한방재료의 하나인 택사(Alismatis Rhizoma, AR)로부터 단백성 trypsin inhibitor(TI)를 분리, 정제하여 특성을 조사하였다. 정제과정은 0-80.% 포화 황산암모늄을 이용한 염석법, DEAE-cellulose ion exchange chromatography, Sep-hadex G-150 chromatography 등을 이용하였다. 정제된 ARTI의 분자량을 gel filtration과 SDS-PAGE 한 결과 모두 약 23,000 Da으로 나타나 monomer로 되어 있는 것으로 나타났다. 온도안정성에 있어 0-6$0^{\circ}C$에서는 안정하였으나 그 이상의 온도에서는 약 35%가지 안정성이 떨어졌다. ARTI와 상품화된 soybean kunitz inhibitor의 저해능을 비교해 본 결과 ARTI 및 soybean inhibitor 각각의 농도가 0.071 $\mu$M, 1.7 $\mu$M일 때 0.025 g/$m\ell$ trypsin활성을 50% 정도 저해하는 것으로 나타났다. ARTI의 trypsin의 가수분해반응에 대한 저해형태는 비경쟁적 저해형인 것으로 나타났으며 km값은 0.81 $\mu$M이었다.
Lipoxygenase(LOX)와 kunitz trypsin inhibitor(KTI) 단백질이 결핍된 non-GM콩(개척#2, 진양콩 및 CJ#1)의 가공적성을 알아보기 위하여 일반콩(태광콩)을 대조로 하여 간장을 제조하여 이화학적 특성 및 항산화 활성을 비교하였다. 원료콩의 일반성분은 시료간에 비슷한 조성을 보였으나, 총 페놀 및 플라보노이드 함량은 태광콩에 비해 LOX와 KTI 단백질 결핍콩에서 유의적으로 높았다. 간장 중 총당 및 환원당 함량은 태광콩 간장이 가장 높았으며, 총 질소 및 아미노태 질소 함량은 진양콩 간장이 가장 높았다. 무기물은 진양콩 및 CJ#1 간장, 아미노산은 3종의 LOX 및 KTI 단백질 결핍콩 간장이 태광콩 간장에 비해 높은 함량이었다. 간장의 갈색도는 진양콩 간장이 가장 높았으며, 황색도는 진양콩 간장이 태광콩 간장과 비슷한 수준이었다. 간장의 종합적인 기호도는 단맛과 구수한 맛이 높았던 진양콩 간장의 점수가 가장 높았다. 간장의 총 페놀 및 플라보노이드 함량은 LOX와 KTI 단백질 결핍콩 간장이 태광콩 간장에 비해 유의적으로 높았다. ABTS 및 DPPH 라디칼 소거활성은 총 페놀 함량에 의존적이었으며, FRAP법에 의한 환원력은 개척#2 및 CJ#1 간장이 태광콩에 비해 유의적으로 높았으며, $Fe^{2+}$ 킬레이트 활성은 태광콩 간장이 여타 간장의 활성에 비해 높았으나, 진양콩 간장과 비슷한 수준이었다. 따라서 LOX와 KTI 단백질 결핍콩으로 제조한 간장은 일반콩 간장에 비해 영양적 성분 및 항산화 활성이 높아 기능성 가공식품 소재로써 활용 가능성이 있는 것으로 판단된다.
성숙 콩[Glycine max (L.) Merr.] 종자는 약 40%의 단백질을 함유하고 있으며 아이소플라본, 사포닌, 루테인, 비타민등 다양한 기능성 성분을 함유하고 있다. 그러나, Kunitz Trypsin Inhibitor (KTI) 단백질, 렉틴 단백질, 7S α' 서버유닛 단백질이 함유되어져 있어 콩의 품질과 기능성을 저하시키고 있다. 본 연구는 콩 및 콩 제품의 품질과 기능성을 저하시키는 KTI, 렉틴 및 7S α' 서버유닛 3가지 단백질이 모두 유전적으로 결핍된 콩 계통(titilelecgy1cgy1 유전자형)을 선발하기 위하여 진행되었다. 3개의 모본(개척2호, PI506876, Le-16)을 이용한 유전집단으로부터 성숙 종자에서 KTI, 렉틴 및 7S α' 서버유닛 3가지 단백질이 모두 없는 titilelecgy1cgy1 유전자형을 가진 1개의 계통을 개발하였다. 개발된 계통은 자주색 꽃, 유한신육형, 노란종피을 가지고 있으며 초장은 58 cm로 대원콩(46 cm)보다 길었다. 백립중은 27.1 g으로 대원콩(29.0 g)보다 작았다. 본 연구를 통하여 선발된 계통은 KTI, 렉틴 및 7S α' 서버유닛 3가지 단백질이 모두 없는 고품질 기능성 콩 품종 육성을 위한 중간모본으로 이용될 수 있을 것으로 사료되었다.
