In order to clarify the significance of serum CPK for the diagnosis of the cardiac disease in ruminant, the fluctuation of serum total CPK activities and CPK isoenzyme fractions was examined before and after operation in Korean native goats with artificially induced cardiac injury. In the change of serum total CPK activities, those of experimental group were changed with higher values than those of control group and significant increase was found on 2-week after operation(P<0.05). In the fluctuation of serum CPK isoenzyme fractions, significant increase of both CK1 and CK3 fractions was observed on 2-week after operation in experimental group(P<0.05), but significant difference was not found in CK2 fraction between experimental and control groups. From these findings, it is considered that taking note of increase of not only serum total CPK activities but also CK1 and CK3 fractions is important for the diagnosis of traumatic cardiac disease in ruminant.
형태적으로 Aconaqmoebcusteuon리로 동정된 한국토양분리주 KA/S2의 일부 특성을 파악하여 A. castellanii로 알려진 4가지 reference 주(Castellani, Neff, fna 및 Chang주) 와 비교하였다 K4/s2주의 mitochondria(Mt) DNARFLP와 isoelectricforusing(IEF)로 분석한 동위효소 양상은 California 토양에서 분리된 Neff주의 그것과 동일하였으나 고 외의 주들 사이에는 심한 다양성이 과찰되었다. Chang주의 형태 및 전 단백질 양상은 다른 주에 비해 독특하였다. Aconamoeba app. 분리주의 동정 및 특성 파악에 Mt DNA RFLP 분석이 매우 유용할을 확인하였다. Aconamoebacasteunil의 우리말 학명을 카스텔라니가시아메바로 제안한다.
To investigate the involvement of protein kinase C(PKC) isoenzyme in the testes which control spermatogenesis and hormone secretion, we examined cellular distribution of four types of PKC $\alpha$, ${\beta}I$, ${\delta}$ and ${\theta}$ in the horse testes using PKC antisera by western blot analysis and immunohistochemistry. By the western blot analysis, PKC $\alpha$ and ${\beta}I$ were detected at 82KD, while PKC ${\delta}$ and ${\theta}$ were detected at 80KD in the testes of both juvenile and adult horses. In juvenile horse, PKC $\alpha$, ${\delta}$ and ${\theta}$ except ${\beta}I$ were not detected in the cells of the testes, whereas PKC ${\beta}I$ was immunoreacted with only in spermatocytes. In adult, PKC $\alpha$, ${\beta}I$, ${\delta}$ and ${\theta}$isoenzymes were localized in interstitial cells of the testes. In the seminiferous tubules, PKC ${\beta}I$ is localized in spermatocyte, spermatid and spermatozoa, while PKC ${\delta}$ is localized only in spermatids. We suggest that this is a first report to localize PKC in the testes of horse and PKC isoenzymes are upregulated in the cells of horse testes depending on ages. These findings also suggest that certain PKC isoenzyme plays an important role in the signal transduction of spermatogenic cells and interstitial cells in horse testes.
Ile-224 in I269S mutant horse liver alcohol dehydrogenase isoenzyme S (HLADH-S) was mutated to serine by site-directed mutagenesis in order to study the role of the residue in c oenzyme binding to the enzyme. The specific activity of the I269S and I224S mutant enzyme to ethanol was increased 6-fold and all Michaelis constants($K_a,\;K_b,\;K_p,\;and\;K_q$,/TEX>) were larger than those for the wild-type and I269S enzyme. The substitution decreased the afffinity to coenzymes and increased the specific activity of the enzyme. The mutant enzyme showed the highest catalytic efficiency for octanol among the primary alcohols. But it didn`t have activities on retinoids and 5${\beta}$-cholanic acid-3-one. From these results, it was confirmed that the hydrophobic interaction of Ile-224 residue with coenzyme was related to coenzyme affinity in ADH reaction. The substitution also affected the substrate affinities to the enzyme.
