Two separate trials were conducted to determine the effects of uterine priming prior to first breeding and quantify any changes in the reproductive efficiency of gilts. In trial I twelve (12) gilts were randomly assigned to 3 treatments:T1:infusion of distilled water (control), T2: single infusion of killed semen (KS1), and T3: double infusion of killed semen (KS2). Each treatment had 4 breeding gilts which were bred by natural insemination (NI). In trial II, another set of 12 breeding gilts were randomly allotted to the same treatments and were subsequently bred by artificial insemination (AI). Infusions, through the use of AI catheters, were done during the $2^{nd}$ estrous cycle for T1 and T2, whereas infusions for T3 were made during the $1^{st}$ and $2^{nd}$ cycles. Regular breeding was subsequently made during the $3^{rd}$ estrous cycle. All gilts that returned to cycle were rebred within the 30-day period. In trial I (natural breeding), total piglets born was higher (p<0.05) in T2 (12.75 piglets) and T3 (11.75 piglets) than in the control (10.5 piglets). T3 obtained the highest (p<0.05) litter size (10.25 piglets) and heaviest litter weight (74.12 kg) at 28 days weaning, followed by T2 (9.80 piglets and 65.0 kg, respectively). The control yielded the lowest (p<0.05) litter size (7.50) and the lightest litter weight (47.00 kg) at weaning. For Trial II gilts (artificially inseminated), T3 gave higher (p<0.05) litter size born alive (10.88 piglets), total piglets born (11.72 piglets) and live litter weight at birth (15.30 kg) than those of T2 and the control. These results indicate that prebreeding intrauterine infusion of killed boar semen, either single or double, improved the reproductive performance of gilts.
This study demonstrated that cryopreserved semen from dead fish can be used for seedling production. Yellow croakers, Larimichthys polyactis, were killed and stored at temperatures of $20^{\circ}C$ or $0^{\circ}C$ for 6 hours. At 2 hour intervals, semen from these fish was collected using abdominal pressure and evaluated for spermatozoa motility and semen cryopreservation. Semen collected after 6 hours from dead fish stored at $0^{\circ}C$ could be cryopreserved and attained fertilization and hatching rates of $15.0{\pm}1.2%$ and $14.8{\pm}1.6%$, respectively. This study suggests that germ cells such as the semen of dead fish can be cryopreserved and utilized in the restoration of a species.
Objectives : The aim of this study was to investigate the effects of Ginseng Radix (Panax ginseng C.A. MEY.), Zizyphi Spinosae Semen (Zizyphus spinosa HU.) and Rehmanniae Radix Preparat (Rehmannia glutinosa LIBOSCH.) on the serotonin- immunoreactivity cells in the Caudal raphe nuclei, Rostal raphe nuclei and hippocampus of the mouse brain. Methods : The mice were stressed by restraining for one hour and treated with herbal medicine by oral feeding. The mice were killed after one hour and observed by electron microscope after immunohistochemical staining. Results : In the caudal raphe nuclei of the medulla oblongata, the highest number of 5-HT immunoreactivity cells were observed at the Zizyphi Spinosae Semen-treated group, while the lowest level among the herbs treatment group was shown at the Ginseng Radix group. In the hippocampus, serotonin-immunoreactive cells were expressed significantly at the CA3 area while the lowest level of it was shown at the control group. In the midbrain, immunoreactive cells were expressed higher than other groups, while observed at the lowest level in the control group. Conclusions : The extracts of Zizyphi Spinosae Semen, Rehmanniae Radix Preparat and Ginseng Radix show a certain degree of effect on the change of serotonin immunoreactive neurons as an index of nerve disorder.
Many skin diseases are caused by microbial infections. Representative pathogenic fungus and bacterium that cause skin diseases are Candida albicans and Staphylococcus aureus, respectively. Malassezia pachydermatis is a fungus that causes animal skin diseases. In this study, we propose a method for removing pathogenic microorganisms from the skin using relatively safe edible herbal extracts. Herbal extracts were screened for skin health through the removal of pathogenic microorganisms, and combinations for effective utilization of the screened extracts were identified. In this study, among methanol extracts of 240 edible plants, C. albicans, S. aureus, and M. pachydermatis were killed by extracts of 10 plants: Acori Gramineri Rhizoma, Angelicae Tenuissimae Radix, Cinnamomi Cortex, Cinnamomi Ramulus, Impatientis Semen, Magnoliae Cortex, Moutan Cortex Radicis, Phellodendri Cortex, Scutellariae Radix, and Syzygii Flos. By evaluating the synergistic antifungal activities against C. albicans using all 45 possible combinations of these 10 extracts, five new synergistic antifungal combinations, Acori Gramineri Rhizoma with Magnoliae Cortex extracts, Acori Gramineri Rhizoma with Phellodendri Cortex extracts, Angelicae Tenuissimae Radix with Magnoliae Cortex extracts, Magnoliae Cortex with Phellodendri Cortex extracts, and Phellodendri Cortex with Syzygii Flos extracts, were identified. By utilizing the selected extracts and five combinations with synergistic antifungal effects, this work provides materials and methods to develop new and safe methods for treating candidiasis using natural products.