성숙 콩[Glycine max (L.) Merr.] 종자에는 단백질, 지방, 탄수화물의 3대 영양소와 아이소플라본 등 다양한 기능성 성분이 함유되어 있다. 그러나, Kunitz Trypsin Inhibitor (KTI) 단백질, 렉틴 단백질, 난소화성 올리고당인 stachyose 성분이 함유되어져 있어 품질과 기능성을 저하시키고 있다. 본 연구는 콩 및 콩 제품의 품질과 기능성을 저하시키는 KTI 및 렉틴 단백질과 stachyose의 성분 함량과 관련된 유전자들이 모두 열성으로 작용하는 콩 계통(triple recessive genotype)을 선발하기 위하여 진행되었다. 3개의 모본(개척2호, PI200508, 14G20)을 이용한 육종집단으로부터 성숙 종자에서KTI 및 렉틴 단백질이 없으면서 stachyose의 함량이 일반콩보다 현저히 적은 triple recessive 유전자형(titilelers2rs2) 개체를 선발하였다. 선발된 계통의 초장은 51 cm 정도였으며 백립중은 31.0 g으로 대립이었으며 종피색 및 제색은 노란색이었다. Stachyose의 함량(g/kg)은 일반콩(13.5 g/kg)보다 훨씬 낮았다(3.8 g/kg). 본 연구를 통하여 선발된 계통은 KTI 단백질과 렉틴 단백질이 동시에 없으며 stachyose의 함량이 낮은 다양한 콩 품종 육성을 위한 중간모본으로 이용될 수 있을 것으로 사료되었다.
콩[Glycine max (L.) Merr.]은 한반도와 남만주 및 중국일대가 원산지로 예로부터 식물성 단백질과 지방을 얻기 위하여 아시아 지역에서 많이 재배되었다. 최근에는 다양한 기능성 성분들이 발견됨에 따라 단순한 양질의 단백질 공급원의 역할을 넘어 건강 기능성 식품으로 주목받고 있지만 기능성과 가공 적성 및 품질을 저해시키는 성분들도 다수 존재한다. 본 연구는 콩 및 콩 제품의 품질과 기능성을 떨어뜨리는 성분인 Kunitz Trypsin Inhibitor(KTI) 단백질이 없으면서 난소화성 올리고당인 stachyose 함량이 낮은 rs2rs2titi 유전자형을 가진 노란 콩 계통을 선발하기 위하여 진행되었다. Jinyangkong ${\times}$ 15G1의 조합으로 얻어진 육종집단으로부터 rs2rs2titi 유전자형을 가진 4개의 계통(603-1, 603-2, 625, 694)을 선발하였다. 선발된 4개의 계통 $F_5$ 성숙 종자에서 KTI 단백질은 없었으며 초장은 64~66 cm, 백립중은 26.1~29.2 g으로 대립이었으며 종피색과 제색은 모두 노란색이었다. 선발계통의 stachyose 함량은 3.09~3.50 g/kg으로 RS2RS2 유전자형을 가진 대조품종들의 stachyose 함량 13.02~16.81 g/kg보다 매우 낮았다. 본 연구를 통하여 선발된 계통들은 Kunitz Trypsin Inhibitor (KTI) 단백질이 없으면서 난소화성 올리고당인 stachyose의 함량이 낮은 고품질 기능성 노란 콩 품종육성을 위한 중간모본으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
일차아민과 반응하여 형광활성화합물을 형성하는 fluorescamine을 이용하여 어떤 시료중에 포함된 극미량의 trypsin inhibitor의 함량 또는 그 활성도를 측정하는 형광방법을 기술하였다. 세 가지 두류종실 즉 대두, 녹두 및 팥의 상대적 antitryptic activity 측정을 예로들어 본방법의 분석화학 우적수성을 여러 각도에서 검토하였던바, 효소반응속도론적 접근으로 이루어진 본방법은 동일한 접근으로 이루어진 기존의 흡광광도방법과 비교하여 측정감도는 대략 100배이상이였으며 casein과 같은 천연기질을 사용하는 경우에서는 실험과정이 보다 단순하여 빠른 방법으로 판정되었다.
