• 제목/요약/키워드: KEX2

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Endoproteolytic Processing of Human Parathyroid Hormone in Saccharomyces cerevisiae Mutants Lacking Genes Encoding the Yap3, Mkc7, and Kex2 Endoproteases

  • Choi, Won-A.;Kang, Hyun-Ah;Chung, Bong-Hyun
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제9권5호
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    • pp.679-682
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    • 1999
  • When the human parathyroid hormone (hPTH) is expressed as a secretory product in S. cerevisiae, most of the secreted hPTH is internally cleaved by endoproteolytic processing. To investigate whether the yeast endoproteases such as Kex2p, Yap3p, and Mkc7p are involved in the endoproteolytic processing of hPTH in S. cerevisiae, hPTH was expressed in S. cerevisiae mutants deficient in one or two of the following well-known endoproteases such as Kex2p, Mkc7p, and Yap3p. Among these mutants, the yap3-disrupted(yap3$\Delta$) and yap3/mkc7-disrupted (yap3Δmkc7$\Delta$) yeasts showed a significant reduction in the extent of hPTH proteolysis. In contrast, the mkc7-disrupted (mkc7$\Delta$) yeast did not reduce the proteolysis of hPTH as compared to the wild type. This suggests that Mkc7p is not involved in the endoproteolytic processing of hPTH. It was also found that the kex2-disrupted (kex2$\Delta$) mutant was not able to secrete a detectable amount of hPTH.

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Saccharomyces cerevisiae에서 Absidia zychae 의 Carboxypeptidase A cDNA 의 발현과 특성 (Expression of Carboxypeptidase Z cDNA from Absidia zychae in saccharomyces cerevisiae and its characteristics)

  • 이병로;김종화
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제23권2호
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    • pp.150-155
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    • 1995
  • Carboxypeptidase Z(CPZ) cDNA of Absidia zychae was experssed in Saccharomyces cerevisiae. The expressed CPZ(YCPZ) was secreted about 30 mg/l into the medium and has a little higher molecular weight than the wild type CPZ in SDS-PAGE. By the result of N-terminal amino acid sequencing, YCPZ has additional 15 amino acids residues in N-terminus of CPZ. But YCPZ shows no difference with CPZ in enzyme activity and substrate specificity. For the identification of processing mechanism of YCPZ, 36-Arg was changed to 36-Thr by site specific mutagenesis. Mutant YCPZ does not processed at 36-Thr. It was, therefore, concluded that the YCPZ was processed by KEX2. According to endo F treatment, high amount of carbohydrate was N-glycosylated in YCPZ.

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밭 토양(土壤)의 점토(粘土) 광물(鑛物)과 가리(加里) (Potassium and Clay Minerals in Upland Soils)

