• 대한화학회지
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• 제38권9호
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• pp.660-666
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• 1994

이웃하는 란탄족 원소의 분리에서 온도와 흐름속도의 영향을 치환크로마토그래피로 연구하였다. 일렬로 연결된 두 컬럼에 Amberlite 120 양이온 교환수지를 채워서 충전용과 분리용으로 나누어 사용하였다. 보유이온은 $H^+$을, 흐름용액은 0.012M과 0.015M의 EDTA 용액을 사용하였다. 실험중에는 관의 온도를 90$^{\circ}C$로 유지하였으며 이온교환수지 관 속에 생기는 기포를 줄이기 위해 일정한 압력을 걸었다. 용출액은 ICP-AES로 직접 분석하였다. 이 실험에서 란탄족 원소쌍 La: Ce, Ce :Pr, Pr: Nd에 대한 분리인자는 각각 4.6, 2.8, 1.9이었으며 이것은 25$^{\circ}C$에서 이론적으로 얻은 것보다 큰 값이다. 흐름속도를 2.5 ml/min에서 1.5 ml/min로 줄이면 이론단해당높이(HETP)도 1.60 cm에서 0.88 cm로 줄었다. 따라서 용리액의 흐름속도를 줄이고 온도를 높이므로써 분리효율을 증가시킬 수 있었다. 이 실험에서 99.9% 이상의 순수 란탄족 원소에 대한 회수율은 49∼77%이었다.

• 약학회지
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• 제59권3호
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• pp.113-119
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• 2015

Protein phosphorylation is one of most important post-translational modifications (PTMs) and plays an important role in regulation of protein function. Here we develop a method for a global identification of phosphopeptides and phosphorylation sites using nano-LC MS/MS. We compared two separation methods, C4 and strong cation ion exchange (SCX). Before phosphopeptides enrichment with $TiO_2$, total proteins from Rat 1 cells have been separated using C4 column or tryptic peptides of proteins from the cells have been separated using SCX column. Finally, we have detected 52 phosphorylation sites on 41 proteins from SCX method and 375 phosphorylation sites on 252 proteins from C4 method, and determined the function and localization of identified phosphoproteins using DAVID software. In particular, we showed new phosphorylation sites from membrane proteins related to various cell signaling mechanisms. This method may contribute to study global signal networks induced by various signals including ligands and drugs.

• KSBB Journal
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• 제9권1호
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• pp.35-39
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• 1994

강산성 양이온 교환수지를 이용하여 설탕, 포도당이 혼존되어 있는 fructo-oligosaccharides 시럽으로부터 순수한 fructo-oligosaccharides를 분리정제하였다. 분리 조건을 최적화한 결과, 수지탑 운전온도 $80^{\circ}C$, 유속 $0.25h^{-1}$이었으며, 수지탑의 높이와 직경의 비율은 25 이상에서 효과적이었다. 최적 조건에서 4회 분리를 수행한 결과, 분리율은 66%이었으며, 제품의 순도는 96%이었다. 분리된 fructo-oligosaccharides 용액은 양이온 교환수지와 음이온 교환수지가 함께 충전된 혼상 수지탑을 이용하여 염과 색소를 동시에 제거한 후 농축하여 최종제품을 제조하였다.

• 분석과학
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• 제5권3호
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• pp.269-276
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• 1992

An ion-exchange/conductometric method is applied for the determination of total acidity in simulated atmospheric samples. Non-$H^+$ cations and strong acid anions are enriched by the preconcentrator columns in series and eluted through the corresponding parallel suppressor units. The conductivities from each channel correspond to the concentrations of the resulting ionized species in equivalents per unit volume. The difference is the measure of acidity due to strong acids. With 5-min sampling at a flow rate of 0.3 mL/min, the detection limits for ${NH_4}^+$ and ${SO_4}^{2-}$ are 0.3 and $0.1{\mu}equiv/L$, respectively. The acidity for samples composed of various ions can be determined without significant error, usually less than 5%. The proposed method discriminates against the artifact from the $CO_2$ dissolution. Principles of acidity measurements are also presented.

• 대한화학회지
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• 제31권1호
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• pp.45-54
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• 1987

Calcon carboxylic acid[2-hydroxy-1-(2-hydroxy-4-sulfo-1-naphthylazo)-3-naphthoic acid;CCA)]를 이온교환시킨 Dowex 1-X8수지(CCA-Dowex 1-X8)와 2-methyl-8-hydroxyquinoline(MHQ)을 침윤시킨 Amberlite XAD-4 수지(MHQ-XAD-4)를 여러가지 매질중에 있는 철(Ⅲ)이온의 분리-농축에 사용하였다. 이들 수지의 안정성을 검토하고 철(Ⅲ)이온에 대한 흡착능을 측정하였다. 매트릭수의 주성분인 Al(Ⅲ), Ca(Ⅱ), 및 Fe(Ⅲ)들의 수지에 대한 흡착성을 pH를 변화시키며 조사하여 최적 pH범위를 결정하였다. 용리법으로 알루미늄호일과 초정약수중 미량의 철분을 매트릭스 이온으로부터 분리-농축하였다. 농축된 Fe(Ⅲ)는 소량의 강산으로 용리시켜 불꽃 원자흡광광도법으로 정량하였다. 초정약수중의 Fe(Ⅱ)와 Fe(Ⅲ) 이온들은 SP-Sephadex C-25컬럼으로 농축하고, ferrozine용액과 1% ascorbic acid-ferrozine용액으로 단계적 용리법에 의해 용리시킴으로써 각각을 분리할 수 있었다. 분리된 각 이온들은 Fe(Ⅲ)-ferrozine착물의 분석 파장인 562nm에서 분광 광도법으로 정량하였다.