The MTT assay is one of superior evaluation methods widely used to analyze the viability of metabolically active cell. It can be used to determine the percentage of viable sperm through measurement of the reduction of MTT granules at mitochondria in sperm tail. The purpose of this study is to determine the optimal condition of a simple and easy MTT assay to validate boar sperm viability and compare the accuracy of this test with microscopic examination. The MTT reduction rate for sperm viability were analyzed in microtiter plates (96 well) from 1 hr to 5 hr incubation periods at $37^{\circ}C$ using spectrophotometer (microplate reader) at 550 nm wavelength. The remainder of semen sample was simultaneously examined to compare the correlation of accuracy between MTT assay and other sperm parameters. Those sperm parameters were included the motility, survival rates, membrane integrity, mitochondria activity and acrosome integrity. The OD values of MTT assay (MTT reduction rates) did not greatly change at 1 hr to 5 hr incubation periods in different proportion of live and freeze-killed sperms (dead sperm). The MTT reduction rates or survival rates were decreased according to the different concentration of live and dead sperm. The linear regression at 1 hr and 4 hr incubation periods in sperm MTT assay was y=291.55x-72.176 and y= 180.64x-44.569, respectively. There are high correlation between 1 hr and 4 hr incubation periods (p<0.001). The results of MTT assay and other sperm parameters has a positive correlation (p<0.01 or 0.05). The correlation coefficients for MTT assay was 0.88115 for motility, 0.89868 for survival rates, 0.91722 for membrane integrity and 0.77372 for acrosome integrity, respectively. In conclusion, the MTT assay can be used as a reliable and efficient evaluation method for boar sperm viability. It can be use practical means to evaluate the quality of boar sperm by a fast, inexpensive and easy method.
This study was performed to examine the correlations among dog sperm viabilities evaluated by flow cytometry, by microscopic evaluation (ME), by carbo-xifluorescein diacetate and propidium iodide (CFDA/PI) and by hypoosmotic swelling (HOS) test. Semen were collected from 5 dogs ranging in age from 2 to 4 years. Each ejaculate was divided into 3 aliquots and different proportions of freeze-killed cells were added to each aliquot (1:0, 1:1 and 1:3). In the other experiment, semen was extended with Sweden extender containing 5% glycerol and equex STM paste, and frozen using liquid nitrogen vapor. Fresh and frozen-thawed dog sperm viability were assessed by flow cytometry using PI staining method. The accuracy of flow cytometry was evaluated by comparing with other classic assessments, microscopic evaluation, epifluorescence microscopic analysis using CFDA/PI, and HOS test. High correlations of sperm viabilities were found among flow cytometry, epifluorescence evaluation, HOS test (p<0.01) in fresh semen. Especially, sperm viability assessed by HOS test was highly correlated with viability by flow cytometry in all the ratios of live and dead spermatozoa, 1:0, 1:1 and 1:3 (p<0.01). The viability evaluated by ME were significantly correlated with that by flow cytometry in ratios of 1:0 and 1:3 (p<0.05) however, there was no significance in ratio of 1:1. The viability evaluated by C/p were highly correlated with that by flow cytometry in ratio of 1:0 and 1:1 (p<0.01) and significantly correlated in ratio of 1:3 (p<0.05). In frozen-thawed spermatozoa, the viability determined by HOS test was considerably correlated with that by flow cytometry (p<0.01). There was significant correlation between the viabilities by ME and by flow cytometry (p<0.05). But the viability evaluated by CFDA/PI was not correlated with viability by flow cytometry. The result from this study validate the use of flow cytometry as a precise method for assessing the viability of fresh and frozen-thawed dog spermatozoa.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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