Expression of monokine induced by IFN-$\gamma$(Mig) mRNA is well-known to strictly depend on Interferon-$\gamma$(IFN-$\gamma$). Lipopolysaccharide (LPS) alone Is weakly effective on Mig mRNA expression in mouse Peritoneal macrophages. This study was undertaken to investigate the synergistic effect of LPS and IFN-$\beta$ on chemokine Mig gene expression in mouse peritoneal macrophages. Although IFN-$\beta$ alone was minimally effective, LPS plus IFN-$\beta$ synergized to produce a high level of Mig mRNh. The synergistic effect of LPS and IFN-$\beta$ (LPS/IFN-$\beta$) on Mig mRNA expression was strain-specific. The most effective synergistic effect of LPS/IFN-$\beta$ on the mRNh expression was found in simultaneous stimulation of LPS/IFN-$\beta$. This synergy was modulated at the level of the gene transcription and was not dependent on a new protein synthesis. Synergistic effect of LPS/IFN-$\beta$ also required the activation of $NF-_KB$. Accordingly, these data suggest that LPS/IFN-$\beta$ synergizes the expression of Mig mRNA through a process that depends on a pretranscriptional level and/or coincident Mig mRNA transcription.
Indomethacin is well known as a prostaglandin (PG) E$_2$ synthetase inhibitor which has antipyretic and anti-inflammatory effects and reduces the risk of cancer Growing tumors greatly induce hypersensitive responses to lipopolysaccharide (LPS). Thus, this study was investigated the effect of indomethacin on the LPS-induced production of cytokines in sarcoma-bearing ICR mice. Indomethacin at doses of 5mg/kg was administered orally 30 minutes before i.p. injection of LPS (8 mg/kg) 5 times for 7 days. LPS remarkedly increased tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$ and interleukin (IL)-1$\beta$, levels in both serum and splenic supernatants compared with those in controls, while indomethacin significantly reduced the LPS-increased levels of IL-1$\beta$, in both serum and supernatants. LPS significantly enhanced IL-2 levels in serum and interferon (IFN)-${\gamma}$ levels in supernatants, whereas indomethacin did not affect the LPS-increased levels of IL-2 and IFN-${\gamma}$. These data, therefore, indicate that indomethacin may attenuate the pathogenesis of IL-1$\beta$, induced by LPS and maintain the tumoricidal cellular immune effects by LPS-increased production of IL- 2 and IFN-${\gamma}$ in tumor-bearing state.
Objectives : The purpose of this study was to investigate the effects of Angelicae acutilobae Radix Water Extract (AA) on the production of cytokines in RAW 264.7 cell stimulated with lipopolysaccharide (LPS). Method : RAW 264.7 cells were cotreated with AA (50 and $100{\mu}g/mL$) and lipopolysaccharide (LPS; $1{\mu}g/mL$) for 24 hours. After 24 hours treatment, using bead-based multiplex cytokine assay, concentrations of various cytokines such as interleukin(IL)-6, tumor necrosis factor-alpha(TNF-${\alpha}$) granulocyte colony-stimulating factor(G-CSF), granulocyte macrophage colony-stimulating factor(GM-CSF), and macrophage inflammatory protein(MIP)-$1{\alpha}$ were measured. Result : AA significantly inhibited LPS-induced production of IL-6 and MIP-$1{\alpha}$ from LPS-stimulated RAW 264.7 cells at the concentration of $50{\mu}g/mL$. AA significantly inhibited LPS-induced production of TNF-${\alpha}$ from LPS-stimulated RAW 264.7 cells at the concentration of $100{\mu}g/mL$. AA significantly inhibited LPS-induced production of G-CSF and GM-CSF in RAW 264.7 cells at the concentrations of 50 and $100{\mu}g/mL$. Conclusion : These results suggest that AA has anti-inflammatory effect related with its inhibition of proinflammatory cytokines such as IL-6, TNF-${\alpha}$, G-CSF, GM-CSF, and MIP-$1{\alpha}$ in LPS-induced macrophages.
Objective: In this study, we investigated the effects of Rhizoma Cimicifugae (RC) on the induction of nitric oxide (NO) in RAW 264.7 murine macrophages treated with lipopolysaccharide (LPS). Methods: We examined whether RC have an antipyretic effect by inhibition of COX and/or NOS in fever that is evoked by an intraperitoneal injection of LPS in rats. Results: 1. RC inhibited NO metabolites produced by activated murine macrophage in a dose-dependent manner. 2. RC had an antipyretic effect in a dose-dependent manner in LPS-induced fever. 3. RC inhibited levels of both COX-2 protein and iNOS protein increased by the treatment of LPS in brain tissues as well as brain blood vessels. 4. There were no changes in proteins of nNOS/COX-1. Conclusions: RC has an antipyretic effect by attenuating the level of iNOS and COX-2 protein.
Lipopolysaccharide(LPS) from Vibrio vulnificus was purified, the fatty acid composition was analyzed, and Limulus gelation activity and lethal toxic activity were tested in order to investigate the cause of cytotoxicity by V. vutnificus. These results were compared to those of Escherichia coli LPS and Salmonella typhimurium LPS. LPS from V. vulnificus had a different fatty acid composition from those of E coli and S. typhimurium. The major fatty arid from each LPS was lauric acid for E. coli, rapric acid for S. typhimurium, and myristic acid for V. vulnificus. The Limulus gelation activities of three LPSs were the same(0.1ng/ml) and the lethal toxicity in BALB/c mouse of V vulnificus LPS was similar to those of E. coli LPS and S. typhimurium LPS. Such factor as exotoxin need to be considered to be the cause of cytotoxicity by V. vulnificus LPS.
