In order to evaluate the neuroprotective effects of Kamisinsunbulo-dan(KSM), the cytotoxicity of amyloid β and the recovering effect of KSM were checked at first. Then the viability of C6 cells was tested in comparison with each concentration of KSM. The cytotoxicity of amyloid β(31-35) showed from 5 μM higher to 100 μM. And the recovering effect by KSM showed significantly at 100㎍/㎖. concentration. And the cell viability was shown significantly over 200 ㎍/㎖ of KSM. This is thought that the viability has some relation to length of culturing duration, 6 to 12 hrs. Lastly in the western blotting of APP, the amount of low molecule's APP was decreased. So the APP form ratio(APPr) changed to increase, and it meant that KSM can be used to lower the toxic APP, and can be a candidate for Alzheimer's disease.
KSM-2690 B (1), a peptide-polyketide hybrid compound, was discovered from an actinomycete strain (CJD 1) isolated from Dong-Baek hill on Jeju Island, Republic of Korea. The chemical structure of 1 was identified by using NMR, MS, and UV spectroscopic analyses. Careful analysis of 1D and 2D NMR data revealed that KSM-2690 (1) has an oxazole ring, a β-lactone-γ-lactam spirocycle ring, and both triene and diene structures. KSM-2690 B (1) showed inhibitory activities against E. coli at 200 ㎍/mL.
설계 개체의 결함경향성을 판별하는 위험도 예측 모델은 분석이나 설계 같은 소프트웨어 개발 초기 단계에서 시스템의 문제 부분들을 찾아 내는데 사용된다. 복잡도 메트릭에 기반한 많은 위험도 예측 모델들이 제안되었지만 그들 대부분은 모델 훈련을 위한 훈련데이터 집합을 필요로 하는 모델들이었다. 하지만 대부분의 개발집단은 훈련데이터 집합을 보유하고 있지 않기 때문에 이들 모델들은 대부분의 개발집단에서 사용될 수 없다는 커다란 문제점이 있었다. 이러한 문제점을 해결하기 위해 본 논문에서는 Kohonen SOM 신경망을 이용하여 훈련데이터 집합을 사용하지 않는 새로운 예측 모델 KSM을 제안한다. 여러 내부 특성들과 모델 사용의 용이성 그리고 모의실험을 통한 예측 정확도 비교를 통해 KSM을 잘 알려진 예측 모델인 역전파 신경망 모델(BPM)과 비교하였으며 그 결과 KSM의 성능이 BPM에 근접하다는 것을 보였다.
A novel glucanhydrolase from a mutant of Lipomyces starkeyi KSM 22 has additional amylase activity besides mutanolytic activity and has been suggested as promising anti-plaque agent. It has been shown effective in hydrolysis of mutan, reduction of mutan formation by Streptococcus mutans and removal pre-formed sucrose-dependent adherent microbial film and has been strongly bound to hydroxyapatitie. These in vitro properties of Lipomyces starkeyi KSM 22 glucanhydrolase are desirable for its application as a dental plaque control agent. In human experimental gingivitis model and 6 month clinical trial, mouthrinsing with Lipomyces starkeyi KSM 22 dextranase was comparable to 0.12% chlorhexidine mouthwash in inhibition of plaque accumulation and gingival inflammation and local side effect was negligible. This study was aimed to evaluate the cytotoxic effect of Lipomyces starkeyi KSM 22 glucanhydrolase on human gingival fibroblasts. Primary culture of human gingival fibroblasts at the 4th to 6th passages were used. Glucanhydrolase solution was made from lyophilized glucanhydrolase powder from a mutant of Lipomyces stakeyi KSM 22 solved in PBS and added to DMEM medium to the final concentration of 0.5, 1, and 2 unit. Cells were exposed to glucanhydrolase solution or 0.1 % chlorhexidine and the cells cultured in DMEM with 10% FBS and 1% antibiotics as control. After exposure, the morphological change, cell attachment, and cell activity by MTT assay were evaluated in 0.5, 1.5, 3, 6, 24 hours after treatment. The cell proliferation and cell activity was also evaluated at 2 and 7 days after 1 minute exposure, twice a day. The cell morphology was similar between the Lipomyces smkeyi KSM 22 glucanhydrolase groups and control group during the incubation periods, while most fibroblasts remained as round cell regardless of incubation time in the chlorhexidine group. The numbers of the attached cells in the glucanhydrolase groups were comparable to that of control and significantly higher than the chlorhexidine group. The numbers of the proliferated cells in the glucanhydrolase groups at 7 days of incubation were comparable to the control group and higher than the chlorhexidine group. The cell activity in glucanhydrolase groups paralleled with the increased cell number by attachment and proliferation. According to these results, Lipomyces starkeyj KSM 22 glucanhydrolase has little harmful effect on attachment and proliferation of human gingival fibroblasts, in contrast to 0.1% chlorhexidine which was cytotoxic to human gingival fibroblasts. Therefore this glucanhydrolase preparation is considered as a safe and promising agent for new mouthwash formula in the near future.
