• 제목/요약/키워드: LDH assay

검색결과 244건 처리시간 0.023초

국내에서 분리된 포도상구균의 Vancomycin 내성빈도 및 특성 (Characterization and Frequency of Vancomycin Resistance in Staphylococcus aureus Isolated in Korea)

  • 박성언;김종배
    • 대한의생명과학회지
    • /
    • 제6권3호
    • /
    • pp.201-208
    • /
    • 2000
  • Vancomycin은 세포벽의 합성을 억제하여 세균에 대한 항균효과를 나타내는 glycopeptide 계 항생물질로서 그람양성세균으로 인한 감염치료에 광범위하게 사용되며, 특히 methicillin 내성 포도상구균의 선택적 치료제로 쓰이고 있다. 그러나 최근 임상검체에서도 중등도의 내성을 가지는 포도상구균 (Mu50: MIC 8 $\mu\textrm{g}$/ml)이 나타나기 시작하였고 여러 가지 여건상 국내에서도 내성균주가 분리될 가능성이 높다고 사료되어 임상검체 중 methcillin 내성 포도상구균을 대상으로 vancomycin 감수성 및 내성빈도 조사를 실시하고 이에 따른 내성기전을 알아보고자 하였다. 본 실험 결과 107주 (株)의 methicillin 내성균주 중 23.3%가 vancomycin에 대하여 내성을 보였으며 vancomycin 내성을 나타내는 표준균주인 Mu50과 Mu3의 중간 정도의 내성빈도를 보였다. 중합효소 연쇄반응을 통해 장구균의 vancomycin 내성에 관여하는 vanA, vanB, vanC1, vanC2, vanH 특이 유전자는 증폭되지 않았다. SDS-PAGE를 실시하여 81 kDa, 58 kDa, 33 kDa, 28 kDa 등의 주요 단백 분획을 확인하였고, Mu50에서 45 kDa의 특징적인 단백 분획을 관찰하였다. LDH enzyme assay에서는 한 개의 검체가 Mu50과 함께 높은 LDH 활성을 보였다.

  • PDF

In vitro system에서 청국장 메탄올 추출물의 신경세포 보호효과 (Neuronal Cell Protective Effects of Methanol Extract from Cheonggukjang Using in vitro System)

  • 정창호;곽지현;김지혜;최귀남;정희록;허호진
    • 한국식품과학회지
    • /
    • 제42권6호
    • /
    • pp.768-772
    • /
    • 2010
  • 청국장 메탄올 추출물의 $H_2O_2$로 유도된 신경세포 독성에 대한 보호 효과를 조사하였다. 청국장 분말의 일반성분을 분석한 결과 조단백질 40.95%, 조지방 22.49%, 가용성 무질소물 15.99%, 수분 7.91%, 조회분 6.74% 및 조섬유 5.92% 순으로 나타났으며, 총 페놀성 화합물 함량은 28.43 mg/g이었다. $H_2O_2$로 유발된 산화적 손상에 의한 ROS 축적량을 조사한 결과 $H_2O_2$ 단독 처리구보다 청국장 메탄올 추출물 처리구에서 낮은 ROS 축적량을 보였다. $H_2O_2$로 유도된 PC12 신경세포에 대한 보호효과를 MTT 방법을 이용하여 측정한 결과 모든 시료에서 40%정도의 신경세포 보호효과를 보였고, LDH release 실험 결과 5 mg/mL 농도에서 15%정도의 LDH 방출량 저해 효과를 나타내었다. 청국장 메탄올추출물의 아세틸콜린에스터레이스 저해활성은 농도 의존적인 경향이었다. 본 연구 결과를 종합해 볼 때, 청국장 메탄올 추출물은 산화적 스트레스로부터 신경세포 보호효과 및 아세틸콜린에 스터레이스 저해활성을 나타내어 알츠하이머성 신경질환의 예방을 위한 식품으로서의 활용 가능성이 높다고 판단된다.

