• 한국미생물·생명공학회지
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• 제27권6호
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• pp.452-457
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• 1999

Several bacterial strains utilizing crude oil as their sole carbon and energy sources were isolated from marine. One of the strains named KCL-1 showed the highest degradative activity for crude oil and the best growth rate. This strain was identified as a Klebsiella sp. based on the morphological, biochemical, and physiological characteristics. The optimum cultural conditions were as follows; $32^{\circ}C$~$37^{\circ}C$ for temperature and 7.0 for initial pH. Additionally, the optimal concentration of sodium chloride was 3.0%, indicating that this strain was derived from seawater. KCL-1 could use several kinds of n-alkane hydrocarbons from octadecane to hexacosane as a sole carbon source. The degradation of crude oil by KCL-1 was stimulated by addition of octadecane in the culture. The emulsifying activity by KCL-1 was highest after 3 days of cultivation under the condition of 3.0% sodium chloride, pH 7.0 and $37^{\circ}C$.

• 생명과학회지
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• 제14권5호
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• pp.834-839
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• 2004

원유 분해능이 강력한 해양균주 Klebsiella sp. KCL-1의 표면활성 능력과 유화활성의 향상을 위하여 An et. al.이 보고한 Pseudomouas sp. SW-3균주로부터 cloning된 pET-Lip을 KCL-1에 도입하였다. KCL-1/pET-Lip은 2% glucose, 4% soybean oil, 4% kerosene 각각의 탄소원에 대하여 야생형균주 KCL-1과 비교하여 우수한 표면장력 저하 능력을 가지게 된 것을 알 수 있다. KCL-1/pET-Lip은 4% soybean oil를 유일한 탄소원으로 배지에 첨가한 경우 표면장력이 55 dyne/cm에서 32 dyne/cm로 줄어들었다. 세포의 성장은 2% glucose가 탄소원으로 사용된 경우 성장이 최대로 확인되었다. 0.2% glucose와 2% soybean oil을 복합적으로 첨가한 경우 2% glucose를 탄소원으로 사용한 경우에 비해 균의 생육도는 별 차이를 보이지 않으나 표면 장력에는 뚜렷한 차이를 보였다. 4% soybean oil을 사용한 경우와 비교할 경우 균의 생육도는 월등히 높으며, 표면장력의 저하능은 96시간째에 차이가 2 dyne/cm로 비슷해진다. 따라서 탄소원으로서 glucose는 세포의 성장과 관련이 있고, soybean oil 경우는 표면 장력 저하와 관계가 있는 것으로 예상된다. 또한 유화활성의 경우 사용된 모든 기질에 대하여 유화활성이 증가하는 것을 확인하였다. 특히 대두유를 기질로 사웅한 경우 유화활성이 가장 높았다 대두유를 탄소원으로 사용하여 KCL-1/pET-Lip 을 48, 72, 96시간 배양한 세포 추출물에서 42 kDa의 lipase로 추정되는 단백질이 발현됨을 확인하였다. 결과적으로 lipase를 도입한 KCL-1/pET-Lip의 표면활성 변화 능력이 월등히 향상된 것으로 추정된다.

• BMB Reports
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• 제34권6호
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• pp.584-589
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• 2001

One of the cryptic plasmids from the oil degrading bacterium Klebsiella sp. KCL-2, the small plasmid pGD2, has been identified and characterized. This plasmid has a size of 3.6 kb with unknown functions. We constructed the recombinant plasmid pMGD2. The nucleotide sequences of the plasmid were determined and two open reading frames were detected. ORF1 encodes a replication initiator protein (RepA), which has a high degree of homology with the protein of ColE2 plasmid. The product encoded by ORF2 showed a high similarity with the transposase protein of IS5. IS5 is 1195 by long and contains an inverted terminal repetition of 16 bp with one mismatch. Stem-loop structures in the 5'untranslated region of the repA suggest that a putative gene, incA, is located in a complementary strand to the leader region of the repA mRNA.