The present study was undertaken to determine whether $SM22{\alpha}$ participates in the regulation of vascular smooth muscle contractility using $SM22{\alpha}$ knockout mice and, if so, to investigate the mechanisms involved. Aortic ring preparations were mounted and equilibrated in organ baths for 60 min before observing contractile responses to 50 mM KCl, and then exposed to contractile agents such as phenylephrine and phorbol ester. Measurement of isometric contractions using a computerized data acquisition system was combined with molecular or cellular experiments. Interestingly, the aortas from $SM22{\alpha}$-deficient mice ($SM22^{-/-LacZ}$) displayed an almost three-fold increase in the level of $SM22{\beta}$ protein compared to wild-type mice, but no change in the levels of caldesmon, actin, desmin or calponin. $Ca^{2+}$-independent contraction in response to phenylephrine or phorbol ester was significantly decreased in the $SM22{\alpha}$-deficient mice, whereas in the presence of $Ca^{2+}$ neither contraction nor subcellular translocation of myosin light chain kinase (MLCK) in response to phenylephrine or 50 mM KCl was significantly affected. A decrease in phosphorylation of extracellular signal regulated kinase (ERK) 1/2 was observed in the $SM22{\alpha}$-deficient mice and this may be related to the decreased vascular contractility. Taken together, this study provides evidence for a pivotal role of $SM22{\alpha}$ in the regulation of $Ca^{2+}$-independent vascular contractility.
The therapeutic efficacy of xylamine in the field of psychological medicine has been recognized for years and the drug is used to treat depression and some other conditions, but little is known about its mechanism of action on vascular system. Therefore, the present study was designed to investigate the influence of xylamine on the contractile responses of isolated rat thoracic arteries to phenylephrine(PE) and potassium chloride(KCl). Xylamine produced a concentration-dependent relaxation in PE-precontracted endothelium intact(+E) rat aortic rings, but not in a KCl-precontracted aortic rings. Also, xylamine inhibited the PE-induced contraction in concentration-dependent manner, but not in the high KCl-induced contraction in +E rings. This concentration-dependent inhibition was suppressed by the removal of the endothelium (-E). The inhibitory effects of xylamine($0.3{\mu}M$) on the PE-induced contractions were suppressed by N(G)-nitro-L-arginine(L-NNA), N(omega)-nitro-L-arginine methyl ester(L-NAME), aminoguanidine, dexamethasone, methylene blue, 1H-[1,2,4]oxadiazolo [4,3-a]quinoxalin-1-one(ODQ), indomethacin, ryanodine, tetrabutylammonium(TBA), lidocaine, procaine and 0 mM extracellular $Na^+$, but not by 2-nitro-4-carboxyphenyl-n,n-diphenylcarbamate(NCDC), lithium, nifedipine, verapamil, 0 mM extracellular $Ca^{2+}$, glibenclamide and clotrimazole. These findings suggest that xylamine could act as a vasorelaxant and direct inhibitor of arterial contraction. This vasorelaxation involves an endothelial nitric oxide (NO)/cGMP (guanosine 3',5'-cyclic monophosphate) pathway or cyclooxygenase system, and an interference with $Ca^{2+}$ release, TBA-sensitive $Ca^{2+}$-activated $K^+$ channels and $Na^+$$ channels.