전분 분해능력을 갖는 알콜생산용 효모를 만들기 위해 Saccharomyces cerevisiae에 glucoamylase 유전자인 STA를 도입하였다. 도입된 형질의 발현증대를 위해 STA 유전자의 promoter 부위를 alcohol dehydrogenase isoenzyme I 유전자의 promoter 부위와 치환 시켜준 재조합 플라스미드를 재조하였으며 안정성을 증진시키기 위해 centrometer 부위를 치환시킨 결과 glucoamylase의 발현이 증가하였으며, STA 유전자와 centromere를 갖고 있는 재조합 플라스미드는 여러세대가 거듭되어도 비교적 안정하게 유지되었으나 낮은 copy 수로 인해 형질전환체의 효소 역가와 형질전환 빈도는 낮아졌다. STA 유전자가 도입되어 형질전환된 다배체 산업용 효모는 액화 과정만을 거친 주정생산 배지(액화액)에서 원래의 알콜 생산용 효모에 비해 훨씬 많은 양의 알콜을 생산해 내었다. 그러나 centromere를 보유하는 플라스미드에의한 산업용 효모의 형질전환에는 실패하였다.
오래 전부터 성분에 대한 확실한 분석은 없었으나 식용과 약용으로 이용되어 온 소리쟁이(Rumex crisps.)의 항 산화 물질 및 활성에 대해 시험하였다. 항 산화 활성 측정은 DPPH 법과 효소 활성 검사법을 이용하였고, Rumex crispus, Rumex acetoceae와 Rumex nipponicus의 항산화력을 DPPH 법에 의해 측정한 결과 3종류 모두 항산화력이 뿌리>잎>줄기의 순으로 높게 나타났다. 뿌리 추출물에 항산화력은 50% 억제 율이 Rumex crispus ; 6.1 ug/ml, Rumex nippponicus ; 9.8 ug/mL, Rumex acetoceae ; 25.3 ug/mL의 순으로 활성이 높게 나타났다. 잎 추출물 대한 $IC_{50}$/값이 Rumex acetoceae ; 31.5 ug/mL, Rumex nippponicus ; 59.1 ug/mL, Rumex crispus ; 68.8 ug/mL의 순으로 항산화활성이 높게 나타났다. Rumex crispus에서 분리 동정된 주요 페놀성 항 산화 물질은 2, 6-Dichloro-4-nitrophenol, 2-Isopropyl-5-methylphenol은 잎과 뿌리 추출물 모두에서 확인되었고, 4-Vinyl-2-methoxy-phenol과 2, 3-Dihydro-benzofuran 2종은 잎 추출물에서만 동정되었다. 동정된 각 물질의 분자량은 2, 6-Dichloro-4-introphenol ; 206.95, 2-Isopropyl-5-methylphenol ; 150.10, 4-Vinyl-2-methoxy-phenol ; 150.07, 2, 3-Dihydro-benzofuran ; 120.06이 모두 120~206 범위 안에 속하는 低分子化合物質이였다. Rumex crispus의 callus와 생체식물의 효소활성 측정 결과 POD 비활성 (IU/mg protein)은 줄기가 0.44 IU/mg protein으로 높은 활성을 나타내었으나 callus와 잎 부분의 활성은 모두 낮았고, SOD비활성 (IU/mg protein)은 줄기부분이 24.4 IU/mg protein으로 가장 높았다. POD isoenzyme pattern을 분석한 결과 뿌리와 callus에 3개의 isoenzyme, 잎과 줄기 부분에서는 2개의 isoenzyme이 발견되었다. Rumex SOD isoenzyme pattern 분석결과는 뿌리와 Callus에서만 1개의 Isoenzyme 이 나타났다.
사과의 수령(樹齡), 지역(地域) 및 부위(部位)에 따른, 그리고 주요(主要) 6개(個) 품종(品種)(국광(國光), 후지, 홍옥(紅玉), 스타킹, 골덴 델리셔스, 쓰가루) 및 그들의 교잡개체(交雜個體)의 peroxidase isoenzyme pattern의 차이(差異)를 조사(調査)하였던 바 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 1. 후지품종(品種)의 수령(樹齡)은 zymogram에 영향(影響)을 미치지 않았다. 2. 후지와 쓰가루 두 품종(品種)의 zymogram은 재식지(栽植地)에 따라 차이(差異)가 없었다. 3. 후지와 쓰가루 두 품종(品種)의 가지와 잎의 zymogram은 뚜렷한 차이(差異)가 인정(認定)되었으나 채취부위별(採取部位別) 재식지(栽植地)에 따른 차이(差異)는 인정(認定)되지 않았다. 4. 국광(國光), 후지, 홍옥(紅玉), 스타킹, 골덴 델리셔스, 쓰가루 등(等) 여섯 품종(品種)에서 그 품종(品種) 고유(固有)의 zymogram이 관찰(觀察)되었다. 5. 교잡개체(交雜個體)의 zymogram은 1) 양친(兩親)의 band를 모두 갖고 있는 형(形), 2) 양친(兩親)의 band 중(中) 일부(一部)를 소실(消失)한 형(形), 3) 양친(兩親)에는 없는 새로운 band를 갖고 있는 형(形)으로 분류(分類)되었다.
