• 대한한방내과학회지
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• 제12권2호
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• pp.1-15
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• 1991

Bigihwan which has been widely used in Oh-jug in oriental Medicine was investigated on its antitumor effect employing blood cancer cell lines. K 562 derived from human erytholeukemia, Raji from lymphoma and $MO_4$ from hlastogenic cancer were used in this study to see the analytical evaluation of Bigihwan' s antitumor effect using three different kinds of methods such as $^{3}H-thymidine$ up take assay. MTT assay and live cell counts by Trypan blue assay. The result obtained are as follows. 1. When higher than 10% Bigihwan was treated. inhibitory effect of tumor killing action was observed showing the increasing order of $MO_4$, K 562 and Raji(Fig. 3). 2. When 1 to 5% of Bigi-hwan was treated, 4 to 30% of tumor cell survival was observed according to various blood tumor cell lines suggesting that antitumor effect of Bigi-hwan was different as the characteristics of tumor cells showing 70 to 95% cell killing effent(Fig. 4). 3. Compared the survivals of cells by relative scales though the initial cpm was variable because of different cell growth rate. Raji was most effective being killed 95% by the treatment of 1% Bigihwan while Raji and K562 showed 93% by 5% Bigihwan.(Fig. 5) 4. The survival rate of Raji derived from Burkitt lymphoma was rather increased to 2.3 times when Bigihwan concentration was increased from 1 to 10% lmplying of refraining from over use of this anticancer drug. specially to lymphoma patients(Fig. 5). 5. Bigihwan was most effective to K 562 and then $MO_4$ showing 95% tumor cell death by using 1% of this anticancer drug while it was least effective to Raji showing only 68% of tumor cell death(Fig.7). 6. Judging from the all the analytical methods used in this study, through all different three tumor cell lines. Bigihwan was most effective to K 562 derived from human erythroleukemia.

• 약학회지
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• 제40권2호
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• pp.225-229
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• 1996

The cytotoixic effect of Pylorae Herba (Pyrola japonica Klenze) against L1210 and K-562 cells was studied in vitro. The methanolic extract of Pylorae Radix was add ed to the culture of L1210 cells and K-562 cells for the cytotoxic activity and the ED50 values of hexane, ethylacetate, buthanol and water fractions from methanolic extract were determined using MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazoliumbromide) assay. The active constituent isolated by bioassay guided fractionation followed by purification gave rise to a yellow needle crystal and was clarified to be chimaphilline by the comparison with the published data. The average life spans with it were not prolonged significantly on tumor growth in hybrid female mouse (BDF1-KIST) inoculated subcutaneously with P388 cells.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제5권2호
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• pp.105-109
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• 1995

Anticancer activity of a fraction of the ethanol extract from the root of Korean angelica (Angelica gigas Nakai) was recognized in human cancer cell lines HeLa $S_3$, K-562, and Hep $G_2$. The extract blocked the phorbol ester-inducing megakaryocytic differentiation of K-562 cells, which indicated the modification of protein kinase C (PKC) activity. In vitro assay showed the activation of PKC by the extract. An effective fraction of the Angelica gigas extract, of which $R_f$ value was 0.64 in a thin layer chromatography, was a different component from those of European angelicas. The $ED_50$ value of the fraction was 8, 9, and $16\;\mu\textrm{m}/ml$ against HeLa $S_3\;Hep\;G_2$, and K-562 cells, respectively, while the fraction showed higher $ED_50$ values against normal cell lines.

• 대한한의학회지
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• 제17권2호
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• pp.303-310
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• 1996

The purpose of this study was to investigate effect of water extract of Carthami Flos on the proliferation of human cancer cell-lines. The effects of Carthami Flos on the proliferation of A431, HeLa, MOLT-4, K562 cells, Balb／c 3T3 cells, mouse thymocytes, splenocytes and human lymphocytes were estimated by MTT colorimetric assay. The results were as follows; 1. Carthami Flos did not effect A431, HeLa, MOLT-4, K562 cells. 2. The cytotoxicity of mitomycin C on K562 cells was increased by the combination of Carthami Flos. 3. Carthami Flos inhibited the proliferation of Balb／c 3T3 cells. 4. Carthami Flos stimulated the proliferation of thymocytes. 5. Carthami Flos stimulated the proliferation of splenocytes. 6. Carthami Flos stimulated the proliferation of human lymphocytes.

