• Applied Microscopy
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• 제25권1호
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• pp.15-29
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• 1995

Legumin was purified from the endosperm cells of the ginseng seed and analyzed its characteristics. Distributional patterns of the legumin in the endosperm cells were identified using the immunocytochemical method. Legumin was glycoprotein composed of two subunits, molecular weights about 33,000 and 25,000 respectively. The molecular shape of purified legumin stained negatively seems to have hexagonal structure about 10 nm in size. It was localized at the rER, dictyosomes, and in the vacuoles at the early developing stage. Legumin was glycosylated in the dictyosomes and transported from the dictyosomes to the vacuoles. Legumin was accumulated into the central vacuole via the dictyosomes while the endosperm cells were developing. The armorphous proteins containing legumin were scattered randomly within the central vacuoles, which were aggregated together and became gradually spherical shape. Legumin was distributed within the globular protein bodies in the endosperm cells of matured seed. However legumin was not found in the globoids located in the protein bodies.

• Journal of Ginseng Research
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• 제19권3호
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• pp.267-274
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• 1995

Vicilin and legumin, the storage Proteins of seed, were Purified from ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) endosperm cells. They were immunized in rabbits, and antibodies were raised respectively. Using these two antibodies, double immunogold labeling of vicilin and legumin was carried out to determine the gap of synthetic time and the transport pattern of vicilin and legumin in the ginseng endosperm cells. Vicilin and legumin were synthesized at the same time at early embryo developmental stage. They were secreted from the Golgi bodies and accumulated into the small vacuoles. As the endosperm cells developed, vicilin and legumin localized in the small vacuoles were gradually transported toward the large central vacuole where they were stored. Protein bodies were derived from the vacuoles filled with proteins and distributed in the endosperm cells of mature red seed. Protein bodies were various in size from 1 to 8 ${\mu}{\textrm}{m}$ in which vicilin and legumin were mixed each other. The number of small particles labeled on the vicilin was greater than that of large particles labeled on the legumin in the protein bodies indicating that the amount of vicilin is higher than that of legumin in the protein bodies.

• Applied Microscopy
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• 제31권4호
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• pp.347-354
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• 2001

완두 종자 발달의 이른 시기에 특징적으로 조면 소포체 내강에 단백질이 축적되는데 이 단백질에 대한 전자현미경적 면역세포 화학적 반응을 실시한 결과 legumin으로 확인되었다. 이 단백질은 소포체 내강에 점점 축적되고 소포체 끝이 부풀어서 단백과립으로 발달하였다. 완두의 단백과립 발달 과정은 3가지 유형이 확인 되었는데, 단백질 저장 액포의 분절에 의해서 형성된 제 1형 단백과립, 가장자리에 단백질이 축적된 단백질 저장 액포의 budding에 의해서 형성된 제 2 형 단백과립, 그리고 단백질 저장 소포체의 끝이 부풀어서 형성된 제 3형 단백과립으로 구분되었다. 제 3형 단백과립은 수정 후 $23\sim25$일 사이의 짧은 기간에 급격하게 발달되어 자엽세포를 가득차게 만드는 것으로 확인 되었으며, 이러한 유형은 지금까지 알려지지 않은 새로운 단백과립 발달과정으로 생각된다.

• Applied Microscopy
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• 제29권4호
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• pp.499-509
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• 1999

완두 종자에 축적되는 저장물질은 주로 전분과 단백질로서 이러한 저장물질 때문에 고정이나 전자현미경 관찰시료를 제작하기가 쉽지 않다. 따라서 자엽을 얇게 절편을 만들고 효소를 사용하여 단일세포로 분리한 다음 고정하여 관찰하였다. 완두의 저장단백질이 축적되는 단백질 저장 액포는 종자발달의 이른 시기에 기존의 액포를 둘러싸고 발달하게 되므로서 액포는 수축되고 단백질 저장 액포는 점점 발달하여 그 가장자리에 단백질 덩어리가 축적되게 된다. 이와는 별도로 종자발달의 이른 시기에 조면소포체의 내강에 전자밀도가 높은 단백질이 축적되기 시작하여 늦은 시기에 이 소포체의 끝이 부풀어서 구형의 단백과립으로 발달하였다. 완두종자의 저장단백질은 주로 vicilin과 legumin으로서 단백과립에 대한 면역세포화학적 방법으로 확인한 결과 vicilin은 세포질에 발달된 작은 단백과립과 단백질 저장액포의 가장자리에 축적된 단백질 덩어리에 모두 반응하였으나 legumin은 세포질의 단백과립에만 반응하였다. 또한 소포체에 존재하는 단백질인 Bip은 단백질 저장액포에 축적된 단백질 덩어리의 안쪽 가장자리에만 반응하였다. 이는 단백질이 활발하게 축적되고있는 시기에 특징적으로 작용하는 Bip의 기능과 관련되는 것으로 사료된다.

• Applied Microscopy
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• 제31권2호
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• pp.199-206
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• 2001

완두 자엽세포에 대한 저장단백질 과립의 발달은 단백질 저장 액포의 가장자리에 축적된 단백질의 fragmentation에 의해서 이루어지는 것으로 알려져 왔다. 그러나 최근 이 외에도 terminal dilation, transformation, denovo development등의 독립적인 과정이 각각 다른 시기에 관찰되므로서 단백과립의 발달은 이러한 여러 과정이 모두 나타나는 복합과정임이 알려졌다. 이러한 과정과는 별도로 종자발달의 이른시기에 소포체 내강에 축적되는 저장단백질과 여기서 발달하는 단백과립에 대하여 규명하고자 발달중인 종자의 자엽으로부터 단일 세포를 얻어서 면역세포 화학적 반응을 실시하였다. 그 결과 종자발달의 이른 시기에는 legumin이, 중간시기 이후 에는 vicilin이 축적되므로서 단백질이 축적된 소포체가 단백과립으로 발달하는 것으로 나타났다 소포체 내강에 존재하는 단백질인 $\alpha-Tip$은 비교적 늦은시기에, toneplast membrane protein인 PPase는 이른시기에 각각 면역 세포화학적 반응이 관찰되었다.

• Applied Microscopy
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• 제24권4호
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• pp.86-97
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• 1994

Protein bodies in the endosperm cells of mature red ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) were distributed evenly in the cytoplasm and their size varied from 1 to $8{\mu}m$. Three types of protein bodies were detected and they are spherical or egg-shaped ones containing homogeneous matrix only, spherical ones containing globoids, and irregular shaped ones. Protein bodies degraded in two patterns, one is to start the degration of the body from the surface toward the center, while the other is that the body was broken evenly and then degraded gradually. After degradation, only the limiting membrane remained, that causes the body to be empty. The limiting membranes fused with each other to form a large vacuole. Vicilin and legumin decreased in the endosperm cells as the protein bodies degraded gradually whereas they increased in the umbiliform layers.