동물에 대한 생리적 염류용액은 소위 링가씨액으로서 냉혈척추동물의 신경근육 심장등을 비교적 정상에 가까운 상태로 지속시키기 위한 용액으로 개구리 (Frog)의 심장의 관수실험을 하기 위하여 처방한 최초의 생리적 염류용액에 지나지 않았지만 현실에 있어서는 몇몇 동물은 물론 사람에 이르기까지 거의 완전한 생리적 용액으로 되어 있는데 가잠에 있어서는 몇가지 처방이 발표된 바는 있어도 아직 그 결과가 만족할 만한 정도에까지는 이르지 못하고 있다. 일반적으로 생리적 염류용액은 전술한 바와 같이 적출한 기관과 조직에 대하여 장시간에 걸친 정상적 기능을 유지시키기 위한 용액으로 사용되는 염류의 혼합용액이기 때문에 적당한 Ion조성 삼투압 PH를 갖도록 조제된다. 대개 생기내에서 이들의 기관과 조직을 적시는 혈청등 체액성분에 근사한 것을 사용한다. 용액의 Ion성분은 $Na^{+}$을 비롯하여 $K^{+}$, $Ca^{++}$, $Mg^{++}$ 등을 가하고 여기에 NaHCO$_3$, NaH$_2$PO$_4$등의 연형제를 첨가하므로서 PH를 조절한다. 생리적 염류용액중에 포함하여야 할 Cation의 최적농도 2종 이상의 Cation의 최적혼합비율등에 대하여 가잠유충의 배맥관 운동을 지표로 하여 이를 검토하였다. 각 Cation의 최적농도는 영점미만의 NaCl의 함유액을 기본으로 하고 여기에 각각 농도를 달리한 KCl, CaCl$_2$및 MgCl$_2$등을 조합하여 이들의 액체를 적하하므로서 5령유충의 배맥관 운동의 지속시간과 맥박수를 지표로 하여 이들 시험액의 효과를 검토한 바에 의하면 NaCl 단독일 경우에는 해부후 일시적으로 맥박수는 증가하지만 점차 정지되고 만다(일시간정도). 여기에 대하여 KCI를 가하면 일반적으로 박동시간이 연장되고 맥박수의 저하도 늦어지는 경향을 나타내고 있으며 여기에 다시 KCl와 CaCl$_2$를 가하면 그 지속시간은 더 한층 연장되었다. KCI와 CaC1$_2$의 가용은 효과가 있지만 이들의 농도와 배맥관의 활동에 있어서는 일정한 경향이 인정되지 않았고 $Ca^{++}$ 또는 $K^{+}$의 박동에 대한 작용은 이것을 분명히 할 수 없었고 $Mg^{++}$의 작용에 있어서는 배맥관에 이를 가하면 박동 지속시간에는 영향을 끼치지 않지만 맥박수는 크게 저하됨을 인정할 수 있었다.
토양(土壤)에 흡착(吸着)되는 애트라진(Atrazine)의 양(量)은 마사츄세츠의 토양(土壤)에서는 다음과 같은 조건(條件)에 의(依)해서 결정(決定)된다. 1. 토양유기물(土壤有機物)이 여러 요인중(要因中) 가장 직접적(直接的)인 영향(影響)을 미친다. 2. 흡착작용(吸着作用)과 토양산도(土壤酸度)는 반비예적(反比例的)인 관계(關係)가 있고 토양산도(土壤酸度)는 N-KCl가용(可溶) 알루미늄의 양(量)과 깊은 관계(關係)가 있다.
본 연구는 건식 용융염 전해정련실험에서 고체음극에 순수 우라늄금속 전착되는 최적조건을 얻기 위한 내용이다. 실험 결과, 용융염(LiCl-KCl)중 $UCl_3$의 농도가 2wt%이상이 존재할 때 고체음극에 순수한 우라늄이 전착됨을 알았다. 또한, 전착물중 전류밀도와 용융염중 U의 함량이 미치는 영향과 우라늄의 형태에 관한 연구가 수행되었다.
Protein kinase C, a protein related in PI cascade, was partially purified from the cytosol protein of etiolated plants of Glycine max by DEAE-52 cellulose chromatography and phenylsepharose chromatography. When the DEAE column was eluted with 0-0.8 M linear gradient KCl, tow fractions were found that increased the phosphorylation of histon H1 about five and nine-fold in the presence of 5 $\mu\textrm{g}$/mL phosphatidylserine and 0.5 $\mu\textrm{g}$/mL diolein, respectively. These fractions were used as DEAE pool. The reaction eluted with relatively high concentration of KCl was loaded on phyenylsepharose column with 5 mM CaCl2 and eluted with 1 mM EGTA. A fraction contained the protein kinase C, which increased the phosphorylation of the histon H1 was fractionated. To determine the molecular weight of PKC, the fraction eluted from phenylsepharose column was analyzed by 5~15% polyacrylamide gel electrophoresis after concentrated with the Amicon membrane (YM10). That revealed two bands corresponding to 60 and 65 kGy by silver staining of the gel, respectively.
4-전극 측정 용기와 정전위 전자회로를 써서 직독식 전기전도도 측정장치를 고안하여 KCl, HCl등 전해질 용액의 전기전도도를 측정하였다. 이 장치는 상용되고 있는 브릿지회로와 2-전극 용기를 쓰는 방법에서 당면하는 어려운 문제들, 특히 전극에서의 전기 이중층의 존재와 파라디임피던스 등으로 나타나는 전기화학적으로 복잡한 성질들로 인한 문제들을 피하여 정밀하고 간편한 측정에 쓰이도록 만들었다.
