In order to clone the gene coding for 3-isopropylmalate dehydrogenase of Muyveromyces fragilis, a shuttle plasmid vector pHNll4 was used. It can serve as a cloning vector in Saccharomyces cerevisiae DBY746 for other Sau3AI-cleaved DNA segment of Kluyveromyces fragilis. Two cloned fragments which complement the leu2 mutation of Saccharomyces cerevisiae and E, coli were obtained. Their length was 4.4 kb an 3.5 kb, and their orientation was opposite each other. From the fact that the two recombinant plasmids were expressed in Saccharomyces cerevisiae and E, coli, probably the two inserts had the promoter of Ktuyveromyces fi-agilis and that of Kluyveromyces fiagilis was efficiently assosiated with RNA polymerase of Saccharomyces cerevisiae and E. coli. According to the result of Southern hybridization, we thought that the cloned fragment has low homology with 3-isopropylmalate dehydrogenase coding region of E. coli and Saccharomyces cerevisiae.
Proceedings of the Korean Institute of Resources Recycling Conference
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2001.05b
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pp.121-125
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2001
For the probiotic feed production, aerobic liquid fermentation of pulverized food wastes was attempted with a yeast Kluyveromyces marxianus. After grinding finely, optimal fermentation conditions of the substrate was investigated by shaking culture. The most active growth of the yeast was shown at solid content of 10%. The proper addition of urea(0.5g/l), o-phosphate(0.4g/l), molasses(4g/l), and yeast extract (1g/1) increased cell growth rate and viable cell count. For optimizing, the nutrients were all added to substrate and fermentation was carried in 2 litre jar fermenter. For the stimulation of hydrolyzing enzyme excretion, mixed culture with Aspersillus oryzae was also conducted. In 12 hours of fermentation, viable cell count of the yeast Kluyveromyces marxianus amounted to the number of 1.4 $\times$10$^{10}$ /1 in the culture medium.
To produce ethanol from Jerusalem artichoke powder efficiently, Kluyveromyces marxianus F043 cells were encapsulated in 2% sodium alginate and were cultured in a countinuous reactor to investigate the fermentation properties. Immobilized K. marxianus F043 cells were activated for 48 hours in a fermentor for continuous ethanol production. The culture in a CSTR using a Jerusalem artichoke substrate treated with 2% cellulase showed a decrease in ethanol concentration and an increase in residual saccharide concentration with a increasing dilution rate. Optimum conditions for high ethanol productivity and low residual saccharide output were clarified to be given at a dilution rate of 0.2 h$^{-1}$ and a Jerusalem artichoke medium concentration of 75 g/l. Ethanol productivity of 3.1 g/l-h and saccharide utilization of 62.6% were obtained under the optimum condition. When the fermentation was performed for 3 weeks under these conditions, the effluent medium showed stable ethanol concentrations of 16.3 - 17.9 g/l and viable cells of 6.60-7.16 log cells/ml without contamination. Trace amounts of methyl, n-propyl, iso-butyl, isoamyl alcohols besides ethanol were detected.
BACKGROUND: Identification and characterization of endophytic yeasts inhabiting the roots of Ulmus parvifolia Jacq. and Quercus salicina Blume require biotechnological and culture-based techniques. METHODS AND RESULTS: Homogenized U. parvifolia and Q. salicina root samples were spread onto four types of agar medium containing ancgtibiotics, L-sorbose, and Triton X-100. In total, 25 yeast strains were isolated and subjected to phylogenetic analysis based on their internal transcribed spacer region sequences. The results revealed that the yeast genera Cyberlindnera (12 isolates) and Cryptococcus (1 isolate) were associated with roots of U. parvifolia; and the genera Rhodotorula (8 isolates), Trichosporon (3 isolates), and Kluyveromyces (1 isolate) were associated with roots of Q. salicina. Additionally, a Kluyveromyces isolate produced a detectable level of bioethanol. The yeast strains reported herein may be used in industrial production of biosurfactants and bioethanol. CONCLUSION: Our findings revealed that the endophytic yeast genera Cyberlindnera and Cryptococcus predominated in roots of U. parvifolia; and the genera Rhodotorula (8 isolates), Trichosporon (3 isolates), and Kluyveromyces (1 isolate) predominated in roots of Q. salicina. Additionally, Kluyveromyces isolates produced a detectable level of bioethanol.