  • 김태순
    • 한국토양비료학회지
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    • 제10권3호
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    • pp.135-151
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    • 1977
  • 우리나라 토양(土壞)의 점토(粘土) 광물(鑛物) 특성(特性), 점토(粘土) 광물(鑛物)과 가리(加里), 점토(粘土) 광물(鑛物)의 가리(加里) 방출(放出) 특성(特性), 점토(粘土) 광물(鑛物)과 토양비옥도(土壤肥沃度), 점토(粘土) 광물(鑛物)을 이용(利用)한 토양(土壤) 개량(改良)에 관(關)해서 지금까지 행(行)하여진 연구(硏究) 결과(結果)를 종합(綜合)한 것을 요약(要約)하면 다음과 같다. 1) 밭 토양(土壞)은 대부분(大部分)이 적황색토(赤黃色土)이며 이들 토양(土壞)의 주(主) 점토(粘土) 광물(鑛物)은 kaolin 광물(鑛物)(halloysite)과 운모(雲母) 류(類)의 풍화(風化) 중간(中間) 생성물(生成物)인 illite, vermiculite이다. 2) 토양(土壞) 모재별(母材別)로 보면 kaolin 광물(鑛物)은 화강암(花崗岩)과 화암(花岩) 편마암질(片麻岩質)과 토양(土壞)에 많고 운모(雲母)는 현무암질(玄武岩質) 토양(土壞)에 많다. 제(第) 3 기층(紀層)에 기인(基因)된 토양(土壞)은 ontmorillonite를, 제주도(濟州道) 화산회토(火山灰土)는 allophane을 주(主) 점토(粘土) 광물(鑛物)로 하고 있다. 3) 지방(地力)은 토양(土壞)의 점토(粘土) 광물(鑛物)에 크게 의존(依存)하고 있다. 적황색(赤黃色) 토양(土壞)의 생산력은 이 토양(土壞)의 점토(粘土) 광물(鑛物)의 주체(主體)가 kaolin 광물(鑛物)이므로 저위(低位) 생산성을 나타내고 있는데 비(比)해서 montmorillonite 토양(土壞)은 kaolin광물(鑛物) 토양(土壞)보다 생산력이 높다. 4) 토양(土壞) 고상(固相)에 있는 가리(加里)(운모류(雲母類)와 고정가리(固定加里))의 평형액(平衡液)($IN-NH_4OAc$)에의 방출(放出) 속도(遠度)는 1차(次) 반응식(反應式)에 따르고 있으며 가리(加里) 방출(放出) 정수(定數)는 점토(粘土) 중(中)의 운모(雲母) 함량(含量)과는 정(正)의 상관(相關)이 있고 점토(粘土) 중(中)의 $14.5{\AA}$ 광물(鑛物) 함량(含量)과는 부(負)의 상관(相關) 관계(關係)가 있다. 또한 가리(加里) 방출(放出) 정수(定數)는 치화성(置換性) 가리(加里)(Kex)와 전(全) 가리(加里)(Kt)와의 비(比) 즉 Kex/Kt와도 고도(高度)의 상관(相關)이 있다. 5) Kex/kt는 토양중(土壞中)의 운모(雲母) 함량(含量), 점토(粘土) 중(中)의 운모(雲母) 함량(含量) $14.5{\AA}$ 광물(鑛物) 함량(含量)과 고도(高度)의 상관(相關) 관계(關係)가 있다.

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TREATMENT OF PHENOL CONTAINED IN WASTE WATER USING THE HETEROGENIZED FENTON SYSTEM

  • Kim, Seong-Bo
    • Environmental Engineering Research
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    • 제12권1호
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    • pp.30-35
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    • 2007
  • Fenton system using homogeneous iron catalyst is very powerful in the degradation of organic compounds, but has a disadvantage to remove Fe ions from water after wastewater treatment. Thus, iron catalyst was bounded to support such as inorganic and polymer materials. The PVP supporting iron catalyst showed a good catalytic performance in degradation of phenol contained in waste water and iron catalyst supported on ${SO_4}^{2-}$ type PVP (KEX 511) showed the best catalytic performance. Also, reaction kinetic study was carried out in this system. Reaction constants on various catalysts was obtained from the pseudo first order equation. Reaction rate constants with the heterogenized $FeCl_2/PVP$ catalyst is a three-fold smaller than that of $FeCl_2$ catalyst.

자궁경부암(子宮頸部癌) 방사선치료(放射線治療) 전후(前後) Renogram의 의의(意義) (The Value of Isotope Nephrography in Carcinoma of Cervix - Follow up Studies of Pre and Post Irradiation)