• Radiation Oncology Journal
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• 제19권3호
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• pp.245-251
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• 2001

목적 : K562 세포를 대상으로 PTK inhibitor (herbimycinA와 genistein)에 의한 방사선 유도 apoptosis의 변화에 따른 관련 유전자를 탐색하고자 하였다. 대상 및 방법 : K562 세포는 $2\times10^5\;cells/mL$의 비율로 준비하여 대수증식기로 성장한 세포를 각각의 실험조건에 따라 처리하여 사용하였다. 방사선 조사는 6-MV X-Ray 10 Gy (Clinac 1800C, Varian, USA)를 $200\~300\;cGy/min$의 선량율로 상온에서 일정하게 조사하였다. Herbimycin A (HMA, Calbiochem, UK)와 genistein (Calbiochem, UK)은 dimethylsulfoxide (DMSO, Sigma, UK)에 녹여서 각각 1 mM과 10 mM의 농축용액으로 조제한 각각 250 nM과 $25\;{\mu}M$의 최종농도로 처리하였다. 내성 변화의 조절에 관여하는 유전자를 찾고자 PCR-select cDNA subtractive hybridization을 실시하여 128개의 차별 발현되는 clones을 재선별하였다. DNA sequencing을 통하여 염기서열을 분석하였으며, GenBank database를 이용하여 이미 밝혀진 유전자들과의 상동성을 비교하였다. 상동성을 갖는 clone을 확인하여 이를 probe로 사용하여 방사선 단독조사한 실험군과 방사선과 HMA 또는 genistein을 동시 처리한 실험군들간의 mRNA 발현의 차이를 Northern hybridization을 통하여 확인하였다. 결과 : homo sapiens Smad6 유전자와 $95\%$의 상동성을 갖는 clone을 확인하였다. 이를 probe로 사용하여 방사선 단독 조사한 실험군과 방사선과 HMA 또는 genistein을 동시 처리한 실험군들간의 mRNA 발현의 차이를 비교 분석한 결과, 방사선과 genistein을 동시 처리한 실험군의 mRNA 발현이 방사선 단독 조사한 실험군과 방사선과 HMA를 처리한 실험군들에 비하여 현저히 높았다. 결론 : Smad6와 방사선에 의해 유도되는 apoptosis의 억제에 관한 연관성을 보고한 문헌은 없으나, Smad6가 일부세포에서 apoptosis를 억제한다는 보고들과, 본 연구에서 관찰한 genistein에 의한 방사선에 의해 유도되는 apoptosis의 억제에서 그 발현이 두드러지게 증가한 점 등을 미루어 보아 방사선에 의하여 유도된 apoptosis의 억제 및 방사선 내성의 조절에도 관여할 것으로 생각된다.

• 혜화의학회지
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• 제5권2호
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• pp.499-499
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• 1997

The purpose of this study was to investigate the effect of Gleditsiae Spina on the pro life-ration of human cancer cell-lines. The effects of Gleditsiae Spina on the proliferation of A431, HeLa. MOLT-4, K562 cells, Balb/c 3T3 cells, mouse thymocytes, splenocytes and human lymphocytes were estimated by MTT colorimetric assay. The results were as follows; 1. Gleditsiae Spina increased the proliferation of HeLa, MOLT-4 and K562 cells. 2. The cytotoxicity of mitomycin C on K562 cells was increased by the combination of Gleditsiae Spina. 3. Gleditsiae Spina did not effect the proliferation of Balb/c 3T3 cells. 4. Gleditsiae Spina stimulated the proliferation of thymocytes. 5. Gleditsiae Spina stimulated the proliferation of splenocytes. 6. Gleditsiae Spina stimulated the proliferation of human lymphocytes.

• Radiation Oncology Journal
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• 제18권1호
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• pp.51-58
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• 2000