To enhance the productivity of fruit flavor compounds from whey by the lactose fermenting yeast, Kluyveromyces lactzs ATCC 8585 was treated with N-methyI-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG). After the NTG treatments, a mutant showing resistance to antifungal activity of geraniol, and strong fruity but low yeasty flavor was selected and named as K. lactis 450 K. Flavor compounds from 3-day culture broth were extracted with pentane-dichloromethane (2:l) and the concentrated oleoresins were analyzed by gas chromatography. The mutant strain produced more classes and larger amount of flavor compounds than the parent stlain. Tentatively identified volatile compounds from the culture of the mutant were: terpenes such as myrcenol; alcohols such as cis-3-hexenol, n-hexanol; esters such as ethyl isovalerate, cis- 3-hexenyl n-butyrate, n-amyl-n-hexanoate, phenyl ethyl n-propioate; ketones such as methyl vinyl ketones; other compounds such as vanillin, 3-methylcoumarin.
To develop thermostable ethanol fermentative yeast strain for lignocellulosic simultaneous saccharification and fermentation, high ethanol producing yeast, Saccharomyces cerevisiae CHY1012 and thermostable yeast, Kluyveromyces marxianus CHY1703 were fused by protoplast fusion. The thermostable fusant, CHY1612 was identified as a Kluyveromyces marxianus by phenotypic and physiological characteristics, as well as molecular analysis based on the D1/D2 domains of the large subunit (26S) rDNA gene and the internally transcribed spacer (ITS) 1 + 2 regions. For lignocellulosic ethanol production, AFEX pretreated barley straw at $150^{\circ}C$ for 90 min was used in a simultaneous saccharification and fermentation (SSF) process using thermotolerant CHY1612. The SSF from 16% pretreated barley straw at $43^{\circ}C$ gave a saccharification ratio of 90.5%, a final ethanol concentration of 38.5 g/L, and a theoretical yield of 91.2%. These results show that K. marxianus CHY1612 has potential for lignocellulosic ethanol production through simultaneous saccharification and fermentation with further development of process.
To develop the functional pear fruitlet product, we prepared fermented pear fruitlet product (FPFP) from mixed fermentation of Saccharomyces cerevisiae, Kluyveromyces fragilis and Lactobacillus plantarum. Then, we investigated their several physiological functionalities. Among several physiological functionalities, antihypertensive angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory activity of the FPFP was the highest of 87.4% and its antioxidant activity was also showed 69.6%. FPFP from mixed fermentation by yeasts and Lactobacillus plantarum after thawing of frozen pear at $20^{\circ}C$ showed higher physiological functionalities than those of single fermentation by Saccharomyces cerevisiae or Bacillus subtilis after $40^{\circ}C$ of thawing.
To produce ethanol from Jerusalem artichoke powder efficiently, Kluyveromyces marxianus FO43 cells were encapsulated in 2% sodium alginate and were cultured in batch reactor to investigate the fermentation properties. Batch culture of immobilized cells left for 4 days in 15% Jerusalem artichoke medium showed ethanol concentration of 3.38%(w/v) and ethanol yield to theoretical value of 54.20%, lower than 3.76%(w/v) and 71.13% for the culture of free cells. Addition of cellulase to $15{\sim}20%$ Jerusalem artichoke media increased the production of ethanol, owing to remarkable reduction in consistency of the suspension. So it was possible to achieve an ethanol concentration of 5.57%(w/v) arid an ethanol yield to theoretical value of 68.86% in even 20% Jerusalem artichoke medium by cultivation of immobilized cells for 4 days. The alginate beads showed constant ethanol productivity after recycling 11 times (22 days) in repeated batch fermentation.
This study was carried out to investigate characteristics of acid and alcohol fermented milk by mixed starters made by Lactobacillus bulgaricus (KCTC 3635) and Kluyveromyces marxianus (KCTC 17212) for 36 hours when the curds were formed. Final pH and titratable acidity were about 4.5 and 0.68%, respectively. The viable cell counts of lactic acid bacteria and yeast for alcohol fermented milk were increased to $3.2{\times}10^9 CFU/mL$ and $5.3{\times}10^9 CFU/mL$, respectively. The ethanol contents increased to 0.35% during fermentation. Antitumor activities of the fermented milk against tumor cell lines, such as HEp-2, HEC-1B, SW-156 and SK-MES-1 showed to 86.6, 70.3, 60.4 and 57.14%, respectively.
In order to produce alcohol for the alternative energy from dried powder of Jerusalem artichoke was investigated with Kluyveromyces marxianus UCD(FST)55-82, which was reported to assimilate inulin. The optimal condition for the production of ethanol by K. marxianus was elucidated to be incubation temperature of $30^{\circ}C$, initial pH 5.44, agitation of 100 rpm, 1,000 ml of medium in a 2.5l-vessel, anaerobic state, and inoculation of 2.5%(v/v). Addition of antifoam A concentrate(si1icon polymer) of 0.01% and urea of 0.1% increased the concentration of ethanol effectively. The optimized condition showed ethanol concentration of 6.8%(v/v) in Jerusalem artichoke liquid medium, production yield of 91.91% and productivity of 2.71 g/l/hr during the first day and 0.71g ethanol/l/hr during four days of incubation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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