This study was conducted to investigate the effects of cranberry power on antioxidant defense system in rats fed an atherogenic diet and injected with lipopolysaccharide (LPS). Sprague-Dawley rats were divided into the following 5 groups: normal diet+saline (NS), atherogenic diet+saline (AS), atherogenic diet+LPS (AL), atherogenic diet with 5% cranberry powder+LPS (AL-C5), and atherogenic diet with 10% cranberry powder+LPS (AL-C10). Total antioxidant status measured by ferric reducing ability of plasma (FRAP) was significantly reduced by LPS injection (24%) and was restored by the cranberry powder treatment (P<0.05). In addition, the mean level of plasma total phenolics was significantly decreased by LPS injection (P<0.05) and tended to be increased when cranberry powder was incorporated in to the diet. Activity of serum superoxide dismutase (SOD) tended to be lowered by LPS injection and declined further in cranberry powder fortified groups. Overall results indicate that dietary cranberry powder may provide appropriate antioxidants to counter the diminished antioxidant status induced by exposing hypercholesterolemic rats to LPS.
Proinflammatory effects of bacterial lipopolysaccharide (LPS) have been assessed by analysing the induction of two inflammatory genes, $interleukin-1\beta$$(IL-1\beta)$ and cyclooxygenase-2 (COX-2), in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) macrophage cells. Production of a metabolite of arachidonic acid by COX-2, prostaglandin $E_2\;(PGE_2)$, was also analysed in macrophage cells after LPS stimulation. Northern blot analysis revealed that LPS $(5{\mu}g/mL)$ significantly upregulated $IL-1\beta$ (54 times) and COX-2 (40.7 times) gene expression in macrophage cells after 4 h stimulation. According to RT-PCR (Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction) analysis, $IL-1\beta$ gene induction in LPS stimulated macrophage cells was started within 1h and significantly increased thereafter until 4h. Meanwhile, COX-2 gene induction by LPS was delayed in comparison with $IL-1\beta$ gene induction as a faint band was observed after 4h stimulation in head kidney macrophage cells. LPS also significantly increased $PGE_2$ production in head kidney leucocytes, presumably via activating COX-2 expression that metabolites arachidonic acid to $PGE_2$. In conclusion, it was demonstrated that LPS could induce two main inflammatory and immune related genes, $IL-1\beta$ and COX-2, and increase $PGE_2$ production in trout head kidney macrophage cells, representing a strong inflammatory activity.
The objective of this study was to characterize the enzymatic hydrolysis of lipopolysaccharide (LPS) by wheat phytase and to investigate the effects of wheat phytase-treated LPS on in vitro toxicity, cell viability and release of a pro-inflammatory cytokine, interleukin (IL)-8 by target cells compared with the intact LPS. The phosphatase activity of wheat phytase towards LPS was investigated in the presence or absence of inhibitors such as L-phenylalanine and L-homoarginine. In vitro toxicity of LPS hydrolyzed with wheat phytase in comparison to intact LPS was assessed. Cell viability in human aortic endothelial (HAE) cells exposed to LPS treated with wheat phytase in comparison to intact LPS was measured. The release of IL-8 in human intestinal epithelial cell line, HT-29 cells applied to LPS treated with wheat phytase in comparison to intact LPS was assayed. Wheat phytase hydrolyzed LPS, resulting in a significant release of inorganic phosphate for 1 h (p < 0.05). Furthermore, the degradation of LPS by wheat phytase was nearly unaffected by the addition of L-phenylalanine, the inhibitor of tissue-specific alkaline phosphatase or L-homoarginine, the inhibitor of tissue-non-specific alkaline phosphatase. Wheat phytase effectively reduced the in vitro toxicity of LPS, resulting in a retention of 63% and 54% of its initial toxicity after 1-3 h of the enzyme reaction, respectively (p < 0.05). Intact LPS decreased the cell viability of HAE cells. However, LPS dephosphorylated by wheat phytase counteracted the inhibitory effect on cell viability. LPS treated with wheat phytase decreased IL-8 secretion from intestinal epithelial cell line, HT-29 cell to 14% (p < 0.05) when compared with intact LPS. In conclusion, wheat phytase is a potential therapeutic candidate and prophylactic agent for control of infections induced by pathogenic Gram-negative bacteria and associated LPS-mediated inflammatory diseases in animal husbandry.
Change of IgG production of feline mononuclear cell(MNC) was evalual vitro. MNC was treated with lipopolysaccharide(LPS) before cortisol administration. tisol induced change of B cell subpopulation with surface IgG and reduced IgG prods against virus. However, before treatment o$\ulcorner$ MNC with LPS induced increasement of subpopulation with surface IgG and IgG production against virus. These results impel: diminution of IgG production by cortisol is well again by LPS treatment.
The lipopolysaccharide (LPS) yields were measured in Rhodobacter capsulatus under several conditions by the ELISA method. The purification of LPS was done by affinity chromatography of IgG coupled CNBr-activated sepharose-4B instead of ultra-centrifugation. The purity of the LPS didn't show much difference between affinity chromatography and ultra-centrifugation method, but affinity chromatography method required much fewer organisms and was more convenient. LPS yield was measured in ng units by the ELISA method. Mannitol was a better single carbon source than other sugars, but mixing two carbon sources resulted in greater LPS yields than any sugar alone. LPS yield was directly proportional to $NH_ 4CI$ concentration, with optimum yields at 0.05% nitrogen. In contrest to LPS yields, which decreased at 0.005% nitrogen concentration total protein was increased 16 times. Calcium influenced LPS yields. At 0.7 mM $CaCI_ 2$, the LPS yield was 16.5 $\mu$g/mg DW, five times the yield without calcium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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