본 연구에서는 전기분해 격막 및 전해액에 따른 전해산화 수의 물리적 특성 및 미생물의 표면살균 효과를 검토하였다. 격막 방식의 전기분해수 제조 시스템의 최적조건은 간극이 1.0 mm 20% NaCl 첨가량이 6 mL/mm 일 때 제조된 전해산화수의 물성치가 ORP 1,170 mV 수준, HClO 함량 100 ppm 수준, pH 2.5 수준으로 가장 우수하게 나타났으며, 1단 방식보다는 2단의 전기분해 방식이 물성 측면에서 우수함을 알 수 있었다. 무격막 방식의 전해수는 간극이 1.0 mm, 20% NaCl 첨가량이 4 mL/mm 일 때 격막 방식의 최적 조건과 가장 유사하게 나타났으나 차아염소산 함량은 132∼266 ppm 수준, pH는 9 수준으로 격막 방식과는 크게 달라지는 것을 알 수 있었다. 전해산화수는 실온에서 밀폐 용기에 보관한 경우에 있어 격막 및 무격막 방식에서 각각 1,150 및 750 mV 수준, 100 ppm 수준을 1개월 이상 유지할 수 있었다. 격막 및 무격막 방식으로 제조한 전해산화수는 Salmonella typhimurium 등 12 균주가 초기 $10^{5}$∼$10^{6}$CFU/ml에서 30초 이내에 모두 사멸되는 것으로 나타났다. 전해액으로 NaCl 및 CaCl$_2$, KCl을 사용하여 제조한 전해산화수의 ORP 및 HCIO 함량은 NaCl, KCl, CaCl$_2$순으로 높게 나타났으나 큰 차이는 없었으며, 미생물 사멸효과는 동일하게 나타났다.
Activation of $K^+$ channels induces relaxation of smooth muscles by reducing electrical excitability and cytosolic free $Ca^{2+}$ level. ${\beta}$-adrenergic agonist isoproterenol is known to induce relaxation of the uterine smooth muscle by membrane hyperpolarization and $K^+$ efflux. Recently it is suggested that the activity of $Ca^{2+}$-activated $K^+$ channel was increased by isoproterenol in the uterine myocytes isolated from myometrium of the pregnant rat. However, the type of $K^+$ channel mediating the relaxant effect of isopreterenol in the tissue level has not yet studied. In this work, we investigated the type of $K^+$ channels involved in the isoproterenol-induced relaxation of uterine smooth muscle by measuring the integrated insometric tension of the estrogen-treated isolated nonpregnant rat uterus. Contraction of uterine tissue was induced by oxytocin (0.2nM, 2~3 contractions/min) or high KCl(20~80mM). The result are as follows : 1. Isoproterenol($10^{-10}{\sim}10^{-4}M$) inhibited oxytocin-induced contraction of isolated rat uterus($EC_{50}=1.17{\times}10^{-10}M$). 2. Isoproterenol($10^{-10}{\sim}10^{-4}M$) effectively inhibited uterine contraction induced by low KCl(20~40mM) but little those induced by high KCl(60~80mM). 3. Relaxant effect of isoproterenol($10^{-10}{\sim}10^{-4}M$) on 0.2nM oxytocin-induced contraction was effectively reduced by 4-aminopyridine(3, 10mM) but little by TEA(10~30mM), $Ba^{2+}$($1{\sim}30{\mu}M$) and glibenclamide($100{\mu}M$). Our data suggest that the relaxant effect of isoproterenol is mediated by the $K^+$ channel(s) which can be blocked by 4-aminopyridine.
병아리콩 근류의 호스트부분에서 플라스티드에 존재하는 것으로 추정되는 포스포프룩토오스 키나아제(EC 2.7.1.11; PFK)을 순수분리 정제하고, 정제된 단백질 분자량이 220 kDa인 비당단백질(N-linked)이다. SDS-PAGE와 Western blot의 결과는 정제된 효소가 4개의 55 kDa subunit로 이루어져 있음을 지적하고 있다. 이 효소는 pH 8에서 최적활성으로 날카로운 곡선을 나타내고 있으며, 최적 pH 8과 생리적으로 비슷한 pH 7에서 Fru-6-P 및 nucleoside triphosphate 기질에 Michaelis-Menten kinetics을 나타냈다. MgATP가 뉴크레오 삼인산중에 가장 효율적인 인산기 공여체로서 나타냈다. 포스포엔롤피루베이트는 마이너 형태의 PFK 활성에 가장 강력한 억제자이며, 또한 이 효소는 3-포스포글리세레이트와 2-포스포글리세레이트에 의해 강하게 억제된다. 마이너 형태의 PFK는 KCl, NaCl등 Pi에 의해 약하게 활성이 증진되지만, 높은 농도에서는 억제자로서 작용한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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