더덕순 에탄올 추출물의 신경세포 보호 효과 (Neuroprotective effect of Deodeok (Codonopsis lanceolata) bud extracts in H2O2-stimulated SH-SY5Y cells)

  • 양희선;황인국;최애진;최정숙
    • Journal of Nutrition and Health
    • /
    • 제56권2호
    • /
    • pp.140-154
    • /
    • 2023
  • 본 연구에서는 15-20 cm 길이의 더덕순을 70% 에탄올로 추출하여 추출물 (CLBE)을 제조하고, H2O2로 산화적 스트레스를 유발한 SH-SY5Y세포에 전처리하여 신경세포 보호 효과를 평가하였다. 그 결과, CLBE는 H2O2로 자극된 세포에서 세포 손상 및 LDH 방출 억제, ROS 소거를 통하여 세포의 사멸을 막아주었다. 또한 CLBE는 Bcl-2와 Bax 단백질의 발현을 조절함으로써 caspase의 활성을 억제하여 신경세포를 보호하였다. 이상의 연구결과들을 종합할 때, CLBE는 산화적 스트레스에 대하여 신경세포 보호 효과가 있는 것으로 보이며, 향후 신경질환 연구를 위한 치료제 개발 및 고부가가치 식품 소재 개발에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 판단된다.

조각인(Gleditsiae Semen) 추출물의 대장암 세포주에 대한 세포독성효과 (The Cytotoxic Effect of the Gleditsiae Semen Extracts on Human Colon Carcinoma Cells)

  • 차미란;윤미영;김주영;황지환;박해룡
    • Applied Biological Chemistry
    • /
    • 제49권3호
    • /
    • pp.248-253
    • /
    • 2006
  • 조각인(Gleditsiae Semen)은 동아시아 지역에서 장 기능을 향상시키는 등의 여러 가지 민간요법으로 사용되는 한약재이다. 본 연구에서는 조각인의 항암활성을 검색하기 위한 목적으로 methanol, ethanol, acetone으로 추출한 뒤, 인간 유래의 대장암 세포주 HT-29에 처리하여 각 추출물의 암세포 성장 억제능을 확인하기 위하여 MTT-dye reduction assay를 이용하여 실험하였다. 그 결과, methanol 추출물에서 가장 높은 세포독성을 확인할 수 있었고, ethanol 추출물에서도 비교적 높은 암세포 성장 억제능을 볼 수 있었으나, acetone 추출물에서는 거의 세포독성이 나타나지 않았다. 그리고 추출물들을 $25\;{\mu}g/ml$의 농도로 암세포에 처리하여 위상차 현미경으로 세포주의 형태학적 변화를 관찰한 결과에서도 methanol 추출물에서의 활성이 가장 강력하게 나타남을 알 수 있었다. 조각인의 항암활성물질들의 용매특성을 알아보기 위하여 methanol 추출물을 극성도에 따라 용매분획 하여 분리한 각 분획물의 세포독성을 확인한 결과, water층 분획물에서 농도 의존적으로 세포독성을 나타냄을 확인하였다. 또한 조각인의 water층 분획물은 또 다른 대장암 세포주인 SW620에 대해서도 대조군에 비해 $25\;{\mu}g/ml$의 농도에서 2배 정도 높은 항암활성을 나타내고 있음을 MTT reduction assay와 LDH release assay를 통하여 확인 할 수 있었다.

알코올로 인한 흰쥐의 백혈구 및 간 DNA 손상에 미치는 미더덕과 오만둥이 분말의 보충섭취 효과 (Ethanol Induced Leucocytic and Hepatic DNA Strand Breaks Are Prevented by Styela clava and Styela plicata Supplementation in Male SD Rats)