  • 유형식;서정호;박창윤;최병숙;정순오;곽현모
    • 대한핵의학회지
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    • 제9권1호
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    • pp.51-58
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    • 1975
  • It is a great value to find an early detection of involvement of ureteric obstruction in the carcinoma of cervix. Little or no knowledge of the condition of the kidneys or the lower urinary tract are able to elucidate by the biochemical studies such as blood nitrogen or urine creatinine in carcinoma of cervix. Findings of urography delineates the condition of urinary tract stasis in the renal pelvis and ureters, however, slight stasis maybe difficult to demonstrate. On the other hand isotope nephrography is accepted as a sensitive method to observe renal function especially in regarding to the excretory function of kidney. It was attempted to analysis the findings of urography conjunction with isotope nephrography in 50 cases of unselected patients with invasive carcinoma of cervix through pre and post irradiation follow up studies. Urography was done as a routine procedure and.analysed emphasising changes of collecting systems and ureter condition. Isotope nephrography was carried out by means of $15{\mu}ci\;I^{131}$-Hippuran injected intravenously and the curves were analysed as follows. Parameter were; time of maximum amplitude ($T_{max}$), half time of maximum amplitude ($T\frac{1}{2}$), Kac and Kex value calculated from these two parameters in Tobe's method. The excretion index by Aurell defines the ratio between the maximum activity and the activity measured on the slope of the third phase ten minites after it has reached its maximum. Results: 1. 28.8% had an abnormal IVP suggestive of ureteric involvement before irradiation therapy and the patient of stage III and IV were the great part. 2. 21.7% had abnormal findings of per-irradiation renogram whom showed normal IVP. The other group showed normal IVP which group also showed normal renogram prior irradiation. 3. The more severe the ureteric involvement, the change of excretion index was greater. 4. Even in stage I and II patient, abnormal renogram was revealed in 12 cases (39.4%) among 31 cases. 5. All cases of TAH showed abnormal findings of IVP and renogram. 6. No. definite change of renogram was obtained just after the irradiation therapy (point $A:8000{\sim}9000rads,\;B:5000{\sim}6000rads,\;Co:11000{\sim}13000rads$). Each 3 month follow up study was performed and comparing with preirradiation study which showed significant changes of excretion index of renogram were 42.8% in $6{\sim}9$ month follow-up and 75% in $9{\sim}12$ month, respectively. 7. It seems to be important to observe the parameter Kex and excretion index of renogram to determine early abnormality of kidney excretory function by means of post-irradiation follow up study.

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답토양(沓土壤)의 가리(加里) Activity ratio와 수도(水稻)의 가리(加里) 흡수(吸收) 특성(特性)에 관(關)한 연구 (Study on the relationship between the potassium activity ratio of paddy soils and potassium uptake by rice plant)