목적 : 방사선에 의해 유도되는 apoptosis에 내성을 가진 세포로 알려진 KS62 세포를 대상으로, PTK inhibitors인 herbimycin A와 genistein을 이용한 방사선에 의한 apoptosls의 내성 기전을 연구하고자 하였다. 대상 및 방법 : 6 MV 체외 X-선 방사선 치료기를 이용하여 200$\~$300 cGy/min의 선량률로 10 Gy의 X-선을 세포에 균일하게 조사하였다. Apoptosis의 관찰은 래arose gel electrophoresis를 이용하여 DNA frgmentation의 지표인 ladder를 관찰하였고, TUNEL 염색을 이용하여 정량 분석을 시행하였다. Western blot 방법으로 apoptosls 관련 유전 단백인 bel-2, bel-X$_L$ 및 bax들의 발현을 관찰하였다. 방사선 조사 및 약물 처치 후의 세포 주기 분석은 flow cytometry로 분석하였다. 결과 : Agarose gel electrophoresis 실험에서 방사선을 조사하지 않은 K562 세포와 방사선을 10 Gy 조사한 세포를 48시간에 걸쳐 12시간 간격으로 관찰하였을 때 DNA fragmentation를 관찰할 수 있었다. 이러한 현상은 genistein을 투여한 세포들에서도 동일한 현상을 관찰할 수 있었지만, 방사선 조사 후 herbimycin A를 투여한 세포들에서는 48 시간째 확연한 DNA fragmentation을 관찰할 수 있었다. 이를 TUNEL assay에서 정량적으로 확인하였다. 방사선만조사한 세포들과 방사선과 genistein 투여 후 48시간째 관찰한 세포들에서는 10$\%$, 미만의 apoptosis 양성 세포의 빈도를 관찰할 수 있었지만, 방사선 조사 후 herbimycin A를 투여한 세포들에서는 30$\~$35$\%$ 빈도로 apoptosis 양성 세포들이 관찰되었다. Western blot analysis에서 bcl-2의 경우 방사선을 조사하지 않았던 대조군에 비하여 전체적인 발현은 증가되었지만 방사선 및 약제간의 발현의 차이는 없었다. 그 외 bcl-X$_{L}$과 bax는 대조군에 비해 방사선 및 약제간의 발현의 차이를 관찰할 수 없었다. KS62 세포에 방사선을 10 Gy 조사하였을 때 나타나는 세포 주기의 변화는 시간이 경과함에 따라 전형적인 G2/M block의 소견을 보였다. 이러한 소견은 genistein을 투여했을 경우에는 특별한 변화를 보이지 않지만, herbimycin A를 투여했을 경우에는 12시간째부터 G2/M block이 소실되면서 세포가 세포 주기를 재 순환하는 양상을 보였고, 48시간째 관찰한 소견에서는 G2/M block이 거의 소실된 양상을 띠었다. 이러한 소견을 토대로 apoptosis 유도와의 상호 연관성을 유추할 수 있었다. 결론 : herbimycin A는 방사선에 의해 유도되는 apoptosis가 억제된 K562 세포에서 apoptosis를 유도할 수 있었다. 이러한 유도 기전에 apoptosis 관련 유전 단백들인 bcl-2, bcl-X$_{L}$ 및 bax와 관련된 영향은 관찰되지 않았다. 세포 주기의 분석에서 G2/M block의 해소와 apoptosis 유도와의 연관성을 유추할 때, 세포 주기 관련 인자들에 대한 연구가 방사선에 의한 apoptosis의 내성의 극복 및 방사선에 의한 세포의 감수성 조절 약제로서의 역할에 이바지할 것으로 생각한다.

• 대한예방의학회:학술대회논문집
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• 대한예방의학회 2002년도 제54차 추계 학술대회 연제집
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• pp.562-562
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• 2002

• 한국통신학회:학술대회논문집
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• 한국통신학회 2006년도 하계종합학술발표회 논문 초록집
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• pp.562-562
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• 2006

• 대한한방내과학회지
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• 제18권1호
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• pp.231-241
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• 1997

국내 사망률중 가장 높은 비율을 차지하고 있는 악성종양(惡性腫瘍)에 대하여 국내외적으로 다양하게 연구되고 있다. 그러나 아직까지도 종양(腫瘍)을 치료하기 우하여 수술요법(手術療法) 방사선요법(放射線療法) 면역요법(免疫療法) 화학요법(化學療法) 등의 많은 치료법들을 개발하고 있지만 종양(腫瘍)에 대한 치료원칙이나 치료약물에 대하여서는 아직까지 미흡한 것이 국내의 현실이다. 현재 일반적으로 항암제(抗癌劑)를 이용한 화학요법(化學療法) 등이 사용되고 있지만 이에 따른 부작용(副作用)이 많아 항암제(抗癌劑)와 한약재(韓藥材)를 병용투여(倂用投與)함으로써 부작용(副作用)을 최소화하고, 이에 따라 한약재(韓藥材)가 정상세포(正常細胞)에 영향을 미치며, 암종세포(癌腫細胞)에는 영향을 미칠 것으로 사료되어 관찰한 결과 유의성(有意性)이 있어 보고하게 되었다. 그리하여 수종(數種)의 한약재중(韓藥材中) 청열작용(淸熱作用)과 활혈화어(活血化瘀)작용이 있는 대극(大戟)과 목단피(牧丹皮)를 인체의 피부암세포(皮膚癌細胞)인 A431 세포(細胞), 자궁암세포(子宮癌細胞)인 HeLa 세포(細胞), 급성백혈병세포(急性白血病細胞)인 MOLT-4 세포(細胞), 만성골수성백혈병세포(慢性骨髓性白血病細胞)인 K562 세포(細胞)에 대한 세포독성(細胞毒性)과 항암제(抗癌劑)인 mitomycin C와 병용(倂用)처리결과를 MTT assay를 통하여 관찰하였다. 또한 정상세포(正常細胞)에 대한 세포독성(細胞毒性)을 검색하기 위하여 마우스 섬유아세포(Balb/c 3T3), 마우스 흉선(胸腺) 및 비장세포(脾臟細胞), human lymphocyte에 미치는 세포독성(細胞毒性)을 검토하였다. 대극(大戟)과 목단피(牧丹皮)는 A431 세포(細胞)와 K562 세포(細胞), 마우스 섬유아세포(細胞)인 Balb/c 3T3 세포(細胞) 및 mitomycin C와 병용처리(倂用處理)하였을 때 mitomycin C를 단독처리하였을 때보다 A431 세포(細胞)의 증식을 억제하였고, 백선피(白蘚皮)와 천산갑(穿山甲)은 human lymphocyte의 증식을 촉진하였다.