A lectin from the edible mushroom, Lentinus edodes, was purified through physiological saline extraction, ammonium sulfate fractionation and column chromatographies. On polyacrylamide gel electrophoresis, 0.05M fraction from hydroxyapatite column exhibited adjacent four sharp bands. The partially purified lectin agglutinated the erythrocytes of rabbit, mouse and rat, but not agglutinated human erythrocytes. The lectin's mitogenic effects were tested by its application to human and murine splenic lymphocytes. The results showed that the 0.05M fraction from hydroxyapatite was mitogenic, and the optimal dose of Lentinus edodes lectin was slightly lower than Con A by the culture with murine splenic and human peripheral lymphocytes. Meanwhile, its ability to agglutinate transformed cells was tested by its administration to continuous cell lines L1210 and HeLa cells. The leetin was found to be an agglutinin of tumor cell lines tested by L1210 and HeLa cells.
Acetylarsonate was prepared for testing antitumor and immunological effects. It showed cytotoxicity directly on Sarcoma 180. L1210 and MOLT-4 by MTT assay. It did not seemed to trigger the mitosis of human lymphocytes in culture, but that showed the cytotoxicity with higher dose. The rosette formation and spleen weight of mouse which acetylarsonate was administered to for 2 weeks were increased. Furthermore, peripheral helper T- and cytotoxic/suppressor T-lymphocytes were increased in acetylarsonate-injected-mice significantly when it was estimated with simultaneous 2 color analysis using anti Lyt2-FITC and L3T4-PE monoclonal antibody by Flow cytometer.
저령 버섯으로부터 추출된 다당체는 78.2%의 당류, 16.8%의 단백질 및 4%의 회분으로 구성되었다. 저령다당체는 20-160 mg/kg/day로 ,3주간 투여 시 ICR mouse에서 유발된 sarcoma-180에 대하여 항종양효능을 나타내었다. 또한 저령다당체를 50-400$\mu\textrm{g}$/mL의 농도로 투여시 백혈암세포인 L-1210와 K-562세포에서 대조군에 비하여 52.6%, 55.0%로 각각 성장하였다. 그러나 이들 세포에서 세포사멸의 생화학적인 증거가 되는 DNA 분절현상은 나타나지 아니하였다. 2.5-10.0%의 농도의 저령다당체는 Salmonella typhimurium TA 100과 TA 98에서 2-nitrofluorene과 sodium azide에 의해 유발된 돌연변이를56%까지 억제하였다 이 결과로 저령다당체는 항종양효능, 암세포성장 억제효능 및 항돌연변이 효능을 갖는 것으로 사료되며, 이 항종양 및 암세포 성장억제효능은 세포사멸(apoptosis)에 기인하지 않는 것으로 사료된다.
Intracellular ions which have a major role in cellular function have been reported to affect repair of radiation damage. Recently it has been reported that ouabain sensitizes A549 tumor cellls but not CCL-120 normal cells to radiation. Ouabain inhibits the $Na^+-K^+$-pump rapidly thus it increases intracellular Na concentration, Vanadate which is distributed extensively in almost all living organisms is known to be a $Na^+-K^+$-ATPase inhibitors, This study was performed to see any change in radiosensitivity of tumor cell by vanadate and any role of $Na^+-K^+$ATPase in radiosensitization. Experiments have been carried out by pretreatment with vanadate in human cell line(A549, JMG) and mouse cell line(L1210, spleen). For the cell survival MTT assay was performed for A549 and JMC cells and frypan blue dye exclusion test for L120, and spleen cells. Measurements of $Na^+-K^+$-ATPase activity in control, vanadate treated cell, radiation treated cell (9 Gy for A549 and JMG, 2 Gy for L1201, spleen), and combined $10^{-6}M$ vanadate and radiation treated cells were done. The results were summerized as fellows. 1. L1210 cell was most radiosensitive, and spleen cell and JMG cell were intermediate, and A549 cell was least radiosensitive. 2. Mininum or no cytotoxicity was seen with vanadate below concentration of $10^{-6}M$. 3. In A549 cells there was a little change in radiosensitivity with treatment of vanadate. However radiation sensitization was shown in low dose level of radiation i. e. 2- Gy. In JMG cells no change in radiosensitivity was noted. Both L1210 and spleen cell had radiosensitization but change was greater in tumor cell. 4. $Na^+-K^+$-ATPase activity was inhibited significantly in tumor cell by treatment of vanadate. 5. Radiaiton itself inhibited $Na^+-K^+$-ATPase activity of tumor cell with high $Na^+-K^+$-ATPase concention. Increase in radiosensitivity by vanadate was closely associated with orginal $Na^+-K^+$-ATPase contents. From the above results vanadate had little cytotoxicity and it sensitized tumor cells to radiation. Inhibitory effect of vanadate on $Na^+-K^+$-ATPase activity might be one of the contributing factors for radiosensitization to tumor cells which has greater enzyme activity than that of normal cell. It was suggested vanadate could be used as a potential radiosensitizer for tumor cells.