  • 김정미;박해룡;이승철;박은주
    • 한국식품영양과학회지
    • /
    • 제36권10호
    • /
    • pp.1271-1278
    • /
    • 2007
  • 미더덕과 오만둥이는 독특한 향과 맛이 있는 식품으로 널리 알려져 있으며 우리나라 전역에서 자생하나 경상남도 마산에서 가장 많이 생산되고 있는 해양생물이다. 한편, 과량의 에탄올 섭취는 microsomal ethanol oxidizing system(MEOS)에 의한 에탄을 산화를 증가시켜 superoxide ion, hydrogen peroxide, hydroxyl radical, 1-hydroxyethyl radical과 같은 활성산소종을 생성하여 산화적 스트레스 상태를 유발하게 된다. 본 연구에서는 미더덕과 오만둥이의 보충투여가 과량의 에탄을 투여로 인해 유도되는 간기능 관련 지표와 간세포 및 백혈구 DNA손상정도에 미치는 영향을 보고자 SD계 수컷 쥐를 세 군으로 나누어 6주간 25% 에탄을 용액을 자유로이 섭취하게 하면서 동결 건조하여 분말화한 미더덕과 오만둥이를 식이의 3%(w/w) 수준으로 보충투여하였다. 6주간의 미더덕과 오만둥이 투여는 체중증가 량, 식이 및 에탄을 섭취량, 간을 비롯한 각종 장기무게에는 아무런 영향을 끼치지 않았다. 미더덕과 오만둥이 보충투여는 총 콜레스테롤을 비롯한 혈장 지질 수준에는 유의적인 영향이 없었지만, 혈장 ALT, ALP, LDH 활성 등 간기능 관련 지표들을 유의적으로 감소시켰다. 또한 미더덕과 오만둥이는 과량의 에탄을 섭취로 유도된 흰쥐의 백혈구, 간세포의 DNA손상을 유의적으로 감소시킨 것으로 나타났으며, 간세포 DNA 손상도는 혈장 ALP와 LDH 활성과 유의적인 양의 상관관계를 보여주었다. 결론적으로 미더덕과 오만둥이 분말의 보충투여는 알코올 섭취로 인해 유도된 간조직 손상에 대한 보호작용이 있는 것으로 사료된다.$ 수준은 GTP 20%를 첨가한 식이를 제공받은 군에서 유의적으로(p<0.05) 감소하였다 간의 TG와 TBARS 수준은 GTP 20%를 첨가한 식이를 제공받은 군에서 감소하는 경향을 보였으며 GTP의 첨가가 간에서의 GSH함량 및 항산화 효소계의 활성을 증진시키는 것으로 나타났다. GTP를 첨가한 식이를 섭취한 실험군의 1일 변중의 총 지방 및 TG 배설량은 유의적인 차이는 보이지 않았으나 OVX-C군에 비해 다소 높은 경향을 보였으며 총 콜레스테롤 배설량은 OVX-C군에 비해 높은 수준이었다. 난소 절제 흰쥐에서 5% GTP를 제공받은 군에 비해 20% GTP를 첨가한 식이를 제공받은 군에서 혈액과 간에서의 지질농도 감소와 항산화 효소의 활성이 높은 수준을 보여 GTP의 첨가량이 높을수록 더 효과적인 것으로 나타났다. 이상의 결과들로 미루어 볼 때 난소절제 흰쥐에서 GTP 첨가가 변의 총지질과 TG및 콜레스테롤 배설을 증가시켜 혈청과 간의 총 지질 농도와 TG및 총콜레스테롤 농도를 감소시키는 것과 관련이 있는 것으로 보이며 GTP의 섭취가 체내 총 지질 농도를 감소시켜 항 동맥경화 작용을 나타내는 것으로 사료된다. 따라서 녹차가공품의 폐경기 고지혈증 개선을 위한 기능성식품으로의 가능성을 보여 준다고 할 수 있다.용적중 등 품질 평가 기준에서 차이가 없었다.50 에서는 43% 발효주에는 0.95 cm, 45% 고은 발효주에는 0.95 cm의 항균성을 나타냈으며 관능평가에서도 가장 높게 났다. 관능평가에서는 45% 고온 발효주가 가장 높게 나타났으며, 항산화성 실험에 나타난 저온 45%의 갈색도의 측정과는 항산화성에서는 좀 다른 결과를 나타낸다. 그러나 항균성이 가장

가축번식효율 증진을 위한 임부진단방법 (Pregnancy Diagnosis for Improvement of Reproductive Efficiency in Farm Animals)