• 대한화학회지
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• 제12권2호
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• pp.47-50
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• 1968

Dowex $1{\times}4$ 陰이온 交煥樹指를 二段階(높이:下段 22cm, 上段 3cm, 直經 1.5cm)로 充塡하여 비스머스 金屬中에 들어있는 不純物인 Pb(II), Ag(I), Cu(II)를 7.5M 鹽酸으로, 그리고 Zn(II), Fe(III)를 0.5M 鹽酸으로 分離하고 上段에 남아있는 Te(IV)은 2M NaOH 용액으로 容出하고 아직도 上段에 남아있는 Au(III)는 樹脂를 태워서 分離하였다. 또 한가지 方法은 같은 樹脂를 10cm 높이로 一段階의 管에 充塡하여 0.5M 鹽酸으로 Pb(II), Ag(I), Cu(II), Fe(III), Zn(II)를 함께 容出하여 비스머스 中에서 分離하였다. 分離된 모든 不純物은 比色法으로 定量하였다.

• 산업식품공학
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• 제15권3호
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• pp.276-281
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• 2011

탈지미강으로부터 피틴산을 추출 및 정제하기 위한 최적조건을 설정하였다. 탈지미강을 10배수의 0.5% HCl 용액으로 1시간 처리하였을 때 피틴산의 추출효율이 가장 좋았으며 중화제로는 0.5% NaOH 용액이 적합하였다. 피틴산의 정제를 위하여 Diaion HP20 흡착 컬럼을 이용하여 불순물을 제거한 후 여러 가지 이온교환수지를 이용하여 피틴산을 정제하였을 때 Amberlite IRA-416 이온교환수지의 회수율이 가장 높았다. Amberlite IRA-416 이온교환수지를 이용하여 피틴산을 수지에 흡착시킨 다음 0.5% NaOH 용액으로 용출시켰을 경우 89%의 회수율을 나타내었다. 정제된 피틴산의 총단백질 함량은 0.14%(w/w)로 대부분의 단백질이 제거됨을 확인하였다.

• 생명과학회지
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• 제12권4호
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• pp.490-495
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• 2002

병원성 미생물인 Vibrio fluvialis로부터 hemolysin을 분리정제 하였다. 즉, hemolysin의 정제는 균 배양액을 황산암모늄, ion exchange chromatography를 행하였으며 SDS-PAGE를 통해 그 단백질의 크기가 약 79kDa임을 알게되었다. 정제된 hemolysin (VFH)는 35$^{\circ}C$에서 최적활성을 나타내었고, 4$0^{\circ}C$에서는 그 활성이 감소되었다. RTG-2 어류유래 세포주에 hemolysin (VFH)의 처리로 세포독성을 측정한 결과 50$\mu\textrm{g}$의 VFH가 약 80%의 cell line을 사멸시켰다. 또한 현미경을 통한 관찰에서도 세포의 형태변화를 관찰할 수 있었다.

• 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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• 한국미생물생명공학회 1986년도 추계학술대회
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• pp.515.1-515
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• 1986

Thermostable tryptophanase was extracted from a thermophilie bacterium, strain T which was absolutely symbiotic with strain 5. The enzyme was purified 14.7 fold with 5.8% yield by chromatographies using ion exchange, gel filtration, and hydrophobic interaction columns, followed by high performance liquid chromatography on hydroxyapatite column. The purified enzyme has a molecular weight of approximately 210,000 estimated by gel filtration column chromatography, and the molecular weight of subunit was determined by SDS polyacrylamide gel electrophoresis to be 46,000, which indicates that the native enzyme is made of four homologous subunits. The tryptophanase was stable at 65o0 and the optimum temperature for the enzyme activity for 20 min reaction was 70$^{\circ}C$. The purified enzyme activity for 20 min ieaction was 70$^{\circ}C$. The purified enzyme catalyzed the degradation of L-tryptophan into indole, pyruvate and ammonia in the presence of pyridoxal phosphate. 5-Hydroxy-Ltryptophan, 5-methyl-DL-tryptophan, L-cysteine, S-methyl-L-cysteine, 5-methyl-DL-tryptophan, L-cysteine, S-methyl-Lcysteine, and L-serine were also used as substrates to form pyruvate. The amino acid composition of the tryptophanase was determined, and found to contain a high percentage of hydrophobic amino acids, especially in the proline content, which was much higher than that of Escherichia coli tryptophanase. In addition, the 35N-terminal amino acid sequence of the tryptophanase was completely different from that of E. coli tryptophanase.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제3권2호
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• pp.82-86
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• 1998

The maltose binding protein (MBP) fusion protein system is a versatile tool to express and isolate recombinant proteins in E. coli. In this system, MBP fusion proteins are efficiently isolated from whole cell lysate using amylose conjugated agarose beads and then eluted by competition with free maltose. Since MBP is a rather large molecule (∼42 kDa), for further experiments, the MBP part is usually proteolytically cleaved from the fusion protein and subsequently removed by ion-exchange chromatography or rebinding to amylose columns after washing out excess and MBP-bound maltose. In the present study, we have developed an improved method for the removal of cleaved MBP, which is advantageous over conventional methods. In this method, factor Xa cleaved MBP fusion proteins were incubated with Sepharose beads conjugated with MBP specific monoclonal antibodies and then precipitated buy centrifugation, resulting in highly purified proteins in the supernatant.