The effect of ginseng extract and sodium ascorbate (vitamin C) administered separately or in combination on the some cancer cells cultured in vitro have been examined. Mouse leukemic cells (L1210 and P388), human rectal cancer cells (HRT-18) and human colon cancer cells (HCT-48) were used for the experiment. When given separately, the growth rate for each kind of cancer cell was inhibited In proportion to the concentration of ginseng extract or vitamin C. The inhibitory effect on the growth rate of the cancer cells was stronger in ginseng extract than in vitamin C except for the HCT-48 cells. Based on the cytotoxic activity, combined administration of ginseng extract and vitamin C demonstrated a synergistic inhibition of cancer cell growth. The cytotoxic activities of ginseng extract and vitamin C on the mouse leukemic cells were more sensitive than on human colon cancer cells. And the sensitivity of cytotoxic activity was somewhat different in different cancer cell lines.
Yew cortex, twigs and leaves(Florida yew, Taxus floridana Nutt et Champ; Pacific, yew Taxus brevifolia Nutt(Taxaceae)) were extracted with MeOH and $CHCI_3$, respectively, and then the chloroform extract was fractionated by silica column chromatography. As biologically active substances, taxol derivatives were identified and several biological activity tests were followed. The results showed that it bad no antimosquito activity and inhibited the growth of root meristem of cress seeds. The chloroform ext. of Florida yew showed 91%, inhibition rate at 400 ppm and the taxol fractions of Pacific yew did 91% at 200 ppm, 94% at 100 ppm. In the antitumor activity tests in vitro against a cultured cell line of L1210 mouse leukemia, Pacific yew showed 99% inhibition rate at 1.0 ppm and Florida yew did 97% at 10 ppm.
A cytotoxic constituent was isolated by bioassay-guided procedure from the roots of Sophora flavescens Aiton (Leguminosae). The constituent was identified as sophoraflavanone G (I) by means of chemical methods and in comparsion with spectral data of standard compound. The $ED_50$ values of constituent I were 0.78, 1.57, 2.14 and $8.59{\mu}g/ml$ against A549, HeLa, K562 and L1210 cell lines, respectively. Constituent I exhibited highly cytotoxic activities against A549, K562 and HeLa cells, but showed a mild activity $$(ED_50 value, 5{\mu}g/ml)$$ against L1210 cells. Among the tested cell lines, A549 cells were the most sensitive to constituent I.
The UV-pattern of several flavones, theier cytotoxicities against L1210 cell and their Inhibiting effects on ATPase from the cell seem to be correlated. 5.2'-Dihydroxy 6, 7, 8, 6'-tetramethoxyflavone ($ED_{50}$ = 2.3 ug/ml) and 5,2',6'-trihydroxy-6, 7, 8 trimethoxy flavone ($ED_{50}$ = 4.5 ug/ml), the most active flavones studied, have shown a narrow range of the absorbance ratio, Log $\varepsilon$ II/Log $\varepsilon$ I = 1.073 -1.109. They have inhibited the ATPase-activity to the greatest extent. These finding ssuggest that a certain angle between the flavone rings B and C plays an important role for the inhibition of the enzyme activity and thus the cytotoxicity.
A new polyacetylene compound which has strong cytotoxic activity against L1210 cell, was isolated from Korean ginseng roots. The structure was determined to be heptadeca-1-ene-4,6-diyne-3,9-diol-10-acetate (10-acetyl panaxytriol, $ED_{50}\;=\;1.2\;{\mu}g/ml$). The cytotoxicities of this compound and acetyl panaxydol lower than their starting substances, panaxytriol and panaxydol. The presence of one for the decreases in the cytotoxicities.
The cellular growth inhibition of 20 natural products was screened using SRB (sulforhodamine B) assay against 4 human cancer cell lines(SNU-1, SNU-C$_{4}$, Hep3B, Kato III). Ethanol extracts of Salvia miltiorrhiza, Saussurea lappa and Chelidonium majus showed potent anticancer activity among them, and further, it was fractionated into methylene chloride, hexane and methanol. Methylene chloride and methanol fraction of Salvia radix showed significant inhibitory activity against 4 human cancer cell lines. The effect of Salvia miltiorrhiza on anticancer activity in vitro models was evaluated with methylene chloride fraction of Salvia miltiorrhiza. Life span of ICR mice implanted with sarcoma-180 was increased by 40-61% and BDF$^{1}$ mice implanted with L1210 was increased by 66-89% upon intraperitoneal administration with methylene chloride fraction of Salvia miltiorrhiza. Based on these result, we suggested that Salvia miltiorrhiza showed anticancer activity on the in vivo and in vitro models
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[게시일 2004년 10월 1일]
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