  • 정영채
    • 한국가축번식학회지
    • /
    • 제7권2호
    • /
    • pp.8-26
    • /
    • 1983
  • Various early pregnancy diagnostic methods have been developed in order to improve the reproductive efficiency in cow, mare, mule, sow, sheep, goat, dog, cat, rabbit, buffalo, camel, elephant, monkey, deer, lion, coipus and guinea pig. These methods include abdominal swelling, abdominal palpation, esturs cylce detection, Lupin test, gonadotropin assay, colostrum injection test, sperm motility assessment, cervical mucus viscosity test, Kaber chromagens method, estrogen test, A Scheim-Zond다 test, spectrophotometric detection of estrogen in urine and feces, boric acid crystraline formation test in urine, oxytocin injection test, diamino-oxidase test, PMSG HA test, behaviour test, Simolus iodine detection test, detection of tryptophane in urine, x-ray method, Cuboni and Lunaas method, vaginal biopsy method, Friedmann Schneider diagnostic method, electrode method, barium chloride detection method, ECG, Doptone method, ultrasound method, ultrasound scanning method, LDH method, rectal palpation method, CL palpation method, radioautography, serum creatine test, serum globulin test, chlormadine method, CAP method, Medata Do, pp.ers method, body fluid test, Plasma oCS detection method, ERIA, LHRH method, negative latex cogulation test and oestrone sulphate detection method. The most reliable methods with high a, pp.icability to farm animals such as sheep, mare, sow and cow are rectal palpation, ultrasound method and hormonal assay in blood and milk. However, they require complicated laboratory works for the early diagnosis of pregnancy and in most cases, the simple and economical methods which are described up to now need a long period of time after conception. Generally, it is possible to detect pregnancy after one estrus cycle, even though it varies depending on the species of animals. For improvement of the reproductive efficiency, it is required to develop a more accurate, economical, simple and early detectable method. It is anticipated that the result of a study on the detection method of EPF(early pregnancy factor) would be a, pp.icable to various animals within 6 hours after conception.

  • PDF

아밀로이드 베타로 유도된 신경세포 사멸에 대한 PineXol®의 보호효과 (Protective Effect of PineXol® against Amyloid-β-induced Cell Death)

  • 한경훈;이승희;박광성;송관영;김정희;박은국;한성희
    • 한국식품영양학회지
    • /
    • 제30권6호
    • /
    • pp.1279-1285
    • /
    • 2017
  • $Amyloid-{\beta}$ protein ($A{\beta}$) is known to increase free radical production in neuronal cells, leading to cell death by oxidative stress. The purpose of this study was to evaluate the protective effects of $PineXol^{(R)}$ on $A{\beta}_{25-35}$ induced neuronal cell death. Rat pheochromocytoma (PC-12) cells were pre-treated with $100{\mu}g/mL$ of $PineXol^{(R)}$ for 2 h. The cells were exposed to single dose of $30{\mu}M$ $A{\beta}_{25-35}$ for 24 h. Cell death was assessed by a cell count kit-8 (CCK-8) assay, lactate and dehydrogenase (LDH) release assay. An Apoptotic process was analyzed by a protein expression of the Bcl-2 family using western blotting. Cell viability increased in PC-12 cells treated with both $A{\beta}_{25-35}$ and $PineXol^{(R)}$, compared to the control group. $PineXol^{(R)}$ induced a decrease of the Bcl-2 protein expression (p<0.05), while Bax and Sod1 increased (p<0.05), indicating attenuation of $A{\beta}_{25-35}$ induced apoptosis. These results suggest that $PineXol^{(R)}$ may be a good candidate for the prevention of Alzheimer's disease(AD).

Protective Effect of Schizonepeta tenuifolia Briquet Extracts on Oxidative DNA Damage in Human Leucocytes and on Hydrogen Peroxide-induced Cytotoxicity in PC12 Cells

  • Yoon, Mi-Young;Lee, Hyun-Jin;Lee, Bo-Bae;Lee, Sang-Myeon;Kim, Ju-Young;Kim, Yong-Seong;Park, Eun-Ju;Park, Hae-Ryong
    • Food Science and Biotechnology
    • /
    • 제16권5호
    • /
    • pp.858-862
    • /
    • 2007
  • The present study was conducted to examine the antioxidant activities and neuroprotective effects of methanolic extracts from Schizonepeta tenuifolia Briquet (STE). STE ($100\;{\mu}g/mL$) showed $43.33\;{\mu}M$ of total phenolic content, 64.43% of radical scavenging activity, and 0.157 of reducing power. In addition, the effect of STE on $H_2O_2$-induced DNA damage in human leucocytes was evaluated by the comet assay, where STE was a dose dependent inhibitor of DNA damage induced by $200{\mu}M$ of $H_2O_2$. The protective effect of STE against $H_2O_2$-induced oxidative damage on PC12 cells was investigated by an 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) reduction assay and lactate dehydrogenase (LDH) release assays. After 2 hr of cell exposure to $H_2O_2\;(500\;{\mu}M)$, a marked reduction in cell survival was observed. However, this reduction was significantly prevented by $1-50\;{\mu}g/mL$ of STE. Therefore, these results suggest that STE could be a new antioxidant candidate against neuronal diseases.