The amount of phenol and NaOH for the colorimetric determination of ammonia in Korean standard methods (KSM) is found to be highly excessive compared to the standard methods of several other countries. The absorbance of indophenol formed by the Berthelot reaction for ammonia analysis was measured under the various reaction conditions classified in experiment groups 1, 2, 3, 4 and KSM and American standards methods (ASM), and the relationships between the absorbance of indophenol and concentration of ammonia were compared. The amount of phenol can be reduced to 10 g (current 25 g in KSM) and NaOH can be reduced to 1.76 g (current 11 g in KSM) for the preparation of 200 mL phenate solution, and the absorbance sensitivity increased. The concentration of the phenol and NaOH correlatively affect the pH of the solution, which is a critical variable in achieving the maximum sensitivity and rapid and stable color development.
A novel glucanhydrolase from Lipomyces starkeyi KSM 22 has been suggested as a promising anti-plaque agent because it has been shown to have additional amylase activity and mutanase activity besides dextranase activity and to strongly bind to hydroxyapatite. Mouthrinsing with Lipomyces starkeyi KSM 22 glucanhydrolase solution was comparable to 0.12% chlorhexidine mouthwash in inhibition of plaque accumulation and gingival inflammation and local side effects were less frequent and less intense in human experimental gingivitis. In this study, Lipomyces starkeyi KSM 22 glucanhydrolase mouthrinses (1 and 2 unit/ml) were compared with a control mouthrinse (commercial 0.01% benzethonium chloride mouthrinse, $Caregargle^{(R)}$, Hanmi Pharmaceuticals) in the ability to inhibit plaque formation. A 3-replicate clinical trial using 4-day plaque regrowth model was used. Fifteen volunteers were rendered plaque-free on the 1st day of each study period, ceased toothcleansing, and rinsed 2X daily with allocated mouthrinse thereafter. On day 5, plaque accumulation was scored and the washout periods was 9 days for the next trial. Lipomyces starkeyi KSM22 glucanhydrolase(1 unit and 2 unit)- containing mouthrinse resulted in Significantly lower plaque formation in plaque area and thickness, compared to the control mouthrinse. There was no significant difference in plaque inhibition between enzyme-mouthrinses at 2 different concentrations used. This glucanhydrolase- containing mouthwash resulted in significantly lower plaque area severity index score and tended to have lower plaque thickness severity index score than those of control mouthrinse. But there was no significant difference according to the enzyme concentration. From these results, Lipomyces starkeyi KSM 22 glucanhydrolase-containing benzethonium chloride mouthrinse has greater anti-plaque effect than the commercial mouthrinse alone. Therefore this glucanhydrolase preparation is a promising agent for new mouthwash formulation in the near future.
Silver-needle shaped crystals of $KLa_2Sb_3S_9$ from $K_2S_x$ flux and $KSm_2Sb_3Se_8$ from NaCl/KCl flux reactions were obtained and their crystal structures were determined by the single crystal X-ray diffraction method. $KLa_2Sb_3S_9$ crystallizes in the orthorhombic noncentrosymmetric space group $P2_12_12_1$ (No.19) with a unit cell of a = 4.220(3) ${\AA}$, b = 24.145(2) ${\AA}$, c = 14.757(5) ${\AA}$ and Z = 4. $KSm_2Sb_3Se_8$ crystallizes in the orthorhombic space group Pnma (No.62) with a unit cell of a = 16.719(3) ${\AA}$, b = 4.1236(8) ${\AA}$, c = 22.151(4) ${\AA}$ and Z = 4. Both structures have three-dimensional tunnel frameworks filled with $K^+$ ions. $KSm_2Sb_3Se_8$ is an ordered version of $ALn_{1{\pm}X}B_i{4{\pm}X}S_8$, and it is made up of NaCl-type and $Gd_2S_3$-type fragments. $KLa_2Sb_3S_9$ also contains building fragments similar to those of $KSm_2Sb_3Se_8$, however, there are chalcogen-chalcogen bonds in the $Gd_2S_3$-type fragment. The formula of $KLa_2Sb_3S_9$ can be described as $(K^+ )(La^{3+})_2(Sb^{3+})^3(S^{2-})_7(S_2^{2-})$.