Protein kinase C는 세포의 신호전달계에 관여하는 중요한 조절효소로서 여러 가지 세포의 분화와 증식과도 밀접한 관련이 있다. 신생아의 포피 keratinocyte를 농도 200 ng/ml의 human recombinant epidermal growth factor (hrEGF)와 human recombinant insulin-like growth factor-1 (hrIGF-1) 그리고 hrEGF와 hrIGF-1의 혼합액을 각각 첨가하여 24시간 배양한후 세포질과 세포막의 PKC단백질을 추출하여 그 농도를 측정하고, Western blot analysis를 이 용하여 각 growth factor들의 PKC isoenzyme에 대한 영향을 분석하였다. 세포질의 총 PKC 단백질의 농도는 hrIGF-1을 처리한 keratinocyte에서 가장 높았으며, 세포막에서는 대조군의 단백질 농도가 가장 높게 나타났다. EGF를 처리한 keratinocyte의 세포질에서 는 PKC-$\beta$II, -$\delta$, -$\theta$가 막성분에서는 PKC-$\alpha$, -$\beta$I, -$\delta$, -$\Im$, -$\theta$가 증가하였다. IGF-1을 처리한 군의 세포질성분에는 PKC-$\beta$I, -$\Im$, -$\theta$, 막성분에서는 PKC-$\alpha$, -$\beta$I, -$\delta$, -$\Im$, -$\varepsilon$, -$\theta$가 증가하였다 EGF와 IGF-1의 혼합처리 군에서는, PKC-$\alpha$, -$\beta$I, -$\Im$, -$\theta$이 세포질에서, PKC-$\alpha$, -$\delta$, -$\Im$, -$\varepsilon$, -$\theta$은 세포막에서 증가하였다.
여름철 자연조건에서 자라는 두릅나무과 식물 잎의 SOD활성과 광계II의 광화학적 효율의 차이를 분석하고 온도 스트레스와 paraquat의 영향을 조사하였다. 그 결과, 두릅나무과 식물 6종의 잎으로부터 총 8개의 superoxide dismutase(SOD) isoenzyme이 구분되었다. 그 중, 섬오갈피나무 (Acanthopanax koreanum)에서는 두릅나무과 식물에 공통적인 2개의 isoenzyme (SOD 4와 SOD 6)이 높은 활성으로 검출되었고, 황칠나무(Dendropanax morbifera)에서는 두릅나무과 식물이 갖는 8개의 isoenzyme이 모두 검출되었다. 광계II의 광화학적 효율을 나타내는 Fv/Fm은 낙엽성 식물에서는 섬오갈피나무가 다른 종보다 높았으며, 상록성 식물에서는 음지에 위치해 있는 잎이 양지에 위치해 있는 잎보다 전반적으로 높게 나타났다. 섬오갈피나무 잎 disc의 Fv/Fm은 온도가 높아짐에 따라 감소하였지만 황칠나무 잎 disc에서는 35$^{\circ}C$에서 현저하게 감소하였다. 그리고 온도 스트레스와 함께 paraquat를 처리하였을 때 섬오갈피나무에서는 4$^{\circ}C$에서, 황칠나무에서는 35$^{\circ}C$에서 Fv/Fm이 억제되었다. 한편, SOD 활성은 섬오갈피나무 잎 disc에서는 4$^{\circ}C$와 28$^{\circ}C$에서 높았고 paraquat를 함께 처리하였을 매에는 모든 온도에서 활성이 높아졌다. .그러나, 황칠나무 잎 disc에서는 온도가 높아짐에 따라 SOD활성이 억제되었고 paraquat를 함께 처리하였을 때에는 더욱 억제되었다. 따라서, 섬오갈피나무는 황칠나무에 비하여 온도 스트레스나 산화적 스트레스에 효율적으로 대처하는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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