Antioxidant and Neuronal Cell Protective Effects of Columbia Arabica Coffee with Different Roasting Conditions

  • Jeong, Ji Hee;Jeong, Hee Rok;Jo, Yu Na;Kim, Hyun Ju;Lee, Uk;Heo, Ho Jin
    • Preventive Nutrition and Food Science
    • /
    • 제18권1호
    • /
    • pp.30-37
    • /
    • 2013
  • In vitro antioxidant activities and neuronal cell protective effects of ethanol extract from roasted coffee beans were investigated. Colombia arabica coffee (Coffea arabica) green beans were roasted to give medium ($230^{\circ}C$, 10 min), city ($230^{\circ}C$, 12 min) and french ($230^{\circ}C$, 15 min) coffee beans. Total phenolics in raw green beans, medium, city and french-roasted beans were $8.81{\pm}0.05$, $9.77{\pm}0.03$, $9.92{\pm}0.04$ and $7.76{\pm}0.01$ mg of GAE/g, respectively. The content of 5-O-caffeoylquinic acid, the predominant phenolic, was detected higher in medium-roasted beans than others. In addition, we found that extracts from medium-roasted beans particularly showed the highest in vitro antioxidant activity on ABTS radical scavenging activity and FRAP assays. To determine cell viability using the MTT assay, extracts from medium- roasted beans showed higher protection against $H_2O_2$-induced neurotoxicity than others. Lactate dehydrogenase (LDH) leakage was also inhibited by the extracts due to prevention of lipid peroxidation using the malondialdehyde (MDA) assay from mouse whole brain homogenates. These data suggest that the medium-roasting condition to making tasty coffee from Columbia arabica green beans may be more helpful to human health by providing the most physiological phenolics, including 5-O-caffeoylquinic acids.

CT105로 유도된 신경모세포종 세포주에서 지미탕(指迷湯)의 항치매효과 (Effects on Alzheimer's disease by Jimitang in CT105-overexpressed SK-N-SH cell lines)

  • 강승준;박창국;박치상
    • 대한한방내과학회지
    • /
    • 제25권3호
    • /
    • pp.482-491
    • /
    • 2004
  • Alzheimer's disease(AD) is a geriatric dementia that is widespread in old age. In the near future AD may be the biggest problem in public health service. Although a variety of oriental therapies in the study of Jimitang have been traditionally utilized for the treatment of AD, their pharmacological effects and active mechanisms have not been fully elucidated. This study in an investigation of effects of Jimitang on apoptotic cell death induced by CT105 overexpression in SK-N-SH neuroblastoma cell lines. DNA fragmentation, neurite outgrowth assay and LDH activity assay were examined. The regeneratory and inhibitory effects on Alzheimer's disease in pCT105-induced neuroblastoma cell lines by Jimitang water extract were examined. Findings from these experiments have shown that Jimitang inhibits the synthesis or activities of CT105, which has neurotoxicities and apoptotic activities in cell lines. In addition, pretreatment of $Jimitang(>50\;{\mu}g/mL\;for\;12\;hours)$ partially prevented CT(105)-induced cytotoxicity in SK-N-SH cell lines, and were inhibited by pretreatment. $Jimitang(>50\;{\mu}g/mL\;for\;12\;hours)$ repaired CT(105)-induced neurite outgrowth when SK-N-SH cell lines were transfected with CT(105). Results of this study show that. in the Jimitang group, the apoptosis in the nervous system in inhibited, the repair against the degerneration of neuroblastoma cells by CT105 expression is promoted. In addition, Jimitang was found to inhibit DNA fragmentation induced by CT105 overexpression, and promote neurite outgrowth. These findings suggest that Jimitang is beneficial for the treatment of AD.

  • PDF