  • 김태순
    • 한국토양비료학회지
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    • 제9권4호
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    • pp.223-233
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    • 1976
  • 7종(種)의 답(畓) 토양(土壤)에 대한 가리(加里) 평형(平衡) activity ratio와 exchange energy를 측정(測定)하고 이들 값은 치환성(置換性) 가리(加里), 수도체(水稻體)의 가리(加里) 흡수량(吸收量)과 어떤 관계(關係)가 있는지 구명(究明)해 보았다. 그 결과(結果) 1. 토양(土壤)의 배수(排水), 투수성(透水性)이 양호(良好)한 본실험(本實驗) 조건하(條件下)에서 최고(最高) 분얼기(分蘖期), 출수기(出穗期), 수확기(收穫期) 토양(土壤)의 가리(加里) 평형(平衡) activity ratio는 그때 수도체(水稻體)가 흡수(吸收)한 가리(加里)와 또 최고(最高) 분얼기(分蘖期) 토양(土壤)의 치환성(置換性) 가리(加里)와 유의차(有意差) 1% 수준(水準)에서 고도(高度)의 상관(相關)이 있다. 가리(加里) 평형(平衡) activity ratio가 크면 가리(加里) 흡수(吸收)도 많아지고 그것이 작으면 흡수(吸收)되는 가리(加里)도 적다. 따라서 수도체(水稻體)의 가리(加里) 흡수(吸收)는 가리(加里) 평형(平衡) activity ratio 또는 가리(加里) 치환(置換) 방출(放出)에 관여(關與)한 exchange energy의 다소(多少)에 의(依)해서 다스려 진다고 본다. 2. 수도체(水稻體)의 가리(加里) 흡수량(吸收量)과 수도(水稻) 수량(收量)을 토양(土壤)의 가리(加里) exchange energy 관점(觀點)에서 보면 -2500~-3000cal/equiv. 범위(範圍)에서 가리(加里) 흡수(吸收)와 수량(收量)이 많은 것으로 보아 토양(土壤) 중의 가리(加里)와 석회(石灰) 고토(苦土)가 서로 평균상태(均衡狀態)에 있기 때문이라고 본다. 3. exchange energy는 최고(最高) 분얼기(分蘖期) 토양(土壤)의 치환성(置換性) 가리(加里)와 1%수준(水準)에서 고도(高度)의 상관(相關) 관계(關係)가 있다. 토양(土壤) 가리(加里)와 석회(石灰) 고토(苦土)가 평형(均衡) 상태(狀態)에 있다고 보는 -2500~-3000cal/equiv. 에 상당(相當)하는 치환성(置換性) 가리(加里)를 회귀식(回歸式)(표(表)10)으로 부터 구(求)해 본 결과(結果)는 0.375~0.458m.e./100g건토(乾土)이다(산성(酸性) 토양(土壤)). 그런데 석회암(石灰岩) 토양(土壤)인 장성통(長城統)은 치환성(置換性) 가리(加里)가 0.3~0.5m.e./100g 건토(乾土)나 되는데도 이에 상당(相當)하는 exchange energy는 -3214~-3893cal/equiv이다. woodruff에 의(依)하면 이 energy 범위(範圍)의 토양(土壤)에서는 석회(石灰)는 과다(過多)하고 가리(加里)는 부족(不足)하다고 한다. 이것은 석회(石灰), 고토(苦土)가 산성(酸性) 토양(土壤)의 그것보다 3~5배가 더 많아서 가리(加里)와 불균형(不均衡) 상태(狀態)에 있기 때문이다. 따라서 토양(土壤)의 가리(加里) 방출(放出)은 가리량(加里量) 뿐만 아니라 석회(石灰), 고토량(苦土量)도 함께 비(比)를 취(取)해서 평가(評價)하는 가리평형(加里平衡) activity ratio 또는 exchange energy를 아는 것이 타당(妥當)하다고 본다. 4. 우리나라 답(畓) 토양(土壤)의 치환성(置換性) 가리(加里) 평균치(平均値)는 0.19m.e./100g로 알려져 있는데 이 값에 상당(相當)하는 exchange energy는 -4116cal/equiv. 이다. exchange energy가 -4000cal/equiv. 이하(以下)에서는 가리(加里) 흡수량(吸收量)이 훨씬 적다. 따라서 산성(酸性) 토양(土壤)에서 치환성(置換性) 가리(加里)는 0.37~0.45m.e./100g 건토(乾土)는 유지(維持)되어야 한다고 본다. 5. 토양(土壤)에의 가리(加里) 흡착(吸着) zeolite 시용(施用)은 가리(加里) 평형(平衡) activity ratio를 높여 준다. 수도체(水稻體)의 가리(加里) 흡수량(吸收量)과 수량(收量)을 보아도 대조구(對照區)의 그것들 보다 증가(增加)한다. 이것은 zeolite가 가리방출(加里放出)을 조절(調節)하기 때문이다. 토양(土壤)의 치환성(置換性) 가리(加里)를 0.37m.e./100g 건토(乾土) 이상(以上)을 유지(維持)시키는데는 가리흡착(加里吸着) zeolite(6.0% $K_2O$)를 167kg/10a 시용(施用)하니까 그 효과가 컸다.

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수도(水稻)의 가리시비반응(加里施肥反應)과 시비량추정(施肥量推定)을 위한 가리공급력(加里供給力) 측정방법(測定方法) 평가(評價) -II. Gapon식(式)과 Kas/Kai에 의한 가리공급력(加里供給力) 측정(測定)과 시비반응(施肥反應) (Evaluation of the Parameters of Soil Potassium Supplying Power for Predicting Yield Response, K2O Uptake and Optimum K2O Application Levels in Paddy Soils. -II. Determination of Potassium Supplying Power by Gapon equation and Kas/Kai and Response to K2O application)

