들은 원형질막의 인접부위에서 관찰되었다. 지질염색반응 결과, 일반적인 미세구조의 염색상과는 상이하게 단백과립내의 단백질보다는 구형의 스페로솜의 전자밀도가 높고 균일함이 확인되어 스페로솜의 주요 구성성분은 지질임을 알 수 있었다. 스페로솜과 활면소포체에서 방출하는 물질을 함유한 소포는 염색상이 동일하였다. 지질가수분해효소는 분해과정이 진행중인 스페로솜의 기질과 막 주변부, 그리고 원형질막 부근에서 강한 활성을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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