An experiment was conducted to determine the standardized ileal digestibility (SID) of amino acids (AA) in four sources of full-fat soybeans (FFSB) and in one source of soybean meal (SBM). The FFSB had different concentrations of trypsin inhibitor units (TIU) and included two sources of conventional FFSB, and two sources of a soybean variety that was selected for a reduced concentration of the Kunitz trypsin inhibitor. The conventional FFSB was either low temperature-processed (LT-FFSB-CV; 37.7% CP, 35.4 TIU/mg) or high temperature-processed (HT-FFSB-CV; 40.5% CP, 4.4 TIU/mg). The low-Kunitz FFSB was also either low temperature-processed (LT-FFSB-LK; 36.2% CP, 23.5 TIU/mg) or high temperature-processed HT-FFSB-LK; (38.2% CP, 4.0 TIU/mg). The SBM contained 47.5% CP and 3.20 TIU/mg. Twelve weanling barrows (initial BW: $11.1{\pm}1.3\;kg$) were fitted with a T-cannula in the distal ileum. Pigs were allotted to a replicated $6{\times}6$ Latin square design with six diets and six periods per square. Five diets were prepared using each of the soybean sources as the only source of AA in the diet. An N-free diet was also included in the experiment to measure basal endogenous losses of AA. The two low temperature-processed FFSB had lower (p<0.05) AID and SID values for all indispensable AA than the two high temperature-processed FFSB and SBM. The SID values for all indispensible AA except Trp were greater (p<0.05) in LT-FFSB-LK than in LT-FFSB-CV, but the SID of AA in HT-FFSB-CV and HT-FFSB-LK were not different. The SID of AA in SBM were not different from the SID in HT-FFSB-CV and in HT-FFSB-LK. Results of this experiment show that a reduction of the TIU from 35.4 to 23.5 TIU/mg will improve the SID of AA, but this reduction is not sufficient to completely ameliorate the negative impact of trypsin inhibitors. Results also show that the SID of AA in high temperature-processed FFSB is similar to that in de-hulled SBM.
A total of 864 broiler chicks were used at Kansas State University and the University of Nebraska to determine the effects of heat treatment of two soybean genotypes on the growth performance. The soybeans were Williams 82 variety with (+K) and without (-K) gene expression for the Kunitz trypsin inhibitor. Heat treatment (autoclaving at $121^{\circ}C$ and $1.1kg/cm^2$) was applied for 0, 3, 6, 12, 18, and 24 min, resulting in a $2{\times}6$ factorial arrangement of treatments. Station and station treatment effects occurred, indicating that response in nutritional value of the soybean genotypes to heat treatment varied from year to year and location to location. However, the interactions were in magnitude of response rather than direction of response, with greater reductions in trypsin inhibitor concentrations for the soybeans heat processed at the Nebraska location. Pooled data indicated that -K supported greater (p<0.001) ADG, ADFI and gain/feed than the +K genotype. As the length of heat treatment increased, the ADG, ADFI, and the gain/feed ratio increased for chicks fed both soybean genotypes (p<0.0001). However, heating the -K soybeans resulted in a greater response in ADG, ADFI, and gain/feed than heating the +K soybeans (genotype heat treatment interaction, p<0.001). Pancreatic weights (mg pancreas/g of BW) of chicks fed -K soybeans were reduced compared to those from chicks fed +K (p<0.001). Increasing heat treatment decreased pancreas weights in chicks fed both soybean genotypes (p<0.001). Chicks fed heated soybeans in the Nebraska experiment had lower pancreatic weights than chicks fed heated soybeans in the Kansas experiment (station heat treatment interaction, p<0.0001). Chick growth performance was improved and pancreatic weights decreased by feeding raw -K soybeans versus raw +K soybeans, and by increasing heat treatment of both soybean genotypes. However, the response to heat treatment was not independent of genotype. Both +K and -K soybeans heated for 24 min supported similar ADG, ADFI, gain/feed, and pancreas weights, although chicks fed raw +K soybeans had lower growth performance than chicks fed -K soybeans. In conclusion, raw -K soybeans supported greater growth performance in broiler chicks than raw +K soybeans, although this advantage was lost when both soybean genotypes were heated for 24 min. Heat treatment of +K soybeans supported similar growth performance to heated -K soybeans, even though +K soybeans supported lower rates and efficiencies of gain than -K soybeans when fed raw.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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