  • 박양호;안수봉;박천서
    • 한국토양비료학회지
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    • 제17권4호
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    • pp.363-370
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    • 1984
  • 토양(土壤)의 가리공급력(加里供給力)에 따른 시비량(施肥量) 추정(推定)에 활용(活用)하기 위(爲)하여 수도(水稻)의 출수기(出穗期) 및 시험전(試驗前) 토양(土壤)에서 Gapon식(式)의 계수(係數) $KG_o$와 상대가리활성도비(相對加里活性度比) Kas/kai를 구(求)하고 이들 요인(要因)과 수도(水稻)의 가리흡수량(加里吸收量) 및 정조수량(正租水量)과의 관계(關係)를 비교(比較) 검토(檢討)한 결과(結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. 시험전(試驗前) 토양(土壤)에서 조사(調査)된 ${\Delta}K=0$일때의 Gapon계수(係數) $KG_o$는 식양토(埴壤土) 7.8 양토(壤土) 6.6 사양토(砂壤土) 7.1 이었고 상대가리활성도비(相對加里活性度比) Kas/kai는 식양토(埴壤土) 1.37 양토(壤土) 1.26 사양토(砂壤土) 2.11로 토성(土性)에 따라 상이(相異)하였다. 2. 출수기(出穗期) 토양(土壤)에서 조사(調査)된 KG는 수도(水稻)의 생육(生育)과 함께 그 값이 커져서 가리무시용(加里無施用) 수준(水準)의 값과 동일수준(同一水準)으로 될때 가리(加里)의 시용효과(施用效果)가 현저(顯著)하였다 3. 토양중(土壤中) 치환성(置換性) 양(陽)이온비(比)[Kex./(Ca+Mg) ex.]와 평형용액중(平衡溶液中) 가리활성도비(加里活性度比) ($[K^+]/\sqrt{[Ca^{{+}{+}}+Mg^{{+}{+}}]}$) 사이에는 토성(土性)에 따라 기울기가 다른 직선적(直線的)인 상관관계(相關關係)를 보였다. 4. 출수기(出穗期) 토양중(土壤中) $KG_o$와 Kas/kai는 질소(窒素) 15kg/10a 시용시(施用時) 식물체(植物體)의 가리흡수량(加里吸收量) 및 정조수량(正租收量)과 높은 상관관계(相關關係)를 보었으며 시험전(試驗前) 토양(土壤)에서 산출(算出)된 Kas/Kai는 가리흡수량(加里吸收量) 및 정조수량(正租收量)과 높은 상관(相關)을 보여 좋은 가리공급력(加里供給力) 지표(指標)로 판단(判斷)되었다. 5. 출수기(出穗期) 토양(土壤)의 KG와 Kas/kai는 높은 부(負)의 상관관계(相關關係)를 보여 서로 반대(反對)된 요인(要因)으로 생각되며 가리시비량(加里施肥量) 추정(推定)에 활용(活用)이 가능(可能)할 것으로 보인다.

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A New Signal Sequence for Recombinant Protein Secretion in Pichia pastoris

  • Govindappa, Nagaraj;Hanumanthappa, Manjunatha;Venkatarangaiah, Krishna;Periyasamy, Sankar;Sreenivas, Suma;Soni, Rajeev;Sastry, Kedarnath
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제24권3호
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    • pp.337-345
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    • 2014
  • Pichia pastoris is one of the most widely used expression systems for the secretory expression of recombinant proteins. The secretory expression in P. pastoris usually makes use of the prepro $MAT{\alpha}$ sequence from Saccharomyces cerevisiae, which has a dibasic amino acid cleavage site at the end of the signal sequence. This is efficiently processed by Kex2 protease, resulting in the secretion of high levels of proteins to the medium. However, the proteins that are having the internal accessible dibasic amino acids such as KR and RR in the coding region cannot be expressed using this signal sequence, as the protein will be fragmented. We have identified a new signal sequence of 18 amino acids from a P. pastoris protein that can secrete proteins to the medium efficiently. The PMT1-gene-inactivated P. pastoris strain secretes a ~30 kDa protein into the extracellular medium. We have identified this protein by determining its N-terminal amino acid sequence. The protein secreted has four DDDK concatameric internal repeats. This protein was not secreted in the wild-type P. pastoris under normal culture conditions. We show that the 18-amino-acid signal peptide at the N-terminal of this protein is useful for secretion of heterologous proteins in Pichia.