토양으로부터 maltopentaose생산성 amylase를 분비하는 세균 KSM B-404를 분리하여 그의 형태적, 생리적인 특성을 고려한 결과 Bacillus megaterium으로 동정되었다. 효소는 ($NH_4$)$_2$$SO_4$ 침전 분획, DEAE-Toyopearl 및 Superdex 75 HR 10/30 크로마토그래피로 129배 정제되었으며 21.4%의 활성이 회수되었다. 정제된 효소를 SDS-PACE로 분석한 결과 분자량은 약 68 kDa이었고, 최적 반응 온도는 $50^{\circ}C$이며 $Ca^{2+}$ 이온의 존재 시 열 안정성이 증가하였다. 한편 최적 반응 pH는 6.0~7.0부근이며 알칼리 조건에서도 안정하였다. 또한 효소의 활성은 $Cu^{2+}$ , $Hg^{2+}$ 그리고 특히 Fe/eup 3+/이온 등의 금속이온에 의해 강하게 저해 받았고 acetic anhydride, EDTA , hydroxylamine-HCI, $\rho$ - chloromercuribenzoate 등의 저해제에 의해서 활성이 저해되었으나 concanavalin A에 의한 저해 효과는 나타나지 않았다. 전분의 가수분해 산물을 HPLC로 분석한 결과 maltopentaose가 주산물로 나타났으며 반응 24시간 후 총 가수분해 산물의 약 52%를 차지하였다.
퇴비에서 maltotetraose 생산성 아밀라제를 분비하는 세균 KSM-35를 분리하여 그의 형태적, 생화학적 특성을 고려하여 Steptomyces albus로 잠정 동정 하였다. 이 균주가 생산하는 아밀라제는 유안침전 분획, DEAE-Toyo pearl 및 2회의 sephadex-100 크로마토그라피로 44.5배 정제하며 27.1%의 활성을 회수할 수 있었다 이 효소의 등전점은 4.3이었으며 SDS-PAGE로 분석한 결과 분자량은 약 50,000이었다. 이 균주의 아밀라제를 2% 전분과 26시간 반응시킨 후 생성된 올리고당류를 HPLC로 조사한 결과 56%가 maltotetraose로서 주산물이었고 maltose와 maltoriose가 각각 20% 및 16%를 차지하였으며 기타 소량의 glucose, maltopentaose가 검출되었다.
A novel glucanhydrolase from a mutant of Lipomyces starkeyi(KSM 22)has been shown effective in hydrolysis of mutan, reduction of mutan formation by Streptococcus mutans and removal pre-formed sucrose-dependent adherent microbial film and Lipomyces starkeyi KSM 22 dextranase has been strongly bound to hydroxyapatitie. These in vitro properties of Lipomyces starkeyi KSM 22 dextranase are desirable for its application as a dental plaque control agent. This study was performed to determine oral hygiene benefits and safety of dextranase(Lipomyces starkeyi KSM 22 dextranase)-containing mouthwash in human experimental gingivitis. This 3-week clinical trial was placebo-controlled double-blind design evaluating 1U/ml dextranase mouthwash and 0.12% chlorhexidine mouthwash. A total 39 systemically healthy subjects, who had moderate levels of plaque and gingivitis were included. At baseline, 1, 2 and 3 weeks, subjects were scored for plaque(Silness and $L{\ddot{o}e$ plaque index and plaque severity index), gingivitis($L{\ddot{o}e$ and Silness gingival index), and at baseline and 3 weeks of experiment, subjects were scored for plaque(Turesky-Quingley-Hein's plaque index and plaque severity index), tooth stain(Area and severity index system by Lang et al). Additionally, oral mucosal examinations were performed and subjects questioned for adverse symptoms. Two weeks after pre-experiment examinations and a professional prophylaxis, the subjects provided with allocated mousewash and instructed to use 20-ml volumes for 30s twice dailywithout toothbrushing. All the groups showed significant increase in plaque accumulation since 1 week of experiment. During 3 weeks' period, the dextranase group showed the least increase in plaque accumulation of Silness and $L{\ddot{o}e$ plaque index, compared to the chlorhexidine and placebo groups, but chlorhexidine group showed the least increase inplaque accumulation of Turesky-Quingley-Hein's plaque index. As for gingival inflammation, all the groups showed significant increase during 3 weeks of experiment. The dextranase group also showed the least increase in gingival index score, compared to the chlorhexidine as well as the placebo groups. Whereas the tooth stain was increased significantly in the chlorhexidine group, compared to the baseline score and the placebo group since 3 weeks of mouthrinsing. It was significantly increased after 3 weeks in the dextranase group, still less severe than the chlorhexidine group. As for the oral side effect, the dextranase group showed less tongue accumulation, bad taste, compared to the chlorhexidine group. From these results, mouthrinsing with Lipomyces starkeyi KSM 22 dextranase was comparable to 0.12% chlorhexidine mouthwashin inhibition of plaque accumulation and gingival inflammation and local side effects were if anything less frequent and less intense than chlorhexidine, in human experimental gingivitis. All data had provided positive evidence for Lipomyces starkeyi KSM 22 dextranase as an antiplaque agent and suggested that further development of dextranase formulations for plaque control are warranted.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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